长链非编码RNAs对结直肠癌、宫颈癌的诊断及功能研究

发布时间：2021-05-21 23:59

　　我国癌症的发病率和死亡率近年来均保持上升趋势。越来越多的研究发现,长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）在多种组织的癌变、侵袭和转移过程中发挥重要功能,扮演着肿瘤抑制基因或致癌基因的角色。近年来随着细胞分子生物学的飞速发展,研究发现许多长链非编码RNAs广泛参与肿瘤的发生发展和化疗耐药等过程。LncRNAs是长度大于200个核苷酸的非编码RNAs（ncRNAs）。LncRNAs在剂量补偿效应、表观遗传调控、细胞周期调控和细胞分化调节等方面发挥重要作用。LncRNAs作为能够直接影响细胞信号传导、细胞增殖分化的基因,在许多生物学过程中起重要的调控作用。对于此类新兴分子标记的研究不仅能使我们对于肿瘤的了解更近一步,甚至还有希望使之成为肿瘤诊断的生物学标记和治疗的细胞内靶点。鉴于lncRNAs在肿瘤临床诊断和治疗方面具有广阔的前景,以lncRNAs为靶点开发抗肿瘤新药必将成为未来抗肿瘤药物研发的新趋势。首先通过文献筛选出的lncRNAs,采用RT-qPCR技术,并将CCAT2、LINC00511、LINC01133分别在正常人和结直肠癌患者血清组中进行验证,... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：109 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中英文缩略词
中文摘要
Abstract
第一部分 长链非编码RNAs作为结直肠癌候选肿瘤标志物的诊断价值研究
    前言
    材料与方法
        一、主要仪器
        二、主要试剂及耗材
        三、实验方法
    实验结果
        一、候选LncRNAs的确定
        二、研究对象的临床资料
        三、候选血清长链非编码RNAs在正常对照组和结直肠癌患者中的表达差异
        四、3种长链非编码RNAs作为结直肠癌血清标志物的ROC分析
        五、血清长链非编码RNAs与结直肠癌临床特征的相关性分析
    讨论
第二部分 LncRNAs作为宫颈癌候选肿瘤标志物的诊断价值研究
    前言
    材料与方法
    实验结果
        一、研究对象的临床资料
        二、候选血清长链非编码RNAs在宫颈癌患者和正常对照组中的表达差异
        三、3种长链非编码RNAs作为宫颈癌血清标志物的ROC分析
        四、血清长链非编码RNAs诊断模型与宫颈癌临床特征的相关性分析
        五、正常对照、宫颈上皮样瘤变与宫颈癌患者血清之间的差异性表达
        六、2种长链非编码RNAs对宫颈上皮样瘤变的ROC分析
        七、2种长链非编码RNAs对宫颈上皮样瘤变与宫颈癌的ROC分析
    讨论
第三部分 LINC00673在宫颈癌中的功能研究
    前言
    实验材料
        一、宫颈癌患者血清标本
        二、细胞系
        三、主要试剂
        四、主要仪器
        五、计算机分析软件
        六、主要溶液的配制
    实验方法
        一、血清的收集和总RNA的提取
        二、细胞总RNA的提取
        三、cDNA合成
        四、实时定量PCR分析
        五、细胞系及其培养
        六、感受态细菌的制备
        七、感受态细菌的转化
        八、质粒中提
        九、慢病毒表达载体pLVX-Puro LINC00673构建
        十、慢病毒制备及稳转细胞系的构建
        十一、MTT法测定细胞生长曲线
        十二、平板克隆形成实验
        十三、流式检测细胞周期实验
        十四、细胞迁移实验
        十五、细胞侵袭实验
        十六、裸鼠皮下成瘤实验
        十七、Western blot
        十八、统计方法
    实验结果
        一、LINC00673在宫颈癌患者及宫颈上皮样瘤变患者血清中表达升高
        二、LINC00673过表达稳转细胞系建立
        三、LINC00673对宫颈癌细胞恶性表型的影响
        四、顺铂处理后的HeLa细胞中LINC00673表达变化
        五、过表达LINC00673对宫颈癌细胞顺铂化疗耐受情况的影响
        六、过表达LINC00673促进HeLa细胞在裸鼠体内的成瘤能力
        七、与LINC00673表达相关的信号通路检测
    讨论
第四部分 SLC25A25-AS1在宫颈癌中的功能研究
    前言
    材料与方法
    实验结果
        一、SLC25A25-AS1在宫颈癌患者及宫颈上皮样瘤变患者血清中表达降低
        二、SLC25A25-AS1对宫颈癌细胞系恶性表型的影响
        三、顺铂处理后的HeLa细胞中SLC25A25-AS1表达变化
        四、过表达SLC25A25-AS1对宫颈癌细胞顺铂化疗耐受情况的影响
        五、过表达SLC25A25-AS1抑制HeLa的迁移能力
        六、过表达SLC25A25-AS1抑制HeLa的侵袭能力
        七、过表达SLC25A25-AS1抑制HeLa在裸鼠体内的成瘤能力
        八、与SLC25A25-AS1相关的信号通路
    讨论
参考文献
文献综述
    参考文献
基金资助
个人简历
致谢



本文编号：3200598