人胚胎干细胞向下丘脑神经祖细胞的诱导分化受高雄激素影响

发布时间：2021-04-25 07:57

　　目的:研究体外诱导人胚胎干细胞（human embryonic stem cell,hESC）向下丘脑神经祖细胞分化,并以此为细胞模型,观察不同浓度雄激素对下丘脑神经祖细胞分化的影响。方法:鉴定hESC细胞株CCRM22,体外诱导CCRM22向下丘脑神经祖细胞分化,对其进行初步的细胞生物学鉴定;在分化培养基中添加1×10^-8mol/L、1×10^-7mol/L睾酮（以无水乙醇为助溶剂对照）,收集不同分化时期细胞,比较分化效率;利用RT-qPCR、流式细胞术、免疫荧光检测等方法鉴定分化细胞,并检测生殖功能调控相关基因的表达。结果:CCRM22分化为下丘脑神经祖细胞的效率超过85%,但睾酮处理降低其分化效率;分化细胞表达神经细胞标志物NESTIN以及下丘脑神经祖细胞特异性标志物NKX2.1,同时表达KISS1和雄激素受体（androgen receptor,AR）,且AR的表达水平与睾酮浓度呈正相关。结论:成功诱导hESC分化形成下丘脑神经祖细胞,高浓度睾酮处理抑制hESC向下丘脑神经祖细胞分化,该细胞模型可应用于后续体外研究多囊卵巢综合征女性孕早... 

【文章来源】：南京医科大学学报(自然科学版). 2020,40(09)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 HNP的体外诱导分化
        1.2.2 雄激素处理
        1.2.3 RT-q PCR分析h ESC及HNP特异基因表达
        1.2.4 流式细胞术分析h ESC及HNP的特异基因表达
        1.2.5 免疫荧光检测
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 h ESC细胞株CCRM22的鉴定
    2.2 诱导CCRM22向HNP分化
    2.3 h ESC多能性标志物和HNP特异标志物的表达
    2.4 高雄激素处理抑制h ESC向HNP分化
    2.5 高雄激素对HNP特异基因表达的影响
    2.6 高雄激素对生殖功能相关基因表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]高效诱导人胚胎干细胞分化为表达生殖功能调控相关基因的下丘脑神经细胞[J]. 徐瑜辰,覃莲菊,宁松,曹孟,李真真,崔毓桂,马翔,刘嘉茵.  生殖医学杂志. 2019(08)
[2]PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235体内外对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 杨芬,唐晓燕,吴鹏,谭运新.  南京医科大学学报(自然科学版). 2016(05)



本文编号：3159026