水杨酸调节AMPK/TSC2/mTOR信号通路增加宫颈癌细胞的放射敏感性研究

发布时间：2021-01-08 11:42

　　目的:一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）是调节细胞能量代谢中的一个关键调控因子。辐射代谢组学研究显示,活化的AMPKαThr172是增加肿瘤细胞放射敏感性的一个潜在靶标,已在乳腺癌、肺癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞得到证实。新近有研究证实,水杨酸（Salicylic acid,SA）可直接活化AMPK。本文旨在研究SA放射治疗是否增加对宫颈癌细胞的辐射增敏作用,以及其潜在的分子机制。方法:结晶紫法检测水杨酸对人宫颈癌HeLa/Ca Ski细胞的生长抑制作用;γH2AX-Foci分析法检测放射诱导的宫颈癌细胞DNA损伤;克隆分析法检测水杨酸对宫颈癌细胞的剂量存活分数和放射生物学参数;蛋白质印迹（Western Blot）检测AMPK、TSC2和mTOR的表达和活化;流式细胞术检测宫颈癌细胞周期及细胞凋亡分布。结果:SA呈剂量（0.5-10mmol/L）和时间（24-72hr）依赖性地抑制宫颈癌Ca Ski、HeLa细胞的生长;SA增加了X-ray 8Gy照射后宫颈癌Ca Ski细胞DNA损伤的γH2AX foci形成,并使DNA修复延迟;细胞克隆分析显示,SA显著（P<0.05）降低... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１福射及药物对ＡＭＰＫ信号通路调控的简要作用机制??大量研究发现，抑制ＡＭＰＫ后细胞对电离福射的敏感性下降

细胞的存活率同样随浓度增加而下降，并分别在浓度为２、０．５ｍｍｏｌ化时即??出现统计学差异；进一步比较浓度为４ｍｍｏｌ／Ｌ时２４、４８与７２小时的细胞??存活率，其结果也具有统计学差异（ｐ＜０．０５），详见图１．２，表１．２；??２０??

小时后对比ＨｅＬａ和Ｃａ?Ｓｋｉ细胞存活率差异。采用重复测量的方差分析。??结果显示ｐ＝０．６０，即水杨酸作用２４小时后ＨｅＬａ和Ｃａ?Ｓｋｉ细胞存活率无统??计学差异，结果见图１．３。??１．２??１０?？??《。８??凄。６??Ｄ．４?＿？?ｈｅｌａ??０．２?－Ａ－?ｃａｓｋｉ??０．０?Ｉ?????０．０?０．５?１．０?２．０?４．０?６．０?８．０?１０．０??水杨酸浓度ｍｍｏｌ／Ｌ??图１．３：水杨酸作用２４小时后ＨｅＬａ和Ｃａ?Ｓｋｉ细胞存活率比较??１．４选择合适的药物浓度作用福巧增敏研究浓度??为了避免水杨酸本身对细胞的毒性作用，同时又可最大限度的增加对??肿瘤细胞的福射增敏作用，在随后的实验中我们将采用药物抑制浓度ＩＣ２０，??即细胞存活率为８０％时的药物浓度来进行福射增敏实验的研究。此外，考??虑到鱗癌是临床上更常见的宫颈癌病理类型，而两种细胞系对水杨酸的敏??感性差异不大，因此，我们选择Ｃａ?Ｓｋｉ细胞作为福射增敏研究的对象。??根据Ｃａ?Ｓｋｉ细胞２４小时后浓度－存活率拟合细胞存活率曲线。拟合公??克?ｙ＝－０．０６６２ｘ＋１．０１３１?（民２＝０．９９４１６），代入公式计算，ＩＣ２０＝３．３ｍｍｏｌ／Ｌ，而当??药物浓度为４ｍｍｏｌ／Ｌ时，存活率为７５．８３％，故最后我们选择４ｍｍ〇ｙＬ作??２２

【参考文献】：
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本文编号：2964534