转录因子GATA2调控TEM8对卵巢癌恶性生物学行为的影响及机制研究
发布时间:2021-03-21 04:29
目的:课题组前期研究发现TEM8在卵巢癌组织中高表达,与卵巢癌患者不良预后有关。本研究构建TEM8过表达和抑制表达卵巢癌细胞系模型,深入探讨TEM8对卵巢癌细胞增殖、周期、凋亡、侵袭和迁移的影响及相关的分子机制。进一步探究转录因子如何调控TEM8的表达及相关结合位点,为寻找卵巢癌的生物标记物和靶向治疗提供理论依据。研究方法:1、利用Western blot检测TEM8蛋白在4种卵巢癌细胞系(OVCAR3、SKOV3、A2780、CAOV3)的表达情况。构建TEM8过表达和抑制表达的卵巢癌细胞系,qRT-PCR和Western blot验证TEM8的m RNA和蛋白水平的变化。利用MTT、流式细胞仪、划痕、Transwell实验方法检测TEM8基因差异表达前后,卵巢癌细胞增殖、周期、凋亡、侵袭和迁移能力的变化。Western blot实验检测与上述生物学行为相关分子的变化。构建裸鼠皮下移植瘤,探究TEM8过表达对裸鼠皮下移植瘤增殖的影响,并利用免疫组化的方法检测TEM8和细胞核增殖相关核抗原Ki-67的表达。2、从UCSC Xena数据库下载TCGA卵巢癌标准化RNAseq数据,并通过G...
【文章来源】:中国医科大学辽宁省
【文章页数】:79 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
TEM8蛋白在卵巢癌细胞系的表达情况
TEM8过表达和抑制表达卵巢癌细胞模型的构建
中国医科大学博士学位论文11A:Westernblot检测TEM8蛋白的变化,B:TEM8的灰度值定量分析柱状图,C:qRT-PCR检测TEM8mRNA的变化3.2TEM8对卵巢癌细胞增殖、周期和凋亡能力的影响通过MTT法检测TEM8基因差异表达后,卵巢癌细胞增殖能力的变化。结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,过表达组增殖能力明显增加,抑制表达组增殖能力明显降低,提示TEM8促进卵巢癌细胞增殖(图1.3)。流式细胞仪检测TEM8基因差异表达后,卵巢癌细胞周期和凋亡水平的变化。流式细胞周期结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,过表达组G0/G1期比例明显减少,抑制表达组G0/G1期比例明显增加,说明TEM8促进卵巢癌细胞G0/G1期转化(图1.4)。流式细胞凋亡实验结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,TEM8过表达组凋亡水平明显减少,抑制表达组凋亡水平明显增加。结果表明TEM8抑制卵巢癌细胞凋亡(图1.5)。Westernblot检测过表达和抑制表达组与增殖、周期和凋亡相关指标的变化,结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,过表达组Ki-67、cyclinD1、Bcl2/Bax表达明显增高,上述分子在抑制表达组均降低(图1.6)。提示TEM8通过上调Ki-67、cyclinD1、Bcl2/Bax的表达,促进卵巢癌细胞殖、G0/G1期转化,抑制细胞凋亡。图1.3TEM8基因差异表达后卵巢癌细胞增殖能力的变化
【参考文献】:
期刊论文
[1]不同分级NSCLC病灶内FoxM1表达的变化及其与增殖、侵袭基因表达的相关性[J]. 张静,熊琦,陶海涛,秦博宇,张国庆. 疑难病杂志. 2019(05)
[2]微小RNA-664a-3p在乳腺癌组织的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响[J]. 张沛,岳青芬,侯青霞,韩听锋. 医学研究杂志. 2019(05)
[3]过表达miR-488-5p通过靶向TEM8降低宫颈癌C33A细胞的增殖和迁移能力[J]. 张沛,岳青芬,侯青霞,韩听锋. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2018(12)
[4]肿瘤内皮标志物8蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义[J]. 任勇,何威,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2017(06)
[5]ANTXR1对人食管癌ECA109细胞株迁移和侵袭能力的影响[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2017(05)
[6]RNA干扰沉默ANTXR1基因对食管癌ECA109细胞增殖和凋亡的影响[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2016(12)
[7]siRNA沉默TEM8基因对非小细胞肺癌A549细胞增殖和侵袭能力的影响[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 临床与实验病理学杂志. 2016(11)
[8]炭疽毒素受体1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2016(03)
博士论文
[1]VEGF-D,TEM-8,Podoplanin在结直肠癌中的表达及其与局部淋巴结转移的相关性[D]. 许毓敏.中国协和医科大学 2008
本文编号:3092326
【文章来源】:中国医科大学辽宁省
【文章页数】:79 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
TEM8蛋白在卵巢癌细胞系的表达情况
TEM8过表达和抑制表达卵巢癌细胞模型的构建
中国医科大学博士学位论文11A:Westernblot检测TEM8蛋白的变化,B:TEM8的灰度值定量分析柱状图,C:qRT-PCR检测TEM8mRNA的变化3.2TEM8对卵巢癌细胞增殖、周期和凋亡能力的影响通过MTT法检测TEM8基因差异表达后,卵巢癌细胞增殖能力的变化。结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,过表达组增殖能力明显增加,抑制表达组增殖能力明显降低,提示TEM8促进卵巢癌细胞增殖(图1.3)。流式细胞仪检测TEM8基因差异表达后,卵巢癌细胞周期和凋亡水平的变化。流式细胞周期结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,过表达组G0/G1期比例明显减少,抑制表达组G0/G1期比例明显增加,说明TEM8促进卵巢癌细胞G0/G1期转化(图1.4)。流式细胞凋亡实验结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,TEM8过表达组凋亡水平明显减少,抑制表达组凋亡水平明显增加。结果表明TEM8抑制卵巢癌细胞凋亡(图1.5)。Westernblot检测过表达和抑制表达组与增殖、周期和凋亡相关指标的变化,结果表明:与空白对照和阴性对照组相比,过表达组Ki-67、cyclinD1、Bcl2/Bax表达明显增高,上述分子在抑制表达组均降低(图1.6)。提示TEM8通过上调Ki-67、cyclinD1、Bcl2/Bax的表达,促进卵巢癌细胞殖、G0/G1期转化,抑制细胞凋亡。图1.3TEM8基因差异表达后卵巢癌细胞增殖能力的变化
【参考文献】:
期刊论文
[1]不同分级NSCLC病灶内FoxM1表达的变化及其与增殖、侵袭基因表达的相关性[J]. 张静,熊琦,陶海涛,秦博宇,张国庆. 疑难病杂志. 2019(05)
[2]微小RNA-664a-3p在乳腺癌组织的表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响[J]. 张沛,岳青芬,侯青霞,韩听锋. 医学研究杂志. 2019(05)
[3]过表达miR-488-5p通过靶向TEM8降低宫颈癌C33A细胞的增殖和迁移能力[J]. 张沛,岳青芬,侯青霞,韩听锋. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2018(12)
[4]肿瘤内皮标志物8蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义[J]. 任勇,何威,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2017(06)
[5]ANTXR1对人食管癌ECA109细胞株迁移和侵袭能力的影响[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2017(05)
[6]RNA干扰沉默ANTXR1基因对食管癌ECA109细胞增殖和凋亡的影响[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2016(12)
[7]siRNA沉默TEM8基因对非小细胞肺癌A549细胞增殖和侵袭能力的影响[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 临床与实验病理学杂志. 2016(11)
[8]炭疽毒素受体1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义[J]. 任勇,何威,齐曼丽,陈昕薇,梁励玮,冯俊明. 华南国防医学杂志. 2016(03)
博士论文
[1]VEGF-D,TEM-8,Podoplanin在结直肠癌中的表达及其与局部淋巴结转移的相关性[D]. 许毓敏.中国协和医科大学 2008
本文编号:3092326
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