宫颈脱落细胞HPV58感染状况及其E6E7重组病毒的构建
发布时间：2021-01-14 15:54
目的1、了解宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）感染状况,探究高危型人乳头瘤病毒（high risk-HPV,HR-HPV）感染与宫颈细胞病理学特征之间的关系。2、利用人乳头瘤病毒58突变型E6E7（Mutant type E6E7,m E6E7）融合基因为靶点,以对人无致病性的巨细胞病毒株（Towne株）细菌人工染色体（SW102Towne bacterial artificial chromosome,SW102-T-BAC）为载体,构建携带HPV58m E6E7融合基因的重组病毒,鉴定HPV58m E6E7转化活性,为HPV58型治疗性疫苗研究奠定基础。方法1、收集体检普查女性宫颈脱落细胞,以所提DNA为模板,用HPV L1区通用引物MY09/11,进行PCR扩增,检测宫颈脱落细胞总感染率;利用HPV E6型特异性引物检测宫颈脱落细胞中具体感染型别;统计分析HPV感染与临床病理特征的关系。2、PCR扩增带有50bp Towne开放读码框（open reading frame,ORF）75左右同源臂的Galk、HPV58 E6E7融合基因,采...
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
用β-actin引物检测标本质量的结果
第1章宫颈脱落细胞HPV58型感染状况分析-15-1)利用荧光定量PCR法，对总感染率为阳性的标本DNA进行扩增检测，检测到HPV16型42例；HPV18型15例；HPV31型9例；HPV33型15例；HPV35型6例；HPV39型20例；HPV45型3例；HPV51型21例；HPV52型80例；HPV56型18例；HPV58型78例；HPV59型19例；HPV68型16例；HPV66型28例；HPV82型10例。感染率排在前三位的为HPV52型占13.96%，HPV58型占13.61%，HPV16型占7.33%。2）验证实验设置阴性对照组为未感染HPV的293细胞DNA。另外，检测过程还设置阳性对照组，分别为含有HPV16的Caski细胞、含有HPV18的Hele细胞、含有HPV58的质粒DNA，用以检测HPV16、HPV18、HPV58的感染率。引物分别为表1中列出的HPV16/18/58的E6区引物。PCR扩增检测标本DNA，用1%琼脂糖凝胶电泳对扩增反应的产物进行检测，凝胶成像仪用于产物条带的观察。检测到42例HPV16型阳性（图3）,15例HPV18型阳性（图4）,78例HPV58型阳性（图5）。经检测，42例标本可以扩增出目的条带，说明有42例标本为HPV16阳性，阳性率为7.33%（42/573）。图3PCR扩增检测HPV16感染状况M：DL2000DNALadder，Neg：阴性对照，Caski：阳性对照，1-7：标本PCR扩增检测HPV16感染状况。图4PCR扩增检测HPV18感染状况M：DL2000DNALadder,Neg代表阴性对照，Hela代表阳性对照，1-7分别为标本HPV18感染状况的检测。
第1章宫颈脱落细胞HPV58型感染状况分析-15-1)利用荧光定量PCR法，对总感染率为阳性的标本DNA进行扩增检测，检测到HPV16型42例；HPV18型15例；HPV31型9例；HPV33型15例；HPV35型6例；HPV39型20例；HPV45型3例；HPV51型21例；HPV52型80例；HPV56型18例；HPV58型78例；HPV59型19例；HPV68型16例；HPV66型28例；HPV82型10例。感染率排在前三位的为HPV52型占13.96%，HPV58型占13.61%，HPV16型占7.33%。2）验证实验设置阴性对照组为未感染HPV的293细胞DNA。另外，检测过程还设置阳性对照组，分别为含有HPV16的Caski细胞、含有HPV18的Hele细胞、含有HPV58的质粒DNA，用以检测HPV16、HPV18、HPV58的感染率。引物分别为表1中列出的HPV16/18/58的E6区引物。PCR扩增检测标本DNA，用1%琼脂糖凝胶电泳对扩增反应的产物进行检测，凝胶成像仪用于产物条带的观察。检测到42例HPV16型阳性（图3）,15例HPV18型阳性（图4）,78例HPV58型阳性（图5）。经检测，42例标本可以扩增出目的条带，说明有42例标本为HPV16阳性，阳性率为7.33%（42/573）。图3PCR扩增检测HPV16感染状况M：DL2000DNALadder，Neg：阴性对照，Caski：阳性对照，1-7：标本PCR扩增检测HPV16感染状况。图4PCR扩增检测HPV18感染状况M：DL2000DNALadder,Neg代表阴性对照，Hela代表阳性对照，1-7分别为标本HPV18感染状况的检测。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人乳头瘤病毒治疗性疫苗的研究进展[J]. 黄诗雯,宋硕,王致萍,夏宁邵,李少伟. 病毒学报. 2020(02)
[2]微生物感染与食管癌的相关性研究进展[J]. 彭垒,贺建华. 世界最新医学信息文摘. 2019(06)
[3]2 466例高危型人乳头瘤病毒亚型的感染和分布研究[J]. 杨紫汐,龙文波,陈明,刘云,刘洁,张原雪,孙兴旺. 重庆医学. 2018(36)
[4]妇科就诊人群高危型HPV感染情况分析及与TCT相关性研究[J]. 姚国光,马亮,丛笑,马莉,姜永玮,李囡,杨辉,杨春峰,曹永彤. 中日友好医院学报. 2018(04)
[5]重组九价人乳头瘤病毒疫苗大鼠安全性和免疫原性研究[J]. 刘丽,黄瑛,吕建军,王超,苗玉发,杨艳伟,霍艳,张河战,银飞,张尧,刘永江,李波. 中国药学杂志. 2018(14)
[6]宫颈癌机会性筛查人群中高危型HPV感染状况及其与宫颈病变关系的研究[J]. 韩钦,郭红燕,耿力. 实用妇产科杂志. 2018(03)
[7]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[8]719例女性HPV感染情况及其亚型分析[J]. 李芳芹,汪敏,杜伟平. 延安大学学报(医学科学版). 2017(04)
[9]无明确诊断意义的鳞状细胞病变（ASCUS）临床处理分析[J]. 居小平,俞飞,姜慧. 基层医学论坛. 2017(22)
[10]预防性人乳头瘤病毒疫苗的研发和使用进展[J]. 吉赛赛,李克莉,李燕,李黎. 中国疫苗和免疫. 2017(02)
本文编号：2977129
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
用β-actin引物检测标本质量的结果
第1章宫颈脱落细胞HPV58型感染状况分析-15-1)利用荧光定量PCR法，对总感染率为阳性的标本DNA进行扩增检测，检测到HPV16型42例；HPV18型15例；HPV31型9例；HPV33型15例；HPV35型6例；HPV39型20例；HPV45型3例；HPV51型21例；HPV52型80例；HPV56型18例；HPV58型78例；HPV59型19例；HPV68型16例；HPV66型28例；HPV82型10例。感染率排在前三位的为HPV52型占13.96%，HPV58型占13.61%，HPV16型占7.33%。2）验证实验设置阴性对照组为未感染HPV的293细胞DNA。另外，检测过程还设置阳性对照组，分别为含有HPV16的Caski细胞、含有HPV18的Hele细胞、含有HPV58的质粒DNA，用以检测HPV16、HPV18、HPV58的感染率。引物分别为表1中列出的HPV16/18/58的E6区引物。PCR扩增检测标本DNA，用1%琼脂糖凝胶电泳对扩增反应的产物进行检测，凝胶成像仪用于产物条带的观察。检测到42例HPV16型阳性（图3）,15例HPV18型阳性（图4）,78例HPV58型阳性（图5）。经检测，42例标本可以扩增出目的条带，说明有42例标本为HPV16阳性，阳性率为7.33%（42/573）。图3PCR扩增检测HPV16感染状况M：DL2000DNALadder，Neg：阴性对照，Caski：阳性对照，1-7：标本PCR扩增检测HPV16感染状况。图4PCR扩增检测HPV18感染状况M：DL2000DNALadder,Neg代表阴性对照，Hela代表阳性对照，1-7分别为标本HPV18感染状况的检测。
第1章宫颈脱落细胞HPV58型感染状况分析-15-1)利用荧光定量PCR法，对总感染率为阳性的标本DNA进行扩增检测，检测到HPV16型42例；HPV18型15例；HPV31型9例；HPV33型15例；HPV35型6例；HPV39型20例；HPV45型3例；HPV51型21例；HPV52型80例；HPV56型18例；HPV58型78例；HPV59型19例；HPV68型16例；HPV66型28例；HPV82型10例。感染率排在前三位的为HPV52型占13.96%，HPV58型占13.61%，HPV16型占7.33%。2）验证实验设置阴性对照组为未感染HPV的293细胞DNA。另外，检测过程还设置阳性对照组，分别为含有HPV16的Caski细胞、含有HPV18的Hele细胞、含有HPV58的质粒DNA，用以检测HPV16、HPV18、HPV58的感染率。引物分别为表1中列出的HPV16/18/58的E6区引物。PCR扩增检测标本DNA，用1%琼脂糖凝胶电泳对扩增反应的产物进行检测，凝胶成像仪用于产物条带的观察。检测到42例HPV16型阳性（图3）,15例HPV18型阳性（图4）,78例HPV58型阳性（图5）。经检测，42例标本可以扩增出目的条带，说明有42例标本为HPV16阳性，阳性率为7.33%（42/573）。图3PCR扩增检测HPV16感染状况M：DL2000DNALadder，Neg：阴性对照，Caski：阳性对照，1-7：标本PCR扩增检测HPV16感染状况。图4PCR扩增检测HPV18感染状况M：DL2000DNALadder,Neg代表阴性对照，Hela代表阳性对照，1-7分别为标本HPV18感染状况的检测。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人乳头瘤病毒治疗性疫苗的研究进展[J]. 黄诗雯,宋硕,王致萍,夏宁邵,李少伟. 病毒学报. 2020(02)
[2]微生物感染与食管癌的相关性研究进展[J]. 彭垒,贺建华. 世界最新医学信息文摘. 2019(06)
[3]2 466例高危型人乳头瘤病毒亚型的感染和分布研究[J]. 杨紫汐,龙文波,陈明,刘云,刘洁,张原雪,孙兴旺. 重庆医学. 2018(36)
[4]妇科就诊人群高危型HPV感染情况分析及与TCT相关性研究[J]. 姚国光,马亮,丛笑,马莉,姜永玮,李囡,杨辉,杨春峰,曹永彤. 中日友好医院学报. 2018(04)
[5]重组九价人乳头瘤病毒疫苗大鼠安全性和免疫原性研究[J]. 刘丽,黄瑛,吕建军,王超,苗玉发,杨艳伟,霍艳,张河战,银飞,张尧,刘永江,李波. 中国药学杂志. 2018(14)
[6]宫颈癌机会性筛查人群中高危型HPV感染状况及其与宫颈病变关系的研究[J]. 韩钦,郭红燕,耿力. 实用妇产科杂志. 2018(03)
[7]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[8]719例女性HPV感染情况及其亚型分析[J]. 李芳芹,汪敏,杜伟平. 延安大学学报(医学科学版). 2017(04)
[9]无明确诊断意义的鳞状细胞病变（ASCUS）临床处理分析[J]. 居小平,俞飞,姜慧. 基层医学论坛. 2017(22)
[10]预防性人乳头瘤病毒疫苗的研发和使用进展[J]. 吉赛赛,李克莉,李燕,李黎. 中国疫苗和免疫. 2017(02)
本文编号：2977129
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/2977129.html
最近更新
教材专著
