mTOR/RPS6信号通路与PCOS的相关性研究

发布时间：2021-05-11 13:15

　　【目的】探讨mTOR/RPS6信号通路在多囊卵巢综合征（PCOS）卵巢中的作用及机制。【方法】雌性SD大鼠40只,随机分为正常对照组、生理盐水对照组和来曲唑实验组。来曲唑实验组用来曲唑灌胃三周建立PCOS大鼠模型。定期监测三组大鼠体重和动情周期。三周后检测大鼠血清中雌二醇（E₂）、睾酮（T）、胰岛素（I）等的含量,记录卵巢重量,观察卵巢组织形态学变化,以确认PCOS建模成功。应用免疫组化和Western blot检测大鼠卵巢中mTOR、RPS6的表达及磷酸化水平以及PCNA蛋白在卵巢内的表达情况,TUNEL法检测卵泡细胞的凋亡情况。免疫细胞化学检测体外培养人卵巢颗粒细胞（KGN）中mTOR、RPS6的表达及其磷酸化水平,分别观察mTOR的抑制剂-雷帕霉素和激动剂-MHY1485对KGN凋亡的影响。【结果】来曲唑实验组大鼠动情周期紊乱,体重增加明显,血清激素水平紊乱,卵巢质量增加且呈多囊样改变,提示PCOS模型构建成功;来曲唑实验组大鼠卵巢中mTOR的表达及磷酸化水平明显上升,而RPS6的磷酸化显著下降（P<0.05）;此外,来曲唑实验组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡增... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
主要英文缩略语
第1章 绪论
第2章 实验材料
    2.1 实验动物
    2.2 实验用细胞株
    2.3 主要器械和药品
    2.4 主要实验仪器
    2.5 试剂
第3章 实验方法
    3.1 试剂配制方法
    3.2 动物分组和造模方法
    3.3 大鼠动情周期以及体重监测
    3.4 瑞氏染色
    3.5 人卵巢颗粒细胞(KGN)培养
    3.6 卵巢石蜡切片的制作和HE染色
    3.7 免疫组织化学染色
    3.8 Westernblot免疫印迹
    3.9 细胞爬片及免疫细胞化学
    3.10 TUNEL凋亡检测
    3.11 图像分析及统计学方法
第4章 实验结果
    4.1 大鼠动情周期改变
    4.2 大鼠体重、卵巢体积和体质量指数的改变
    4.3 大鼠血清激素水平和血糖血脂含量的检测
    4.4 卵巢形态学改变
    4.5 mTOR信号通路相关蛋白在大鼠卵巢组织中的表达
    4.6 大鼠卵巢颗粒细胞凋亡检测
    4.7 大鼠卵巢膜细胞和间质细胞增殖结果
    4.8 人卵巢颗粒细胞相关蛋白的检测
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
文献综述
    参考文献
攻读学位期间的科研成果
课题资助
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-卵巢轴在多囊卵巢综合征神经内分泌功能紊乱中的作用[J]. 王凡,张正红,肖开转,王正朝.  中国医学科学院学报. 2017(05)
[2]短期使用雷帕霉素联合调节性T细胞可延长小鼠移植心脏时间但不能抑制受体肿瘤发生[J]. 闫挺,骆晨,杨先模,季磊,罗诗樵.  细胞与分子免疫学杂志. 2017(02)
[3]来曲唑和脱氢表雄酮建立肾虚痰湿特征信息肥胖PCOS大鼠动物模型的对比研究[J]. 徐晓娟,黄映红,姚莉娟,邓琳雯,李宛静,王秋香,何蕴良.  中国中医基础医学杂志. 2015(05)

博士论文
[1]基于PI3K/AKT信号通路研究新加归肾丸调节大鼠卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的分子机制[D]. 龙旭.成都中医药大学 2015



本文编号：3181468