染色体微阵列分析在先天性心脏病胎儿遗传学诊断中的应用研究

发布时间：2021-01-31 00:25

　　目的探讨染色体微阵列分析（chromosomal microarray analysis,CMA）在先天性心脏病（congenital heart disease,CHD）胎儿遗传学诊断中的临床应用价值,为推荐全基因组CMA技术作为CHD胎儿产前常规分子诊断方法提供数据支持。方法1.收集2016年2月至2017年5月在福建省妇幼保健院产前诊断中心因胎儿超声心动图诊断CHD而接受侵入性产前诊断的72例胎儿羊水或脐血样本,同时进行染色体核型分析和CMA检测。并根据单一心脏结构畸形、多发心脏结构畸形不合并心外异常、心内合并心外异常分为3组;2.使用Bio Chain试剂盒对羊水细胞提取基因组DNA,使用QIAamp DNA Blood Mini Kit试剂盒对外周血和脐带血样本提取基因组DNA,并用Nanodrop 2000微量紫外分光光度计测定DNA的浓度与纯度;3.按照Affymetrix公司提供的Cyto Scan 750K芯片标准实验操作流程对样本DNA进行消化、连接、扩增、纯化、片段化、标记信号、与芯片杂交、洗片染色及扫描芯片操作;4.使用试剂盒配套的Ch AS软件对扫描结果中的.... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实验技术路线图

图 1.2 CMA 实验操作流程4.5.1 实验准备1）取出-20℃保存的 10×Nsp I buffer（蓝色管盖）、100×BSA（白色黑圈管盖）、试剂盒中提供的基因组 DNA，室温融化；2）将 Chilled Affymetrix Nuclease-Free Water（简称 NF 水），分装到 1.5ml EP 管备用（NF 水分装在超净工作台进行，用时置于冰上，平时 4℃保存）；3）打开 9700PCR 仪，选定消化程序，待热盖升温完毕，暂停程序待用，见图 1.3；图 1.3 消化程序4）待测样本 DNA 浓度若低于 10 ng/μl 应放弃使用，或重新提取；高于 50 ng/μl，

图 1.2 CMA 实验操作流程 10×Nsp I buffer（蓝色管盖）、100×BSA因组 DNA，室温融化；metrix Nuclease-Free Water（简称 NF 水），超净工作台进行，用时置于冰上，平时 4℃仪，选定消化程序，待热盖升温完毕，暂停

【参考文献】：
期刊论文
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[3]多重连接依赖式探针扩增技术在遗传病分子诊断中的应用[J]. 黄际卫,商璇.  分子诊断与治疗杂志. 2012(04)
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本文编号：3009861