IEX-1基因高甲基化在卵巢癌进展中的作用

发布时间：2017-04-12 08:06

  本文关键词：IEX-1基因高甲基化在卵巢癌进展中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景和目的卵巢恶性肿瘤是妇科三大恶性肿瘤之一,卵巢癌在全球妇女癌症死亡率中位居第一,严重威胁着人们的生命和健康,而且发病率居高不下,尤其是在发展中国家。卵巢癌的早期诊断及治疗成为人类亟待解决的难题。基因的表达调控主要通过遗传学(genetics)和表观遗传学(epigenetics)两种机制实现。遗传学改变是涉及核苷酸序列改变的机制,但是就现在的科学技术水平来说也只是能解释肿瘤发生机制中的一部分原因,表观遗传学机制是一种不涉及DNA序列变化的可遗传的基因表达方式的改变,目前认为表观遗传学是较遗传学更为常见的基因表达调控机制,许多具有重要功能的基因是通过表观遗传学机制参与肿瘤的发生、发展。DNA甲基化表观遗传的主要方式,是研究得最深入的作用方式,与抑制基因的表达有关,其在肿瘤发生中的作用是近年来的研究热点。即刻早期反应基因(immediate early response gene X-1,IEX-1)在细胞凋亡、增殖、分化中起着关键的作用,在人类的多种肿瘤中已经证实,根据肿瘤类型和发展阶段的不同,IEX-1的异常表达和肿瘤的预后密切相关。本课题组前期研究发现:卵巢癌的发生发展与IEX-1的低表达有关。哺乳动物包括人类体内的DNA甲基化90%发生在二核苷酸胞嘧啶(Cp G)序列,而IEX-1基因启动子区含有丰富的易甲基化的Cp G岛。因此认为,IEX-1基因DNA甲基化可能与卵巢癌组织中IEX-1基因功能失活有关。本研究将对43例卵巢癌组织和3株卵巢癌细胞,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation一specific p CR,Ms P)技术、RT—PCR技术和免疫组化法检测IEX-1基因的DNA甲基化程度和其m RNA及蛋白的表达,探讨不同病理类型的卵巢癌组织中IEX-1基因的DNA甲基化程度及其与IEX-1 m RNA和蛋白表达的关系。方法1.采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation一specific p CR,Ms P)技术检测不同卵巢组织和3株卵巢癌细胞中IEX-1基因的DNA甲基化程度;2.采用RT—PCR技术检测不同卵巢组织和3株卵巢癌细胞中IEX-1基因m RNA的表达情况;3.采用免疫组化法检测不同卵巢组织和3株卵巢癌细胞中IEX-1基因蛋白的表达;4.采用SPSS 17.0统计软件进行分析。IEX-1基因的DNA甲基化程度及其m RNA和蛋白表达水平分别在不同病理类型和手术病理分期间的比较,采用Fisher精确概率法检验;IEX-1基因的DNA甲基化程度与其m RNA和蛋白表达水平的关系,采用χ2检验,检验水准α=0.05。结果1.卵巢癌组织中IEX-1基因甲基化的阳性率明显高于对照组(44.2%;28.6%;均PO.05);3株卵巢癌细胞系中IEX-1甲基化均阳性;2.卵巢癌组织中IEX-1基因m RNA表达明显低于对照组(30.2%;81.0%;PO.01);3株卵巢癌细胞系中IEX-1基因m RNA均低表达;3.卵巢癌组织中IEX-1基因甲基化阳性组的蛋白表达明显低于非甲基化组(10.5%;45.8%;PO.05)。结论1.卵巢癌组织中存在IEX-1基因启动子区5’Cp G岛甲基化;2.IEX-1基因的高甲基化状态与卵巢癌的发生发展有关;
【关键词】：即刻早期基因 DNA甲基化 甲基化聚合酶链反应 卵巢肿瘤
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略词表10-11
• 前言11-14
• 材料与方法14-26
• 结果26-28
• 讨论28-32
• 结论32-33
• 附图33-35
• 参考文献35-39
• 综述 即刻早期反应基因及甲基化在肿瘤发展中的研究进展39-53
• 参考文献49-53
• 个人简历及在攻读硕士学位期间发表的学术论文与研究成果53-54
• 致谢54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 韩丽萍;张晓雪;张毅;耿丽娜;李萌萌;;IEX-1基因转染对人卵巢癌细胞增殖活性及顺铂敏感性的影响[J];中国妇幼保健;2013年14期

2 李小雨;沈建箴;沈松菲;付海英;周华蓉;吴淡森;张媛媛;郑永青;;恶性血液病细胞株中IEX-1基因启动子区CpG岛甲基化状态的初探[J];中国实验血液学杂志;2011年02期

3 王敏强;王斌;刘晓玲;;保存温度与时间对动物组织DNA提取质量的影响[J];安徽农业科学;2009年33期

4 贺小红;李敏;王瀚;王泽华;;卵巢上皮性癌组织和细胞中BRCA1基因的DNA甲基化程度与其mRNA和蛋白表达的关系[J];中华妇产科杂志;2007年08期

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本文编号：301051