miR-34c-5p/Notch在子宫内膜异位症上皮间质转化（EMT）中的作用

发布时间：2021-03-08 10:17

　　目的:子宫内膜异位症是一种常见的良性妇科疾病,具有恶性肿瘤的生长特征,但该病的发病机制仍不清楚。众所周知,微小核糖核酸（miRNA）参与了与子宫内膜异位症的发展有关的上皮-间质转化（EMT）。本研究探索了miR-34c-5p在子宫内膜异位症中的作用。方法:高通量测序（HTS）结果显示,子宫内膜异位症（后简称内异症）患者异位内膜（ecEM）中miR-34c-5p表达降低。划痕愈合试验和transwell入侵试验表明,miR-34c-5p抑制Ishikawa和End1/E6E7细胞的侵袭和迁移。双荧光素酶基因报告系统证明miR-34c-5p与Notch1 3’UTR的靶向调控关系,Western blot显示miR-34c-5p促进Ishikawa和End1/E6E7细胞中E-钙黏蛋白的表达,并抑制Notch1,N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。miR-34c-5p被敲减后,得到与上述相反的结果。使用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot测定内异症患者的ecEM和在位子宫内膜（euEM）中Notch1,E-钙黏蛋白,N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平。结果:1.HTS和qR... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

聚类分析显示6例内异症患者的euEM和ecEM中差异表达的miRNA其中共有217个miRNA表达存在差异，其中包括96个miRNA上调以及121个下调

中国医科大学硕士学位论文14意义）。图2.euEM和ecEM中差异表达的miRNA图A.火山图显示了两种不同组织之间的差异表达miRNA。红点表示上调，绿点表示下调。图B.通过qRT-PCR在euEM和ecEM组织中miR-34c-5p的表达水平。***P<0.00013.2miR-34c-5p对内异症中EMT的调节使用miR-34c-5pmimics，miR-NC，miR-34c-5pinhibitor和inhibitor-NC转染Ishikawa和End1/E6E7细胞系，以研究EEC中miR-34c-5p对EMT的调控作用。Westernblot检测E-钙黏蛋白，N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。如图3所示，与对照组相比，miR-34c-5p敲除组的E-钙黏蛋白表达降低，N-钙黏蛋白和波形蛋白表达增加。在miR-34c-5p过表达组中，两种细胞系中E-钙黏蛋白的水平均升高，而N-钙黏蛋白和波形蛋白的水平降低。图3.Westernblot分析miR-34c-5p在Ishikawa和End1/E6E7细胞中的过度表达和敲低以及E-钙黏蛋白，N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。*P<0.05，**P<0.01。

中国医科大学硕士学位论文14意义）。图2.euEM和ecEM中差异表达的miRNA图A.火山图显示了两种不同组织之间的差异表达miRNA。红点表示上调，绿点表示下调。图B.通过qRT-PCR在euEM和ecEM组织中miR-34c-5p的表达水平。***P<0.00013.2miR-34c-5p对内异症中EMT的调节使用miR-34c-5pmimics，miR-NC，miR-34c-5pinhibitor和inhibitor-NC转染Ishikawa和End1/E6E7细胞系，以研究EEC中miR-34c-5p对EMT的调控作用。Westernblot检测E-钙黏蛋白，N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。如图3所示，与对照组相比，miR-34c-5p敲除组的E-钙黏蛋白表达降低，N-钙黏蛋白和波形蛋白表达增加。在miR-34c-5p过表达组中，两种细胞系中E-钙黏蛋白的水平均升高，而N-钙黏蛋白和波形蛋白的水平降低。图3.Westernblot分析miR-34c-5p在Ishikawa和End1/E6E7细胞中的过度表达和敲低以及E-钙黏蛋白，N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。*P<0.05，**P<0.01。


本文编号：3070887