miR-29b靶向VEGFA调控MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路在子宫内膜癌血管新生中的作用

发布时间：2021-04-25 19:27

　　研究背景:子宫内膜癌（endometrial carcinoma,EC）是发生于子宫内膜的上皮性恶性肿瘤,是世界各地妇女癌症致死的重要原因,为女性生殖道三大恶性肿瘤之一,占女性生殖道恶性肿瘤的20%-30%。近期研究显示,子宫内膜癌的发病率不断上升,且有明显的年轻化趋势。尽管目前对子宫内膜癌经过规范化治疗后,5年生存率有所提升,但对晚期、低分化子宫内膜癌或复发型子宫内膜癌的治疗效果仍不显著。因此,探究子宫内膜癌的发生和进展的细胞及分子机制,新的诊断和预后标记物以及子宫内膜癌新的治疗策略对于改善子宫内膜癌患者的临床诊断及预后具有迫切而现实的意义。目前大量研究表明,子宫内膜癌与肥胖、糖尿病、高血压或者是长期暴露于无抵抗的雌激素等因素有关,但是子宫内膜癌发生和发展的具体机制仍不明确,基因调控异常如基因表观遗传等不足以完全解释子宫内膜癌的发生发展。因此,寻找新的可替代的靶向策略,对于子宫内膜癌的诊断、病人的治疗及预后的预测是迫在眉睫的。近年来研究发现,micro RNA（miRNA）在包括子宫内膜癌等多种癌症的分子生物进程中起到至关重要的作用。成熟微小RNA（micro RNA,简写为miRN... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩略词表
第1章 引言
    1.1 子宫内膜癌的研究进展
        1.1.1 子宫内膜癌的疾病发展现状
        1.1.2 子宫内膜癌的流行病学
        1.1.3 子宫内膜癌的治疗方式
    1.2 MIR-29B概述
        1.2.1 miRNA与肿瘤发生的研究进展
        1.2.2 miR-29b与肿瘤发生的研究进展
    1.3 VEGFA与子宫内膜癌的研究进展
    1.4 本课题的研究思路及意义
第2章 子宫内膜癌组织中MIR-29B的表达及其与临床病理特征和MVD的关系
    2.1 背景
    2.2 材料与方法
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器
        2.2.4 主要试剂及配置
        2.2.5 细胞复苏
        2.2.6 细胞传代
        2.2.7 细胞冻存
        2.2.8 组织和细胞系总RNA的提取
        2.2.9 实时荧光定量PCR（Quantitative Reverse Transcription PCR，q RT-PCR）
        2.2.10 免疫组化
        2.2.11 统计学方法
    2.3 结果
        2.3.1 临床相关资料
        2.3.2 qRT-PCR检测子宫内膜癌组织及细胞中miR-29b的水平
        2.3.3 子宫内膜癌组织中miR-29b的表达与患者临床病理特征的关系
        2.3.4 子宫内膜癌组织miR-29b的表达与微血管密度（MVD）的相关性
    2.4 讨论
    2.5 结论
第3章 MIR-29B调控子宫内膜癌血管新生的作用和机制
    3.1 背景
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 主要试剂
        3.2.3 主要仪器
        3.2.4 主要试剂及配置
        3.2.5 细胞培养
        3.2.6 质粒及寡核苷酸构建
        3.2.7 慢病毒感染目的细胞实验
        3.2.8 组织和细胞系总RNA的提取
        3.2.9 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）
        3.2.10 靶基因预测和验证实验
        3.2.11 载体构建
        3.2.12 lipo3000脂质体瞬时转染
        3.2.13 双荧光报告
        3.2.14 Western blot检测蛋白表达
        3.2.15 裸鼠成瘤实验及分组
        3.2.16 裸鼠接种肿瘤后生长状况的观察
        3.2.17 免疫组化
        3.2.18 统计学方法
    3.3 结果
        3.3.1 生物信息学软件预测miR-29b的靶基因
        3.3.2 miR-29b调节VEGFA的表达
        3.3.3 双荧光素酶报告基因系统验证mi R-29b的靶基因
        3.3.4 子宫内膜癌组织中VEGFA的表达及其与临床病理特征的关系
        3.3.5 细胞中miR-29b与VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 的mRNA水平
        3.3.6 细胞中miR-29b与VEGFA、ERK、Akt、mTOR、Bcl-2 的蛋白水平
        3.3.7 成功建立裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型
        3.3.8 miR-29b对裸鼠移植肿瘤生长的影响
        3.3.9 miR-29b对裸鼠移植肿瘤血管新生的影响
    3.4 讨论
    3.5 结论
第4章 全文小结
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3159957