CD59在子痫前期中的表达及与其发病的关系
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【摘要】:目的研究子痫前期患者与正常妊娠妇女CD59阳性外周血单个核细胞(PBMC)、胎盘组织CD59蛋白和CD59基因表达的差异及其意义,探讨CD59分子在子痫前期患者发病中的作用。方法选取在滨医附院住院分娩的孕产妇57例,其中重度子痫前期孕产妇27例(重度子痫前期组),同期正常妊娠晚期孕产妇30例为对照组。在入院后检测以下内容:⑴采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测各组产妇外周血单个核细胞(PBMC)CD59的水平;⑵采用免疫组织化学技术检测各组产妇胎盘CD59蛋白的表达水平;⑶利用荧光实时定量PCR技术检测各组产妇胎盘组织CD59基因的表达水平。其中重度子痫前期组患者在入院后治疗3-5天及行剖宫产手术,术后1天再次抽血检测外周血单个核细胞(PBMC)CD59水平,与治疗前进行对比。结果⑴流式细胞术检测正常晚期妊娠组外周血单个核细胞(PBMC)CD59分子的阳性表达水平为86.86±1.91,重度子痫前期组CD59分子的表达水平为27.26±7.05,明显低于晚期妊娠组,差异有统计学意义(P0.05)。重度子痫前期组治疗后CD59阳性细胞数目增多,治疗后CD59表达水平增加至76.46±3.91,治疗前后差异有统计学意义;⑵免疫组织化学检测结果显示重度子痫前期组胎盘组织CD59蛋白呈阴性表达,晚期妊娠孕产妇胎盘组织CD59蛋白呈阳性表达;⑶实时荧光定量PCR检测重度子痫前期组胎盘组织的CD59基因表达相对量显著低于正常妊娠晚期组,差异有统计学意义。结论重度子痫前期患者CD59无论是在细胞水平、蛋白水平、基因水平上都明显低于正常妊娠晚期孕产妇。重度子痫前期患者经治后外周血单个核细胞(PBMC)CD59表达水平明显升高。提示外周血单个核细胞(PBMC)和胎盘CD59分子的表达水平降低与子痫前期的发生密切相关。
【关键词】:子痫前期 CD59 流式细胞术 免疫组化 实时荧光定量PCR
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R714.244
【目录】:
- 摘要2-3
- Abstract3-6
- 引言6-8
- 技术路线8-9
- 第一章 资料和方法9-13
- 1.1 研究对象和分组9
- 1.2 主要试剂和仪器9
- 1.2.1 主要试剂9
- 1.2.2 主要仪器9
- 1.3 病史采集9-10
- 1.4 标本采集10
- 1.5 流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)CD59分子表达10
- 1.6 免疫组化技术检测胎盘组织CD59蛋白表达10-11
- 1.7 实时荧光定量PCR检测胎盘组织CD59基因表达11-12
- 1.7.1 引物设计与合成11
- 1.7.2 标本研磨及RNA提取11
- 1.7.3 逆转录反应(RT-PCR)11
- 1.7.4 实时荧光定量PCR扩增及数据分析11-12
- 1.8 统计学分析12-13
- 第二章 结果13-18
- 2.1 流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)CD59表达13-15
- 2.1.1 重度子痫前期与晚期妊娠组外周血单个核细胞(PBMC)CD59表达情况13-14
- 2.1.2 SYBR Real-Time qPCR数据分析结果14-15
- 2.2 免疫组化技术检测胎盘组织CD59蛋白表达15
- 2.3 实时荧光定量PCR检测胎盘组织CD59基因表达15-18
- 2.3.1 SYBR Real-Time qPCR检测结果15-16
- 2.3.2 SYBR Real-Time qPCR数据分析结果16-18
- 第三章 讨论18-22
- 结论22-23
- 参考文献23-25
- 综述25-36
- 综述参考文献34-36
- 攻读学位期间的研究成果36-37
- 附录37-38
- 致谢38-39
【共引文献】
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