基于孕酮建立的精子优选方法及其机制研究

发布时间：2021-01-24 21:40

　　目的:建立基于孕酮的精子优选方法并且研究相关调节机制。方法:设计制作了一种模拟人类女性生殖系统的长距离通道装置,用不同的孕酮浓度及其位置制备精子优选条件,并通过检测不同时间点不同位置处的精子浓度加以验证。用Diff-quik染色、染色质扩散法和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶染色法分别检测精子优选前后的形态、DNA片段和凋亡状态,评价所建立方法的效果。用热休克蛋白90（Hsp90）特异性抑制剂格尔德霉素处理孕酮诱导的人精子,然后分别经金霉素染色评价获能、计算机辅助精子分析仪（CASA）分析运动参数和超激活运动百分率。用间接免疫荧光染色分别检测Hsp90与细胞分裂周期蛋白Cdc37（Cdc37）、内皮型一氧化碳合酶（eNOS）共定位情况;通过免疫共沉淀技术证明Hsp90与其共伴侣Cdc37的相互作用。用免疫印迹方法分析Hsp90在人精子获能期间表达情况以及格尔德霉素处理对其影响;分析蛋白激酶A（PKA）抑制剂H-89和蛋白激酶C（PKC）抑制剂Go6983在精子获能期间对Hsp90的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸化影响,Hsp90抑制剂17-AAG对人精子酪氨酸蛋白激酶Src活性位点Y4... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：127 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
中文摘要
英文摘要
缩略词索引表
引言
    参考文献
第一部分 基于孕酮建立的优选方法提高人精子质量
    1.1 材料和方法
    1.2 结果
    1.3 讨论
    1.4 结论
    参考文献
第二部分 孕酮调节人精子功能受Hsp90介导
    2.1 材料与方法
    2.2 结果
    2.3 讨论
    2.4 结论
    参考文献
第三部分 Hsp90在精子获能期间的调节机制
    3.1 材料与方法
    3.2 结果
    3.3 讨论
    3.4 结论
    参考文献
全文总结论
综述
    参考文献
作者简历及在读期间取得成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]热休克蛋白90与人精子氧化应激相关性的初步研究[J]. 谢海锋,李坤,陈爱君,倪崖.  医学研究杂志. 2014(07)
[2]Cryopreservation-induced decrease in heat-shock protein 90 in human spermatozoa and its mechanism[J]. <author>Wen-Lei CAO, Yi-Xin WANG, Zu-Qiong XIANG, Zheng LI Shanghai Institute of Andrology, Renji Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200001, China.  Asian Journal of Andrology. 2003(01)



本文编号：2997980