氯化镧对人卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3/DDP的耐药逆转作用及其机制探讨

发布时间：2021-05-19 01:43

　　目的:体外培养人卵巢癌细胞SKOV3,诱导筛选出顺铂耐药细胞SKOV3/DDP。研究稀土氯化镧对人卵巢癌DDP耐药细胞是否有逆转作用,并初步探讨其相关机制。方法:1、以低浓度DDP逐渐递增,诱导卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3/DDP,倒置显微镜下观察两株细胞形态学的差别,用CCK8法测定DDP（1、2、4、6、8、16、32μg/ml）对SKOV3细胞及SKOV3/DDP细胞的生长抑制率,分别得出IC50,计算得到耐药细胞的耐药指数。2、CCK8法检测以一定浓度梯度氯化镧作用36、48h后对SKOV3/DDP细胞的增殖活力影响,并选取生长抑制率小于5%浓度为相对无细胞毒性氯化镧浓度;CCK8法检测无细胞毒性浓度的氯化镧与DDP（1、2、4、6、8、16、32μg/ml）联用对SKOV3/DDP细胞的生长抑制率,比较联合用药与单用DDP作用的IC50。3、实验设四组:空白对照组、单独氯化镧10μg/ml组、单独DDP5μg/ml组、氯化镧10μg/ml+DDP5μg/ml组。用克隆形成实验检测不同实验组SKOV3/DDP细胞的克隆形成能力,以流式细胞术检测不同实验组SKOV3/DDP细胞凋... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株来源
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 主要工作液
    2.2 实验方法
        2.2.1 SKOV3人卵巢癌细胞的培养及SKOV3/DDP耐药株的诱导
        2.2.2 CCK8细胞毒性实验
        2.2.3 克隆形成实验
        2.2.4 流式细胞术检测细胞凋亡
        2.2.5 Western blot检测Caspase-3、ERCC1的表达
        2.2.6 数据统计学处理
第3章 结果
    3.1 SKOV3及SKOV3/DDP细胞形态特点
    3.2 CCK8法对药物细胞毒性检测
        3.2.1 SKOV3/DDP耐药指数
        3.2.2 不同浓度氯化镧对SKOV3/DDP细胞的作用
        3.2.3 无细胞毒性浓度氯化镧对SKOV3/DDP耐DDP的逆转作用
    3.3 细胞克隆形成率
    3.4 流式细胞术测定细胞凋亡
    3.5western blot检测蛋白表达的改变
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3194869