原花青素在雌性生殖干细胞增殖和卵巢衰老中的作用研究

发布时间：2021-04-27 01:24

　　目的:女性卵泡随着年龄的增加不断被消耗,由卵泡耗竭引起的卵巢衰老是女性不可回避的生殖健康问题。雌性生殖干细胞具备分化成卵母细胞的能力并且能不断地进行自我更新,故而其可补充原始卵泡池,以延缓卵巢衰老。原花青素是公认的天然抗氧化剂,对机体有抗衰老、抗炎症等作用。本文通过细胞实验探究原花青素是否能促进雌性生殖干细胞增殖及其机制,通过动物实验探究原花青素是否能延缓卵巢衰老。方法:在细胞实验中,分离提取出小鼠雌性生殖干细胞并使用RT-PCR、免疫荧光染色、碱性磷酸酶染色鉴定其性能,通过细胞增殖结果筛选出原花青素最佳的给药时间和浓度后,分为正常培养组（Control）和原花青素给药组（PAC,10 mg/L）分别培养48 h后,测定其生殖干细胞标志物MVH、Oct4和SIRT1、p53、p21的基因和蛋白质表达量并探究其之间的关系;在动物实验中,通过对小鼠腹腔注射CY/BUS构建病理性卵巢衰老模型后,将其分为低剂量组（Treatment-low,100 mg/kg/d）、中剂量组（Treatment-mid,200mg/kg/d）、高剂量组（Treatment-high,400 mg/kg/d）,... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
第1章 引言
    1.1 概述
    1.2 雌性生殖干细胞与卵巢功能
    1.3 SIRT1对卵巢功能的调节作用
    1.4 原花青素的生物学特性及对SIRT1 的作用
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要实验试剂
        2.1.3 主要实验仪器
        2.1.4 实验药物的配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 雌性生殖干细胞的分离提取及培养
        2.2.2 雌性生殖干细胞鉴定
        2.2.3 CCK-8细胞增殖测定
        2.2.4 实时荧光定量PCR
        2.2.5 Western blot
        2.2.6 实验动物分组
        2.2.7 卵巢指数
        2.2.8 组织包埋及切片
        2.2.9 HE染色
        2.2.10 小鼠外周血中E2、AMH的测定
        2.2.11 数据处理与分析
第3章 结果与分析
    3.1 雌性生殖干细胞的鉴定
    3.2 原花青素对雌性生殖干细胞增殖的影响
        3.2.1 原花青素促进雌性生殖干细胞增殖
        3.2.2 原花青素对雌性生殖干细胞标志物MVH、Oct4 mRNA和蛋白的影响
        3.2.3 原花青素对SIRT1-p53-p21 mRNA和蛋白的影响
    3.3 原花青素对卵巢功能的影响
        3.3.1 原花青素对小鼠卵巢指数的影响
        3.3.2 原花青素对小鼠外周血中E2、AMH激素水平的影响
        3.3.3 原花青素对小鼠卵泡数的影响
第4章 讨论
    4.1 原花青素促进雌性生殖干细胞增殖
    4.2 原花青素拯救衰老卵巢的功能
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3162493