Talin1/miR-1285-3p/PIPK1信号轴通过PI3K/AKT通路调控子宫内膜粘附作用的分子机制研究

发布时间：2021-01-19 07:00

　　目的:探究Talin1对子宫内膜粘附作用的影响及潜在的分子机制设计:分析Talin1/miR-1285-3p/PIPK1信号轴对子宫内膜粘附作用的影响及所涉及的相关信号通路方法:第一部分,运用定量PCR（QPCR）、蛋白免疫印迹（WB）、免疫组织化学（IHC）方法检测Talin1,FAK,Vinculin及整合素αvβ3在蜕膜及绒毛组织中的表达水平。第二部分,首先,在子宫内膜细胞株及人滋养细胞株中,利用RNA干扰技术（RNAi）将Talin1及PIPK1沉默;PCR及WB方法检测Talin1沉默（siTalin1）及PIPK1沉默（siPIPK1）对粘附相关分子（FAK/Vinculin/αvβ3）表达的影响;细胞粘附实验探究siTalin1及siPIPK1对细胞粘附功能的影响;流式细胞技术检测siTalin1及siPIPK1对细胞周期分布及凋亡水平的影响;PCR及WB方法检测siTalin1及siPIPK1对周期相关分子（Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4）表达的影响。第三部分,通过生物信息学预测Talin1和PIPK1可共同结合的miRNAs,寻找可能存在的Talin... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：100 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

QRT-PCR检测Talin1、整合素αvβ3、FAK及Vinculin的表达水平（NAT：正常流产组织；MAT：稽留流产组织；Medain：中位数）

图 1-2 Western Blot 检测 Talin1、整合素αvβ3、FAK 及 Vinculin 的表达水平（N：正常流产组织；M：稽留流产组织）Figure 1-2. Expression of Talin1, αvβ3, FAK and Vinculin were measured via Western (NAT: normal abortion tissues; MAT: missed abortion tissues)疫组化检测 Talin1、整合素αvβ3、FAK 及 Vinculin 在绒毛组疫组化评分标准:疫组化染色结果的评分，需综合考虑阳性反应染色强度和阳。免疫组化的阳性细胞显示棕色信号，染色指数是指染色强的乘积。染色强度的分数划分标准为：阴性，0 分；弱阳性性，2 分；强阳性，3 分。阳性细胞频率的划分标准为：少

Talin1/miR-1285-3p/PIPK1 信号轴通过 PI3K/AKT 通路调控子宫内膜容受性的分子机制研究 2019 届博士研究生学位论0 分；5%-25%，1 分；26%-50%，2 分；51%-75%，3 分；大于 75%，4 分当染色异构的时候，我们的评分标准会做出微调，但评分准则不变：每评分都是独立的，结果是综合的。如一个标本包含 75%的阳性细胞中等度染色（3*2=6 分），另外 25%阳性细胞是弱强度的（1*1=1），最后得到结果是 6+1=7。0-7 分属于是低表达范围，8-12 分属于高表达范围。结果显示：上述四个黏附因子与正常人工流产患者的组织比较，在留流产患者的绒毛组织中同样表达下调。

【参考文献】：
期刊论文
[1]哺乳动物胚胎着床分子机制综述的研究现状[J]. 吕波,薛金锋,祝献民,曾桥,薛志刚.  中华生殖与避孕杂志. 2018(01)



本文编号：2986550