妊娠期糖尿病中患者miR-138-5p通过调控缺氧诱导因子1α保护β细胞功能

发布时间：2021-04-14 00:20

　　目的:探讨在妊娠期糖尿病（GDM）患者中miR-138-5p对胰岛β细胞功能的影响及其相关作用机制。方法:通过RT-qPCR对比15例GDM患者与15例的正常健康孕妇外周血中miR-138-5p的表达差异; miR-138-5p mimic及inhibitor分别转染入β细胞系INS-1细胞中,过表达或抑制其在该细胞中的表达水平,并通过RT-qPCR验证转染效率;利用MTT增殖实验、Annexin V-FITC凋亡实验及胰岛素释放实验分别检测miR-138-5p对INS-1细胞的增殖、凋亡和胰岛素释放能力的影响;通过miRNA靶基因预测软件Target Scan筛选miR-138-5p的目标靶基因,并利用双荧光素酶基因报告及Western blot实验进行验证;功能挽救实验证实miR-138-5p是否通过靶向调控其目标基因而发挥对INS-1细胞的增殖、凋亡及胰岛素释放能力影响; Western blot实验检测miR-138-5p在INS-1细胞中作用的分子信号通路。结果:与正常健康孕妇相比,GDM患者外周血中miR-138-5p的表达显著低表达;在INS-1细胞中转染miR-138-... 

【文章来源】：中国临床药理学与治疗学. 2020,25(05)CSCD

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 临床标本
    1.2 细胞系及主要试剂
    1.3 细胞培养和转染
    1.4 RT-qPCR实验
    1.5 Ed U染色检测细胞增殖实验
    1.6 Ki67法检测细胞增殖
    1.7 凋亡实验
    1.8 胰岛素释放实验
    1.9 双荧光素酶报告基因检测
    1.1 0 Western blot
    1.1 1 统计学处理
2 结果
    2.1 GDM患者外周血中miR-138-5p表达
    2.2 转染后β细胞中miR-138-5p的表达
    2.3 miR-138-5p对β细胞增殖的影响
    2.4 miR-138-5p对β细胞凋亡的影响
    2.5 miR-138-5p对β细胞胰岛素分泌的影响
    2.6 miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系
    2.7 功能挽救实验
    2.8 miR-138-5p对β细胞中PI3K/AKT信号通路的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]妊娠期糖尿病的两种不同诊断标准对围产期母婴结局的影响[J]. 王芸,石中华.  南京医科大学学报(自然科学版). 2013(11)
[2]妊娠期糖尿病病因学研究进展[J]. 张娅,徐先明.  中国实用妇科与产科杂志. 2013(04)
[3]HIF-1α、VEGF在妊娠期糖尿病胎盘组织中的表达及其与胎儿缺氧的关系[J]. 杨晓菊,杨宗利,王学芹,戴淑真.  实用妇产科杂志. 2012(11)
[4]妊娠期糖尿病胎盘组织缺氧诱导因子1α及血管内皮生长因子的表达与妊娠结局的关系[J]. 杨晓菊,徐琳,杨宗利,戴淑真.  中华糖尿病杂志. 2013 (05)



本文编号：3136284