nm23-H1和β-catenin表达异常在EMs发生发展中的作用机制
发布时间：2021-01-24 14:14
目的:子宫内膜异位症是妇科常见的慢性炎症性疾病,是子宫体外的其他部位出现了子宫内膜组织,治疗主要是通过腹腔镜手术去除病灶本身,术后予以Gn RH激动剂激素辅助治疗。子宫内膜异位症发病机制不确切,nm23-H1是抑制肿瘤转移的基因,本实验室前期已验证nm23-H1在内异症的发展过程中发挥着重要的作用;β-catenin是粘附分子大家族中的一员,也是上皮间质化的生物指标之一,在肿瘤疾病中,有着粘附、种植等作用。nm23-H1在缺氧或被敲除、沉默的状态下表达下调,增加了上皮间质化及间质细胞活性,为进一步研究β-catenin在内异症中的作用机制及nm23-H1是否通过β-catenin或相关通路来促进内异症中的发生,是否受雌激素影响疾病的发生发展,进一步深入了解内异症的发病原理。方法:收集正常子宫内膜组织和内异症异位组织各10例,培养原代子宫内膜间质细胞,培养的间质细胞分为三组,第一组用不同浓度的雌激素（0、10-8、10-6mol/L）刺激间质细胞24h,第二组用nm23-H1的小干扰RNA片段转染入细胞作用24h,第三组细胞不做任何处理做空白对照,处理后提取RNA,采用Qrt-PCR检测...
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
培养24h后的内异症的间质细胞
皖南医学院硕士学位论文结 果1 子宫内膜间质细胞培养1.1 原代细胞培养正常组的间质细胞接种后 2h，大部分细胞已经贴壁，间质细胞培养前期形态是多边形或者椭圆形，渐渐形态开始向两端生长，为梭形或多边形。异位症的异位病灶的间质细胞贴壁时间较正常组长，受个体差异性影响较大。间质细胞传代可传 10 代以上，且通过免疫组化，波形蛋白对细胞进行鉴定种类的鉴定和纯度检测，间质细胞的纯度可达 90%以上，符合实验要求。
图 1 培养 24h 后的内异症的间质细胞 图 2 培养 48h 后的内异症的间质细胞Fig 1 the stromal cells after 24h in EM Fig2 the stromal cells after 48h in EM1.2 siRNA 转染经过 nm23-H1 的小干扰 RNA 的转染的间质细胞，siRNA 进入细胞质内，通过倒置的荧光显微镜观察如图 3 所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]子宫内膜异位症腹腔镜保守治疗术后联用GnRHa对临床妊娠率的影响[J]. 何丽清,蔡序子,王艳,王雪峰. 南方医科大学学报. 2018(05)
[2]Enterolactone modulates the ERK/NF-κB/Snail signaling pathway in triple-negative breast cancer cell line MDA-MB-231 to revert the TGF-β-induced epithelial–mesenchymal transition[J]. Aniket V.Mali,Asavari A.Joshi,Mahabaleshwar V.Hegde,Shivajirao S.Kadam. Cancer Biology & Medicine. 2018(02)
[3]Silencing of syndecan-binding protein enhances the inhibitory effect of tamoxifen and increases cellular sensitivity to estrogen[J]. Jun Zhang,Xiaolong Qian,Fangfang Liu,Xiaojing Guo,Feng Gu,Li Fu. Cancer Biology & Medicine. 2018(01)
[4]维生素C对肉鸡缺氧肺动脉平滑肌细胞缺氧诱导因子-1α转录水平的影响[J]. 曹林,曾秋凤,张克英,丁雪梅,白世平,罗玉衡,王建萍,玄玥,宿卓薇. 畜牧兽医学报. 2016(02)
[5]siRNA干扰β-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的研究[J]. 于锋,黄鑫,艾毛毛,林颖. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2015(13)
[6]人子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞永生化细胞系的建立及鉴定[J]. 陈颖,易雁鸿,韩红敬,沈丹华,程洪艳,叶雪,马瑞琼,崔恒,昌晓红. 中国妇产科临床杂志. 2014(01)
[7]胶原酶分离及低速离心结合筛网过滤法纯化子宫内膜细胞的研究[J]. 张婷婷,张瑞晓,林明媚,罗璐,吴惠茜,王琼,周灿权. 生殖与避孕. 2014(01)
[8]子宫内膜异位症的在位内膜病变研究进展[J]. 仝佳丽,郎景和. 现代妇产科进展. 2010(06)
[9]雌、孕激素通过激活磷酸化信号传导通路调控卵巢上皮性癌细胞nm23-H1蛋白的表达[J]. 华克勤,尧良清,曹琦,黄妍,赵宇清,丰有吉. 中华妇产科杂志. 2006(11)
[10]人子宫内膜异位症在位和异位内膜细胞原代培养及形态学观察[J]. 俞超芹,石书芳,刘玉环,王瑞霞,宋艳华,俞瑾. 中西医结合学报. 2006(02)
博士论文
[1]雌激素介导的Wnt/β-catenin信号通路调控子宫内膜异位症上皮间质转化的作用机制研究[D]. 熊文倩.华中科技大学 2016
硕士论文
[1]nm23-H1与整合素α3、β1在子宫内膜异位症中的表达研究及相关性探讨[D]. 段仁杰.皖南医学院 2016
本文编号：2997389
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
培养24h后的内异症的间质细胞
皖南医学院硕士学位论文结 果1 子宫内膜间质细胞培养1.1 原代细胞培养正常组的间质细胞接种后 2h，大部分细胞已经贴壁，间质细胞培养前期形态是多边形或者椭圆形，渐渐形态开始向两端生长，为梭形或多边形。异位症的异位病灶的间质细胞贴壁时间较正常组长，受个体差异性影响较大。间质细胞传代可传 10 代以上，且通过免疫组化，波形蛋白对细胞进行鉴定种类的鉴定和纯度检测，间质细胞的纯度可达 90%以上，符合实验要求。
图 1 培养 24h 后的内异症的间质细胞 图 2 培养 48h 后的内异症的间质细胞Fig 1 the stromal cells after 24h in EM Fig2 the stromal cells after 48h in EM1.2 siRNA 转染经过 nm23-H1 的小干扰 RNA 的转染的间质细胞，siRNA 进入细胞质内，通过倒置的荧光显微镜观察如图 3 所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]子宫内膜异位症腹腔镜保守治疗术后联用GnRHa对临床妊娠率的影响[J]. 何丽清,蔡序子,王艳,王雪峰. 南方医科大学学报. 2018(05)
[2]Enterolactone modulates the ERK/NF-κB/Snail signaling pathway in triple-negative breast cancer cell line MDA-MB-231 to revert the TGF-β-induced epithelial–mesenchymal transition[J]. Aniket V.Mali,Asavari A.Joshi,Mahabaleshwar V.Hegde,Shivajirao S.Kadam. Cancer Biology & Medicine. 2018(02)
[3]Silencing of syndecan-binding protein enhances the inhibitory effect of tamoxifen and increases cellular sensitivity to estrogen[J]. Jun Zhang,Xiaolong Qian,Fangfang Liu,Xiaojing Guo,Feng Gu,Li Fu. Cancer Biology & Medicine. 2018(01)
[4]维生素C对肉鸡缺氧肺动脉平滑肌细胞缺氧诱导因子-1α转录水平的影响[J]. 曹林,曾秋凤,张克英,丁雪梅,白世平,罗玉衡,王建萍,玄玥,宿卓薇. 畜牧兽医学报. 2016(02)
[5]siRNA干扰β-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的研究[J]. 于锋,黄鑫,艾毛毛,林颖. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2015(13)
[6]人子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞永生化细胞系的建立及鉴定[J]. 陈颖,易雁鸿,韩红敬,沈丹华,程洪艳,叶雪,马瑞琼,崔恒,昌晓红. 中国妇产科临床杂志. 2014(01)
[7]胶原酶分离及低速离心结合筛网过滤法纯化子宫内膜细胞的研究[J]. 张婷婷,张瑞晓,林明媚,罗璐,吴惠茜,王琼,周灿权. 生殖与避孕. 2014(01)
[8]子宫内膜异位症的在位内膜病变研究进展[J]. 仝佳丽,郎景和. 现代妇产科进展. 2010(06)
[9]雌、孕激素通过激活磷酸化信号传导通路调控卵巢上皮性癌细胞nm23-H1蛋白的表达[J]. 华克勤,尧良清,曹琦,黄妍,赵宇清,丰有吉. 中华妇产科杂志. 2006(11)
[10]人子宫内膜异位症在位和异位内膜细胞原代培养及形态学观察[J]. 俞超芹,石书芳,刘玉环,王瑞霞,宋艳华,俞瑾. 中西医结合学报. 2006(02)
博士论文
[1]雌激素介导的Wnt/β-catenin信号通路调控子宫内膜异位症上皮间质转化的作用机制研究[D]. 熊文倩.华中科技大学 2016
硕士论文
[1]nm23-H1与整合素α3、β1在子宫内膜异位症中的表达研究及相关性探讨[D]. 段仁杰.皖南医学院 2016
本文编号：2997389
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