过表达NDRG1通过调控VEGF/sFlt-1轴增强缺氧条件下滋养细胞的促血管形成能力
发布时间：2021-04-08 05:12
目的探讨缺氧条件下N-myc下游调节基因1（NDRG1）过表达对滋养细胞HTR-8/SVneo促血管形成能力的影响。方法构建NDRG1过表达慢病毒载体并感染HTR-8/SVneo细胞,建立NDRG1基因稳定过表达的HTR-8/SVneo细胞株,随后采用低氧（1%O2）干预24 h。qRT-PCR检测缺氧后细胞中NDRG1、血管内皮生长因子（VEGF）和可溶性血管内皮生长因子受体1（sFlt-1）mRNA表达水平;Western blot检测细胞中NDRG1、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和MMP-9等蛋白表达水平;ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF和sFlt-1蛋白含量;小管形成实验检测细胞体外促血管形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果缺氧可诱导HTR-8/SVneo细胞中NDRG1、VEGF、sFlt-1等mRNA表达,并促进NDRG1蛋白表达及VEGF和sFlt-1蛋白的分泌,还可抑制MMP-2、MMP-9等蛋白表达以及降低细胞体外促血管形成能力和侵袭能力。NDRG1过表达可促进低氧条件下HTR-8/SVneo细胞VEGF mRNA的...
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(05)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平
qRT-PCR实验结果显示,与blank组比较,缺氧处理后Hpx组细胞中VEGF和sFlt-1 mRNA水平均增加(t=39.792、33.130,P<0.05);与Hpx组与Hpx+Vector组比较,Hpx+pCMV6-NDRG1组细胞中VEGF mRNA水平再次增加(F=967.729,P<0.001),而sFlt-1 mRNA水平则降低(F=143.156,P<0.001)。见图2A。ELISA检测结果显示,与blank组比较,缺氧处理后Hpx组细胞分泌的VEGF和sFlt-1蛋白水平升高(t=16.572、33.322,P<0.05);与Hpx组与Hpx+Vector组比较,Hpx+pCMV6-NDRG1组细胞分泌的VEGF蛋白水平再次升高(F=290.098,P<0.001),而分泌的sFlt-1 蛋白水平则降低(F=270.398,P<0.001)。见图2B。2.3 过表达NDRG1增强缺氧条件下HTR-8/SVneo细胞的促血管形成能力
小管形成实验结果显示,blank组、Hpx组、Hpx+Vector组和Hpx+pCMV6-NDRG1组HUVEC细胞血管成管数量依次为(21.67±3.24)、(6.67±2.08)、(6.33±2.08)和(69.67±6.02)个,与blank组比较,缺氧处理后Hpx组细胞培养上清液诱导的HUVEC细胞血管成管数量降低(t=6.784,P<0.05);与Hpx组和Hpx+Vector组比较,Hpx+pCMV6-NDRG1组细胞培养上清诱导HUVEC细胞血管成管数量增加(F=266.007,P<0.001)。见图3。2.4 过表达NDRG1促进缺氧条件下HTR-8/SVneo细胞的侵袭
【参考文献】：
期刊论文
[1]氧化应激对胎盘生命的影响[J]. 国林林,赵慧栋,胡海燕. 国际妇产科学杂志. 2019(02)
[2]子痫前期的两大平衡失调与血管功能障碍[J]. 陈琴,宋成文. 华南国防医学杂志. 2018(05)
[3]子痫前期孕妇子宫螺旋动脉超声参数与胎盘中血管新生、细胞凋亡的相关性研究[J]. 覃菊芳. 中国妇幼保健. 2018(04)
[4]体外缺氧诱导子痫前期滋养细胞模型优化及代谢组学鉴定[J]. 杨晓涛,韩顶立,Philip N.Baker,漆洪波,童超,杨竹. 重庆医科大学学报. 2017(08)
[5]VEGF及其受体SFLT-1水平与重度子痫前期孕妇新生儿结局的关系[J]. 李玉芳,欧彩娟,彭丽平,曾艳花,吴雪琴. 中国妇幼健康研究. 2017(02)
[6]Effect of hypoxia on expression of placental trophoblast cells SATB1 and β-catenin and its correlation with the pathogenesis of preeclampsia[J]. Qiang Wu,Gang Wu,Jing-Xiang Li. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2016(06)
[7]缺氧对滋养细胞sFlt-1及VEGF基因及蛋白表达的影响[J]. 周琼,乔福元,刘海意,吴媛媛,龚洵. 生殖与避孕. 2010(05)
本文编号：3124916
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(05)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平
qRT-PCR实验结果显示,与blank组比较,缺氧处理后Hpx组细胞中VEGF和sFlt-1 mRNA水平均增加(t=39.792、33.130,P<0.05);与Hpx组与Hpx+Vector组比较,Hpx+pCMV6-NDRG1组细胞中VEGF mRNA水平再次增加(F=967.729,P<0.001),而sFlt-1 mRNA水平则降低(F=143.156,P<0.001)。见图2A。ELISA检测结果显示,与blank组比较,缺氧处理后Hpx组细胞分泌的VEGF和sFlt-1蛋白水平升高(t=16.572、33.322,P<0.05);与Hpx组与Hpx+Vector组比较,Hpx+pCMV6-NDRG1组细胞分泌的VEGF蛋白水平再次升高(F=290.098,P<0.001),而分泌的sFlt-1 蛋白水平则降低(F=270.398,P<0.001)。见图2B。2.3 过表达NDRG1增强缺氧条件下HTR-8/SVneo细胞的促血管形成能力
小管形成实验结果显示,blank组、Hpx组、Hpx+Vector组和Hpx+pCMV6-NDRG1组HUVEC细胞血管成管数量依次为(21.67±3.24)、(6.67±2.08)、(6.33±2.08)和(69.67±6.02)个,与blank组比较,缺氧处理后Hpx组细胞培养上清液诱导的HUVEC细胞血管成管数量降低(t=6.784,P<0.05);与Hpx组和Hpx+Vector组比较,Hpx+pCMV6-NDRG1组细胞培养上清诱导HUVEC细胞血管成管数量增加(F=266.007,P<0.001)。见图3。2.4 过表达NDRG1促进缺氧条件下HTR-8/SVneo细胞的侵袭
【参考文献】：
期刊论文
[1]氧化应激对胎盘生命的影响[J]. 国林林,赵慧栋,胡海燕. 国际妇产科学杂志. 2019(02)
[2]子痫前期的两大平衡失调与血管功能障碍[J]. 陈琴,宋成文. 华南国防医学杂志. 2018(05)
[3]子痫前期孕妇子宫螺旋动脉超声参数与胎盘中血管新生、细胞凋亡的相关性研究[J]. 覃菊芳. 中国妇幼保健. 2018(04)
[4]体外缺氧诱导子痫前期滋养细胞模型优化及代谢组学鉴定[J]. 杨晓涛,韩顶立,Philip N.Baker,漆洪波,童超,杨竹. 重庆医科大学学报. 2017(08)
[5]VEGF及其受体SFLT-1水平与重度子痫前期孕妇新生儿结局的关系[J]. 李玉芳,欧彩娟,彭丽平,曾艳花,吴雪琴. 中国妇幼健康研究. 2017(02)
[6]Effect of hypoxia on expression of placental trophoblast cells SATB1 and β-catenin and its correlation with the pathogenesis of preeclampsia[J]. Qiang Wu,Gang Wu,Jing-Xiang Li. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2016(06)
[7]缺氧对滋养细胞sFlt-1及VEGF基因及蛋白表达的影响[J]. 周琼,乔福元,刘海意,吴媛媛,龚洵. 生殖与避孕. 2010(05)
本文编号：3124916
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