SphK2促进人卵巢癌细胞侵袭转移及其机制探讨

发布时间：2021-02-27 21:47

　　目的:研究鞘氨醇激酶2（SphK2）对人卵巢癌细胞系SKOV3和HO8910细胞侵袭和迁移能力的影响,探讨其可能调控机制。方法:设计并体外合成靶向SphK2的shRNA（short hairpin RNA）序列（shRNA SphK2）及阴性对照序列（shRNA NC）,并与LV3（H1/GFP&Puro）慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,包装shRNA慢病毒颗粒后分别转染SKOV3和HO8910细胞系。分别用Real-time PCR和Western blot法检测shRNA SphK2病毒颗粒转染后在mRNA及蛋白水平的沉默效率。Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力变化;Western blot法检测SphK2敲降后细胞中MMP-9蛋白表达。结果:用构建的shRNA慢病毒颗粒感染SKOV3和HO8910细胞后,SphK2 mRNA和蛋白表达水平显著下降。SKOV3和HO8910细胞中,shRNA SphK2转染组的迁移和侵袭细胞数均显著少于shRNA NC组和未转染组,差异均有统计学意义（P<0.05）。Western blot结果显示,转染后48h,... 

【文章来源】：现代妇产科进展. 2020,29(04)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

载体图谱

Real-time PCR结果显示,转染shRNA SphK2后,SKOV3和HO8910细胞中SphK2 mRNA表达水平明显低于转染shRNA阴性组与未转染组细胞(P<0.05),而后两组无显著差异(P>0.05)(图2)。SphK2 shRNA转染后,SKOV3和HO8910细胞中SphK2 mRNA的表达抑制率分别为0.71±0.060(P<0.05)和0.75±0.070(P<0.05)。Western blot结果显示,转染shRNA SphK2后,SKOV3和HO8910细胞中SphK2蛋白表达水平明显低于转染阴性对照和未转梁组(P<0.05),而后两组无显著差异(P>0.05)。见图2、3。图3 Western blot检测SphK2 shRNA的干扰效率

Western blot检测SphK2 shRNA的干扰效率


本文编号：3054845