溶瘤CVB3病毒在人宫颈癌、子宫内膜癌治疗应用的初步研究

发布时间：2021-01-28 03:09

　　研究背景宫颈癌、子宫内膜癌是常见的女性肿瘤,手术、化疗、放疗--肿瘤治疗的传统方法对晚期宫颈癌、子宫内膜癌效果差,迫切需要寻找新的出路。溶瘤病毒对肿瘤细胞有直接杀伤,同时诱发机体抗肿瘤免疫,其对肿瘤的治疗特异性强,灵敏度高,副作用小,是一种被认为比较有前景的肿瘤治疗手段。CVB3为柯萨奇病毒B组3型,为RNA病毒,作为溶瘤病毒已应用于包括肺癌等研究中。但目前应用于宫颈癌、子宫内膜癌仍鲜有报道。本研究旨在评估CVB3是否对子宫内膜癌、宫颈癌具有溶瘤效果,探讨其应用于临床的可行性。研究过程1.检测宫颈癌、子宫内膜癌细胞系病毒受体DAF和CAR的表达情况,以确定宫颈癌、子宫内膜癌细胞对CVB3的易感性。2.CVB3感染宫颈癌、子宫内膜癌细胞后,进行通过显微镜下观察、结晶紫染色及CCK8法评价其体外溶瘤效果。3.选用单侧荷瘤（子宫内膜癌及宫颈癌）裸鼠,采用单针或5针瘤内注射方法观察体内溶瘤效果。为评价其系统溶瘤的效果,采用了双侧成瘤单纯瘤内注射CVB3及经尾静脉注射CVB3的方法,观察双侧溶瘤情况。4.用膜联蛋白-碘化丙啶（Annexin V-PI）双染色法对CVB3感染后的宫颈癌、子宫内膜癌... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 宫颈癌
        1.1.1 宫颈癌的病因
        1.1.2 宫颈癌的预防
        1.1.3 宫颈癌的治疗
    1.2 子宫内膜癌
        1.2.1 子宫内膜癌概况
        1.2.2 子宫内膜的高危因素
        1.2.3 预防
        1.2.4 子宫内膜癌的治疗
    1.3 肿瘤的免疫治疗
        1.3.1 检查点抑制剂治疗
        1.3.2 嵌合抗原受体T细胞免疫疗法
        1.3.3 肿瘤治疗性疫苗和新抗原
    1.4 溶瘤病毒
        1.4.1 溶瘤病毒的概况
        1.4.2 溶瘤病毒的作用机制
        1.4.3 溶瘤病毒应用存在的问题
        1.4.4 溶瘤肠道病毒
第二章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 仪器
        2.1.2 质粒、细胞株、病毒株、实验动物与临床标本
    2.2 方法
        2.2.1 常规细胞生物学实验
        2.2.2 病毒培养与滴度测定
        2.2.3 病毒对肿瘤细胞的体外杀伤实验
        2.2.4 肿瘤细胞表面病毒相关受体的检测
        2.2.5 细胞周期的检测
        2.2.6 通过流式细胞仪检测细胞膜Annexin V的变化
        2.2.7 CVB3病毒治疗肿瘤的体内治疗研究
        2.2.8 评估CVB3病毒治疗患者来源肿瘤组织效果的组织培养药物应答测定法
    2.3 统计学分析
第三章 实验结果
    3.1 CVB3病毒株的基本信息
        3.1.1 CVB3病毒株的基因序列分析
        3.1.2 CVB3病毒的培养以及感染性克隆的构建、病毒生产与评价
    3.2 CVB3毒株XM2035对宫颈癌细胞的溶瘤效果分析
        3.2.1 宫颈癌细胞基本信息
        3.2.2 宫颈癌细胞表面CVB3病毒受体表达分析
        3.2.3 CVB3体外溶瘤效果分析
        3.2.4 CVB3在宫颈癌细胞中的体外生长动力学研究
        3.2.5 宫颈癌细胞的体内成瘤与CVB3对宫颈癌的体内溶瘤分析
        3.2.6 CVB3感染诱导宫颈癌细胞发生凋亡的初步探索
    3.3 CVB3对子宫内膜癌细胞的溶瘤效果分析
        3.3.1 子宫内膜癌细胞信息列表
        3.3.2 子宫内膜癌细胞表面病毒受体流式分析
        3.3.3 CVB3对子宫内膜癌细胞的体外溶瘤效果分析
        3.3.4 CVB3在子宫内膜癌细胞中的生长动力学研究
        3.3.5 子宫内膜癌细胞的体内成瘤与CVB3对子宫内膜癌的体内溶瘤分析
        3.3.6 CVB3感染诱导子宫内膜癌细胞发生凋亡的初步探索
    3.4 CVB3对宫颈癌与子宫内膜癌临床组织样本的溶瘤分析
        3.4.1 临床资料
        3.4.2 宫颈癌与子宫内膜癌组织培养药敏检测法分析CVB3溶瘤效力
第四章 讨论
    4.1 溶瘤病毒疗法用于治疗宫颈癌与子宫内膜癌的前景探讨
        4.1.1 溶瘤病毒疗法用于宫颈癌治疗的研究现状
        4.1.2 溶瘤病毒疗法用于子宫内膜癌治疗的研究现状
        4.1.3 溶瘤病毒疗法用于宫颈癌与子宫内膜癌治疗的前景浅析
    4.2 CVB3用于治疗宫颈癌与子宫内膜癌的潜在价值
        4.2.1 CVB3具有广谱、高效和特异的溶瘤活性
        4.2.2 CVB3对宫颈癌与子宫内膜癌的溶瘤效果浅析
小结与展望
参考文献
英文缩略词表
在学期间发表论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3004249