P53突变体R175H对HELA细胞增殖、凋亡的影响及机制分析

发布时间：2021-05-17 23:26

　　目的:探究P53突变体R175H对HELA细胞增殖、凋亡的影响及其机制分析方法:1.Western Blot法检测HPV E6对P53野生型及突变体（R273H、R175H）的作用。2.以野生型P53与R175H质粒共同转染进HELA细胞的组别为实验组,余单独转染VR、野生型P53、P53 R175H质粒入HELA细胞为对照组,细胞计数法、MTS法检测HELA细胞的活力、增殖能力,流式细胞术检测HELA细胞的凋亡率。3.Western Blot法检测在不同细胞系中（HEK293T和HELA细胞）,P53R175H对HPV E6降解野生型P53的影响。4.免疫共沉淀法检测在H1299细胞系（无P53基因）中,R175H对HPV E6/E6AP异二聚体的影响。结果:1.P53 R175H不能被HPV E6降解,同时HPV E6表达量增加。2.P53 R175H抑制HELA细胞的活力及增殖能力,并诱导其凋亡3.P53 R175H抑制HPV E6降解野生型P53,同时HPV E6表达量增加4.P53 R175H有效阻断HPV E6/E6AP结合从而抑制HPV E6降解P53结论:P53 R17... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
前言
中文摘要
Abstract
英文缩略词
第1章 引言
第2章 综述
    2.1 高危型HPV E6蛋白的主要生物学特性
        2.1.1 锌指结构
        2.1.2 PDZ结合域
        2.1.3 HPV E6的晶体结构
    2.2 高危型HPV E6在宫颈癌中的作用及机制
        2.2.1 高危型HPV E6蛋白与P53相互作用介导细胞凋亡
        2.2.2 高危型HPV E6蛋白激活端粒酶活性致细胞永生化
        2.2.3 高危型HPV E6促使细胞凋亡信号衰减
    2.3 高危型HPV E6作为抗癌治疗的新靶点
    2.4 结语
第3章 材料与方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 细胞株、病毒及耗材
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 质粒
        3.1.4 主要仪器
        3.1.5 主要试剂配制
    3.2 实验方法
    3.3 统计学分析
第4章 结果
    4.1 P53 R175H不能被HPV E6降解，同时HPV E6表达量增加
    4.2 P53 R175H抑制HELA细胞的活力及增殖能力，并诱导其凋亡
    4.3 P53 R175H抑制HPV E6降解野生型P53，同时HPV E6表达量增加
    4.4 P53 R175H有效阻断HPV E6与E6AP结合，抑制HPV E6降解P53
第5章 讨论
    5.1 P53 R175H在HPV E6降解P53信号通路的作用机制
    5.2 P53 R175H对HELA细胞的影响
    5.3 P53 R175H在HPV E6/E6AP/P53异三聚体中作用机制
第6章 结论
参考文献
作者简介及在读期间取得的科研成果
致谢



本文编号：3192657