微小RNA-135b-5p调控子宫内膜癌细胞对顺铂耐药性的机制研究

发布时间：2021-02-25 06:58

　　目的探讨微小RNA-135b-5p（miR-135b-5p）通过靶向下调RECK（reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs）促进子宫内膜癌（EC）顺铂耐药性的分子机制。方法用顺铂处理Ishikawa细胞建立顺铂耐药Ishikawa/CDDP细胞,将细胞分为4组:空白组、第1转染组、第2转染组以及第3转染组。第1转染组不做任何处理,第2转染组、第3转染组以及第4转染组在细胞中分别转染miR-135b-5p mimics、pcDNA-RECK和miR-135b-5p mimics+pcDNA-RECK。用实时荧光定量聚合酶链反应法检测顺铂敏感性和耐药性患者组织中以及Ishikawa和Ishikawa/CDDP细胞中miR-135b-5p的表达情况;蛋白质印迹法检测RECK蛋白的表达;克隆形成实验检测细胞增殖情况;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。结果空白组和第1转染组中miR-135b-5p的表达分别为1.02±0.09,1.54±0.11;这2组的克隆形成结果分别为50.52±9.21,137.65±... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(15)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养[2]、分组和处置
        2.2 细胞转染与分组
        2.3 以RT-qPCR实验检测miR-135b-5p表达水平[2]
        2.4 以CCK-8检测细胞增殖情况[4]
        2.5 以细胞克隆实验检测细胞克隆形成情况[5]
        2.6 以Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况[5]
        2.7 以双荧光素酶报告基因系统检测双荧光素酶活性[4]
        2.8 以蛋白质印迹法检测RECK蛋白表达水平
    3 统计学处理
结 果
    1 不同浓度CDDP对Ishikawa和Ishikawa/CDDP细胞的增殖率影响
    2 过表达miR-135b-5p促进Ishikawa/CDDP细胞的顺铂耐药性
        2.1 2组间miR-221-3p的表达量比较
        2.2 2组间克隆形成结果比较
        2.3 2组间迁移和侵袭比较
    3 miR-135b-5p直接靶向抑制RECK表达
    4 miR-135b-5p通过调控RECK增加Ishikawa/CDDP细胞的顺铂耐药性
        4.1 几组RECK蛋白表达比较
        4.2 几组克隆形成结果比较
        4.3 几组迁移和侵袭结果比较
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-22-3p通过Snail1调控上皮-间质转化抑制人肝癌SMMC-7721细胞的迁移和侵袭[J]. 贺红杰,李明亮,许广松.  中国临床药理学杂志. 2019(18)
[2]微小RNA与结直肠癌化疗敏感性的研究现状[J]. 吴宏磊,贺雪,陈进宝,袁泽婷,邱艳艳,徐可,殷佩浩.  中国临床药理学杂志. 2019(16)
[3]牛蒡子苷元对人Ⅱ型子宫内膜癌细胞增殖抑制的研究[J]. 徐军娟,裘雅芬,冯燕.  中国临床药理学杂志. 2016(12)



本文编号：3050619