HPV16/18型E6蛋白荧光免疫层析联合检测方法的建立

发布时间：2021-05-15 17:14

　　背景宫颈癌是发病率仅次于乳腺癌的女性常见恶性肿瘤。高危型人乳头瘤病毒（HPV）的持续性感染是宫颈癌及癌前病变发生的首要原因,其中80%以上宫颈癌的发生与高危型HPV16和18有关。当患者持续性感染高危型HPV16/18时,E6蛋白在宫颈上皮细胞内大量合成,并通过抑制抑癌因子P53活性、激活端粒酶等途径引起宫颈上皮细胞发生恶性转化,最终导致宫颈癌前病变及宫颈癌。因此,通过检测宫颈上皮脱落细胞内HPV16/18型E6蛋白含量可为患者宫颈癌及癌前病变的早期筛查及辅助诊断提供依据。但由于以宫颈上皮脱落细胞为检测样本,受到取样误差的影响大,临床上缺乏对其进行快速定量检测的方法。目的建立以管家蛋白β-Actin为内参的人宫颈上皮细胞中HPV16/18型E6蛋白荧光免疫层析联合定量快速检测方法,为患者宫颈癌及癌前病变的早期筛查及辅助诊断提供一种灵敏度高,特异性好,操作简便成本低廉的检测手段。方法1.HPV18 E6蛋白重组表达及纯化:将p ET28a-HPV18E6质粒转入BL21（DE3）菌中,采用单因素变量法,对诱导剂浓度、诱导时间及诱导温度进行优化并表达目的蛋白,利用Ni亲和层析法纯化。2.参... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：72 页

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摘要
Abstract
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前言
1 材料与方法
2 结果与分析
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
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致谢



本文编号：3188030