柚皮苷对人卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP的体外逆转作用及其机制

发布时间：2021-02-25 12:46

　　卵巢癌（Ovarian cancer,OC）是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一,发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而高居第三位。但因其缺乏早期特异性症状以及有效的筛查手段,70%的病人在首次就诊时已是晚期,治疗难度大、复发率高、转移快,是女性生殖系统恶性肿瘤死亡率最高的肿瘤。手术治疗和以紫杉醇、顺铂等为主的联合化疗方案一定程度上改善了患者的预后,但治疗过程中产生的化疗耐药令卵巢癌的5年生存率始终徘徊在30-40%左右,是妇科肿瘤医生和研究人员面临的严峻挑战。肿瘤的多药耐药（Multi-drug resistance,MDR）是指肿瘤细胞在接触一种抗肿瘤药产生耐药性后,对未接触过的、结构不同、作用机制各异的其他抗肿瘤药物也具有交叉耐药性。肿瘤的多药耐药机制产生复杂,一个重要原因就是转运体P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）细胞内药物外排。P-gp利用细胞内的三磷酸腺苷（ATP）将多种细胞毒性药物排出细胞外,增加了肿瘤细胞对药物的抵抗性,从而使肿瘤细胞耐药。多年来,围绕MDR1/P-gp为靶标的逆转耐药研究,包括使用P-gp的竞争性抑制剂、单克隆抗体、反义寡核苷酸技术、RNA干扰技... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一部分：柚皮苷对卵巢癌细胞增殖的影响及体外逆转SKOV3/DDP细胞的耐药性
    1 前言
    2 材料与仪器
        2.1 细胞株来源
        2.2 主要药物
        2.3 主要试剂
        2.4 主要仪器
        2.5 主要溶液配制
    3 实验方法
        3.1 细胞培养
        3.2 MTT法检测SKOV3及SKOV3/DDP对DDP的敏感性
        3.3 MTT法检测柚皮苷对SKOV3/DDP细胞的增殖性的影响
        3.4 MTT法检测柚皮苷对SKOV3/DDP耐药性的逆转
        3.5 统计学方法
    4 结果
        4.1 卵巢癌SKOV3及SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性
        4.2 柚皮苷对SKOV3/DDP细胞增殖性的影响
        4.3 柚皮苷对SKOV3/DDP耐药性的逆转
    5 讨论
    6 结论
第二部分：柚皮苷体外逆转人卵巢癌SKOV3/DDP细胞耐药性的作用机制
    1 前言
    2 材料与仪器
        2.1 细胞株和主要药物
        2.2 主要试剂
        2.3 主要仪器
    3 实验方法
        3.1 P-gp蛋白在卵巢癌SKOV3及SKOV3/DDP细胞中的表达
        3.2 不同浓度柚皮苷对SKOV3/DDP细胞P-gp蛋白的表达影响
        3.3 柚皮苷联合DDP对SKOV3/DDP细胞P-gp蛋白及凋亡、增殖、侵袭转移、血管生成相关蛋白的影响
        3.4 统计学方法
    4 结果
        4.1 SKOV3及SKOV3/DDP细胞中耐药相关蛋白P-gp的表达
        4.2 不同浓度柚皮苷对SKOV3/DDP细胞P-gp蛋白的表达影响
        4.3 柚皮苷通过下调P-gp的表达从而逆转SKOV3/DDP的耐药性
        4.4 Western blotting检测相关蛋白的表达情况
    5 讨论
        5.1 卵巢癌细胞耐药与P-gp蛋白的下调有关
        5.2 柚皮苷对SKOV3/DDP细胞凋亡相关蛋白的影响
        5.3 柚皮苷对SKOV3/DDP细胞细胞周期相关蛋白的影响
        5.4 柚皮苷对SKOV3/DDP细胞侵袭相关蛋白的影响
    6 结论
第三部分：柚皮苷通过调控NF-κB信号通路逆转SKOV3/DDP细胞顺铂耐药的作用机制
    1 前言
    2 材料与仪器
        2.1 细胞株和主要药物
        2.2 主要试剂
        2.3 主要仪器
    3 实验方法
        3.1 测定不同浓度柚皮苷对实验室培养的SKOV3/DDP细胞NFKB的表达影响
        3.2 过表达及沉默NF-κB后对P-gp mRNA、蛋白表达的影响
        3.3 柚皮苷干预后，RT-PCR及Western blotting检测过表达NF-κB后P-gp的mRNA、蛋白表达的影响
        3.4 统计学方法
    4 结果
        4.1 不同浓度柚皮苷对体外培养的SKOV3/DDP细胞NF-κB mRNA的影响41
        4.2 不同浓度柚皮苷对体外培养SKOV3/DDP细胞NF-κB蛋白的表达影响
        4.3 过表达及沉默NF-κB后对P-gpmRNA、蛋白表达的影响
        4.4 Western-Blotting检测柚皮苷作用于转染过表达NF-κB质粒后SKOV3/DDP细胞的P-gp的mRNA、蛋白表达的变化
    5 讨论
    6 结论
全文总结及展望
致谢
参考文献
攻读学位期间研究成果
综述 卵巢癌的多药耐药机制
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]柚皮苷逆转人卵巢癌耐药SKOV3/DDP细胞耐药性及逆转机制的研究[J]. 王磊,蔡丽萍.  临床肿瘤学杂志. 2016(07)
[2]BORIS、CyclinD1蛋白在上皮性卵巢癌中表达及临床意义[J]. 薛晖,赵东明,郑乐,郭科军.  临床军医杂志. 2016(04)
[3]上皮性卵巢癌肿瘤浸润前沿细胞核中β-链蛋白的表达及其与淋巴结转移的关系[J]. 高军,朱虹.  广东医学. 2015(23)
[4]柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白表达的影响[J]. 胡昕,宋淑慧,熊玉卿,蔡丽萍.  中国临床药理学与治疗学. 2013(05)
[5]柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞环氧化酶2mRNA及蛋白表达水平的影响[J]. 宋淑慧,胡昕,熊玉卿,蔡丽萍.  中国临床药理学与治疗学. 2013(03)
[6]MTHFR基因多态性和TopoⅡ在大肠癌中的表达[J]. 刘荣霞,孙全昌,郑纪宁.  承德医学院学报. 2012(04)
[7]DNA修复与肿瘤的耐药[J]. 刘晓玲,唐文如,罗瑛,张继虹.  生命的化学. 2012(06)
[8]内源性IL-8诱导卵巢癌细胞对顺铂与紫杉醇产生耐药的机制研究[J]. 牛秀珑,陈晓,张晓雷,毛立群,王越.  免疫学杂志. 2012(08)
[9]NEK2基因沉默促进卵巢癌细胞SKOV3凋亡[J]. 范婷婷,唐良萏.  基础医学与临床. 2012(06)
[10]P38 MAPK信号传导通路与卵巢癌关系的研究进展[J]. 陈砚芬,徐海帆.  现代生物医学进展. 2012(04)

博士论文
[1]卵巢癌TGFBI启动子甲基化与卵巢癌耐药的相关性研究[D]. 王宁.山东大学 2012



本文编号：3050991