miRNA-302a-5p和miR-367-3p靶向调控HMGA2对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响

发布时间：2021-04-22 03:27

　　目的:女性生殖系统的恶性肿瘤之一子宫内膜癌发病率逐年上升,现已经成为发达国家极其常见的女性恶性肿瘤。子宫内膜癌的治疗方法现如今有手术治疗,放化疗以及激素治疗等。但是,对于中晚期的子宫内膜癌患者,因为转移和复发的原因,失去手术机会,治疗失败几率仍然很高。随着子宫内膜癌分子机制的阐明,越来越多的分子靶向药物正在进行临床应用测试,有些已显示出有效效果,其中EFGFR2以及mTOR信号通路抑制剂的临床应用已经获取了一定的成功。因此,子宫内膜癌发展的潜在机制,特别是那些参与肿瘤转移的机制,已成为子宫内膜癌分子靶向治疗发展的基础,对于子宫内膜癌的治疗成为重中之重。高迁移率族蛋白A（high mobility group protein A,HMGA）家族是一类以AT-钩结构域和酸性末端为特征的小分子非组蛋白染色体蛋白,包括HMGA1a、HMGA1b、HMGA1c和HMGA2四个成员,其中HMGA2的编码基因位于许多肿瘤细胞染色体断裂点的簇集区,其异常表达与肿瘤有关,生物学行为类似癌基因。高迁移率组蛋白A2（HMGA2）已经成为候选生物标志物,值得注意的是,高迁移率组AT-hook 2（HMGA2）... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分: miR-302a-5p/367-3p与HMGA2在子宫内膜癌组织中的表达水平及相关性研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 细胞株
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 主要仪器
        2.2 研究对象和分组
        2.3 实验方法
            2.3.1 Real-time PCR
            2.3.2 免疫组织化学实验
            2.3.3 Western blotting
            2.3.4 双荧光素酶报告基因检测
            2.3.5 实验统计方法
    3 实验结果
        3.1 子宫内膜癌组织中HMGA2和miR-302a-5p/367-3p的表达及其与子宫内膜癌的临床病理参数的分析
            3.1.1 Real-time PCR法和Western blotting,免疫组化实验检测HMGA2在子宫内膜癌组织中的表达及其与子宫内膜癌的临床病理参数的分析
            3.1.2 Real-time PCR法检测miR-302a-5p/367-3p在子宫内膜癌组织中的表达及其与子宫内膜癌的临床病理参数的分析
        3.2 子宫内膜癌组织中miR-302a-5p/367-3p和HMGA2表达的相关性分析
        3.3 miR-302a-5p/367-3p通过预测的结合位点靶向结合HMGA2
    4 讨论
    5 结论
第二部分: miR-302a-5p/367-3p负性调控HMGA2影响子宫内膜癌细胞的恶性生物学行为的机制研究
    1 前方
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 细胞株
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养
            2.2.2 细胞增殖实验
            2.2.3 细胞迁移、侵袭实验
            2.2.4 细胞凋亡实验
            2.2.5 细胞周期实验
            2.2.6 Real-time PCR
            2.2.7 Western blotting
            2.2.8 实验统计方法
    3 实验结果
        3.1 沉默HMGA2抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞周期阻滞,子宫内膜癌细胞凋亡
        3.2 过表达miR-302a-5p/367-3p抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞周期阻滞,子宫内膜癌细胞凋亡
        3.3 HMGA2是miR-302a-5p/367-3p在调控Ishikawa和HEC-1A细胞系中EMT相关蛋白的功能性靶点
        3.4 miR-302a-5p/367-3p通过控制HMGA2抑制子宫内膜癌细胞恶性生物学行为
    4 讨论
    5 结论
第三部分: miR-302a-5p/367-3p的过度表达与HMGA2的敲低组合显着抑制裸鼠体内肿瘤生长
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 实验动物
            2.1.2 细胞株
            2.1.3 主要试剂
            2.1.4 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 裸鼠皮下移植瘤实验
            2.2.2 免疫组织化学实验
    3 实验结果
        3.1 体内肿瘤异种移植
        3.2 IHC方法检测HMGA2和Ki-67蛋白的表达水平
        3.3 miR-302a-5p/367-3p通过负性调控HMGA2影响子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的机制模式图
    4 讨论
    5 结论
参考文献
本研究创新性的自我评价
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3153069