马杜霉素对HeLa细胞的生长抑制作用研究
发布时间：2021-04-10 10:45
宫颈癌威胁着许多女性的身体健康,在大部分国家的女性恶性肿瘤中,宫颈癌的死亡率均排在前五,虽然适龄女性可以接种疫苗来预防大部分宫颈癌的发生,但是注射了疫苗不代表就不会患宫颈癌,近些年来世界上新增的宫颈癌患者以及因宫颈癌死亡的女性还很多,因此寻找生产成本低、疗效佳、毒副作用相对较小的抗宫颈癌药物具有极大的现实意义。马杜霉素是一种聚醚类离子载体药物,与其同属聚醚类离子载体药物的盐霉素已被证实具有抗癌活性,因此推测其也可能具有抗癌活性。本研究以人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,选取马杜霉素作为供试药物,探究其是否有抗癌活性,并初步探究其与癌细胞的作用机理。其中,MTT法、台盼蓝计数法以及集落形成实验应用于探究马杜霉素对细胞增殖的影响;荧光相差显微镜可以观察药物处理后HeLa细胞及细胞核形态的变化;琼脂糖凝胶电泳法检测DNA断裂;LDH释放检测细胞膜通透性;活性氧试剂盒检测ROS含量变化;流式细胞仪用于检测马杜霉素对细胞周期和凋亡的影响;caspase活性检测试剂盒检测马杜霉素对凋亡相关caspase酶活性的影响;Western Blot应用于分析细胞凋亡与自噬相关蛋白表达量的变化。细胞增殖实验...
【文章来源】：曲阜师范大学山东省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
015年全球部分国家70岁以下癌症患者数量分布[10]
第一部分前言6中容易出现拌料不匀的情况，日积月累的饲喂还会出现毒素的累积损伤心肌细胞，所以已停止应用于养殖业[45,46]。图1.2马杜霉素的铵盐形式分子结构图[46]马杜霉素是一种聚醚类离子载体药物，相关研究表明，聚醚类离子载体拟环结构中的聚醚骨架能够与金属阳离子形成络合物，改变阳离子迁移的机理并促进它们跨细胞膜的运输，从而产生显著的抗癌活性[44,47]。例如，同属聚醚类离子载体药物的盐霉素不易耐药且可以降低癌细胞对其他抗癌药物的耐药性[48,49]；莫能菌素可诱导多种癌症的凋亡及自噬等[50-53]。然而，到目前为止，国内外尚未有马杜霉素可以抗癌的报道，但马杜霉素可诱导部分心肌细胞和成肌细胞的凋亡和自噬，其中涉及到的许多通路可能同样适用于癌细胞[46,54-56]。由于马杜霉素是一种单糖苷离子载体药物，所以与已知的盐霉素、莫能菌素结构上又有区别，可能会具有一些新的特性。并且作为一种曾经被添加至禽类和哺乳类动物饲料中的抗生素，虽有一定心肌毒性但其毒性相对可控，生产体系成熟，价格相对较低，有进一步研究的价值。因此，可以尝试使用马杜霉素在体外处理HeLa细胞，探究其是否有抗肿瘤的作用，并研究其与癌细胞作用的相关机理。1.4主要研究内容及意义本研究选取HeLa细胞为研究对象，马杜霉素为供试药物，通过检测HeLa细胞的增殖抑制率，观察细胞形态及相关指标变化和相关酶和蛋白的变化，验证马杜霉素具有抗宫颈癌活性的假设并初步探究马杜霉素与宫颈癌细胞的作用机制。希望可以为抗宫颈癌的药物治疗方面贡献一份自己的力量，为马杜霉素这种旧时的抗球虫药物的应用提供一种新的可能性，为其成为一种高效且生产成本相对较低的抗癌新药提供一定的思路及初步理论依据。
第三部分结果与讨论18后续探究。图3.1细胞抑制率检测(n=6)Figure3.1Cellinhibitionratedetection(2)台盼蓝法计数活细胞数量图3.2细胞数目变化(*P<0.05，**P<0.01(n=6))Figure3.2Changesincellnumbers(*P<0.05,**P<0.01(n=6))
【参考文献】：
期刊论文
[1]非小细胞肺癌放射治疗进展[J]. 焦万青,胡万宁,孙国贵,贾敬好,迟玉玉,陈思远. 世界最新医学信息文摘. 2019(20)
[2]细胞自噬与凋亡的交互作用[J]. 付晶晶,段君凯,李红. 生命的化学. 2014(05)
[3]活性氧调控的细胞凋亡信号[J]. 魏燕,辛晓燕. 现代肿瘤医学. 2011(02)
[4]细胞焦亡:一种新的细胞死亡方式[J]. 林静,李大主. 国际免疫学杂志. 2011 (03)
博士论文
[1]马度米星铵致H9c2心肌细胞和C2C12骨骼肌细胞毒性作用机制研究[D]. 陈新.南京农业大学 2015
硕士论文
[1]莫能菌素对A549细胞作用机制的初步研究[D]. 郭容甜.曲阜师范大学 2018
[2]盐霉素对人宫颈癌Hela细胞体外增殖和凋亡的影响[D]. 罗钰.南华大学 2016
本文编号：3129497
【文章来源】：曲阜师范大学山东省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
015年全球部分国家70岁以下癌症患者数量分布[10]
第一部分前言6中容易出现拌料不匀的情况，日积月累的饲喂还会出现毒素的累积损伤心肌细胞，所以已停止应用于养殖业[45,46]。图1.2马杜霉素的铵盐形式分子结构图[46]马杜霉素是一种聚醚类离子载体药物，相关研究表明，聚醚类离子载体拟环结构中的聚醚骨架能够与金属阳离子形成络合物，改变阳离子迁移的机理并促进它们跨细胞膜的运输，从而产生显著的抗癌活性[44,47]。例如，同属聚醚类离子载体药物的盐霉素不易耐药且可以降低癌细胞对其他抗癌药物的耐药性[48,49]；莫能菌素可诱导多种癌症的凋亡及自噬等[50-53]。然而，到目前为止，国内外尚未有马杜霉素可以抗癌的报道，但马杜霉素可诱导部分心肌细胞和成肌细胞的凋亡和自噬，其中涉及到的许多通路可能同样适用于癌细胞[46,54-56]。由于马杜霉素是一种单糖苷离子载体药物，所以与已知的盐霉素、莫能菌素结构上又有区别，可能会具有一些新的特性。并且作为一种曾经被添加至禽类和哺乳类动物饲料中的抗生素，虽有一定心肌毒性但其毒性相对可控，生产体系成熟，价格相对较低，有进一步研究的价值。因此，可以尝试使用马杜霉素在体外处理HeLa细胞，探究其是否有抗肿瘤的作用，并研究其与癌细胞作用的相关机理。1.4主要研究内容及意义本研究选取HeLa细胞为研究对象，马杜霉素为供试药物，通过检测HeLa细胞的增殖抑制率，观察细胞形态及相关指标变化和相关酶和蛋白的变化，验证马杜霉素具有抗宫颈癌活性的假设并初步探究马杜霉素与宫颈癌细胞的作用机制。希望可以为抗宫颈癌的药物治疗方面贡献一份自己的力量，为马杜霉素这种旧时的抗球虫药物的应用提供一种新的可能性，为其成为一种高效且生产成本相对较低的抗癌新药提供一定的思路及初步理论依据。
第三部分结果与讨论18后续探究。图3.1细胞抑制率检测(n=6)Figure3.1Cellinhibitionratedetection(2)台盼蓝法计数活细胞数量图3.2细胞数目变化(*P<0.05，**P<0.01(n=6))Figure3.2Changesincellnumbers(*P<0.05,**P<0.01(n=6))
【参考文献】：
期刊论文
[1]非小细胞肺癌放射治疗进展[J]. 焦万青,胡万宁,孙国贵,贾敬好,迟玉玉,陈思远. 世界最新医学信息文摘. 2019(20)
[2]细胞自噬与凋亡的交互作用[J]. 付晶晶,段君凯,李红. 生命的化学. 2014(05)
[3]活性氧调控的细胞凋亡信号[J]. 魏燕,辛晓燕. 现代肿瘤医学. 2011(02)
[4]细胞焦亡:一种新的细胞死亡方式[J]. 林静,李大主. 国际免疫学杂志. 2011 (03)
博士论文
[1]马度米星铵致H9c2心肌细胞和C2C12骨骼肌细胞毒性作用机制研究[D]. 陈新.南京农业大学 2015
硕士论文
[1]莫能菌素对A549细胞作用机制的初步研究[D]. 郭容甜.曲阜师范大学 2018
[2]盐霉素对人宫颈癌Hela细胞体外增殖和凋亡的影响[D]. 罗钰.南华大学 2016
本文编号：3129497
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