Nrf2、GPX3在盆腔脏器脱垂患者阴道壁组织中的表达及机制研究

发布时间：2021-02-07 10:13

　　目的:通过测定Nrf2、GPX3及胶原代谢相关蛋白在盆腔器官脱垂（Pelvic organ prolapse,POP）组及对照组阴道壁组织中的表达情况,分析Nrf2、GPX3与胶原蛋白之间的相关性,初步探讨Nrf2信号通路在盆腔器官脱垂患者阴道壁组织中的作用机制,为研究POP的发病机制奠定基础。方法:本研究选取2018年3月-2018年9月在中国医科大学附属盛京医院接受手术治疗的患者100例,其中POP患者（病例组）50例,因子宫良性病变行全子宫切除的患者（对照组）50例,POP患者分期均为Ⅲ-Ⅳ度。收集两组患者阴道壁组织,应用免疫组化（SP）法、Western-blot法以及RT-PCR法检测两组患者的阴道壁组织中Nrf2、GPX3、MMP-2、TIMP-1、COLⅠ及COLⅢ的表达情况,并分析Nrf2与GPX3、COLⅠ及COLⅢ的表达情况是否存在相关性。选取POP组及对照组阴道壁组织各3例进行成纤维细胞原代培养,应用Western-blot法以及RT-PCR法检测Nrf2、GPX3、MMP-2、TIMP-1、COLⅠ及COLⅢ的表达情况。利用MTT法检测两组成纤维细胞的增殖能力。... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 材料与试剂
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器与设备
        2.1.3 主要试剂的制备
    2.2 实验方法
        2.2.1 研究对象
        2.2.2 标本制备
        2.2.3 免疫组织化学法检测蛋白表达水平
        2.2.4 Western-blot方法检测各指标蛋白的表达水平
        2.2.5 RT-PCR法检测m RNA表达水平
    2.3 阴道壁组织成纤维细胞原代培养、纯化、鉴定、传代及冻存:
        2.3.1 细胞原代培养
        2.3.2 细胞的纯化
        2.3.3 细胞传代培养
        2.3.4 免疫细胞化学对阴道壁成纤维细胞的鉴定
        2.3.5 细胞冻存和复苏
    2.4 细胞活力检测MTT
    2.5 细胞转染
        2.5.1 RT-PCR法检测转染效率
    2.6 统计学处理
3 结果
    3.1 患者一般资料
    3.2 免疫组化法检测蛋白水平
    3.3 Western-Blot法检测各蛋白表达情况
    3.4 RT-PCR法检测各指标的m RNA表达情况
    3.5 对免疫组化结果进行相关性分析
    3.6 免疫细胞化学鉴定结果
    3.7 MTT法检测两组成纤维细胞增殖能力
    3.8 转染siRNA Nrf2
    3.9 MTT法检测转染si RNA Nrf2 后阴道壁成纤维细胞的增殖活力
3 讨论
参考文献
本研究创新性自我评价
综述
    参考文献
攻读学位期间取得研究成果
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]丹参素通过调节Nrf2/HO-1和NF-κκB/IκBα信号通路发挥抗大鼠肝纤维化的作用[J]. 王蓉,王静,宋复兴,李胜男,原永芳.  中国药理学与毒理学杂志. 2019(10)
[2]地尔硫卓对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的保护作用研究[J]. 范丽,姚亚妮,李瑜.  心肺血管病杂志. 2019(07)
[3]黄芪总黄酮对骨关节炎软骨细胞氧化应激和炎症因子分泌的影响[J]. 任伟亮,焦永伟,张健,王响,齐立卿,杜双庆.  郑州大学学报(医学版). 2019(04)
[4]氧化应激对宫旁韧带成纤维细胞细胞弹性蛋白及转录因子NF-E2相关因子2表达的影响[J]. 聂明朝,王小花,叶文娇.  广东医学. 2018(07)
[5]关节镜清理联合玻璃酸钠关节腔注射对膝骨关节炎患者关节液Wnt/β-catenin通路的影响[J]. 李刚,高超,张鹏,王小武,田大为,戴繁林.  海南医学院学报. 2018(04)
[6]磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B-叉头框蛋白信号通路在盆腔脏器脱垂中的表达[J]. 李秉枢,洪莉,程丽薇,郭文珺,刘成,汤建明,李洋,李新.  中国计划生育和妇产科. 2017(04)
[7]TGF-β1、MMP-2、TIMP-2与子宫脱垂发生的相关性[J]. 张小红,刘志红,洪莉.  中国性科学. 2016(07)
[8]氧化应激对盆底器官脱垂患者子宫旁韧带组织细胞细胞外基质代谢的影响[J]. 杨青,刘成,李秉枢,张琦钒,李洋,胡鸣,赵杨,洪莉.  中国计划生育和妇产科. 2016(01)
[9]TLR4和Nrf2与子宫脱垂发生的相关性[J]. 黄金玲,丁锦丽,王晓航,程艳香.  中国老年学杂志. 2013(22)
[10]机械压应力通过TGF-β1通路治疗增生性瘢痕的分子机制研究[J]. 申宽宏,黄东,吴伟炽,黄永军,牟勇.  中国临床解剖学杂志. 2013(03)

博士论文
[1]中国成年女性盆腔脏器脱垂的流行病学调查研究[D]. 李志毅.北京协和医学院 2019



本文编号：3022071