SIRT3对脂肪酸代谢相关基因的表达调控及对宫颈癌细胞侵袭作用的研究

发布时间：2021-06-07 22:15

　　目的:探讨Sirtuin蛋白3（SIRT3）对宫颈癌细胞脂肪酸代谢的影响及可能机制。方法:（1）qRT-PCR方法,检测SIRT3在宫颈鳞癌（CSCC）、宫颈上皮内瘤变（CIN）、慢性宫颈炎组织中的转录水平;（2）免疫组化方法检测SIRT3蛋白在上述三组及淋巴结转移组织中的表达水平。（3）慢病毒转染技术分别上/下调宫颈癌SiHa和C33a细胞中SIRT3的表达,采用qRT-PCR、Western blotting技术验证转染效率;免疫沉淀和Western blotting相结合检测乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）和肉碱酯酰转移酶（CPT1α）的蛋白及乙酰化水平。（4）慢病毒转染细胞后通过细胞划痕实验、Transwell小室及裸鼠移植瘤造模技术,检测SIRT3的表达变化对肿瘤细胞的迁移、侵袭、增殖及转移的影响。结果:（1）SIRT3 mRNA在CIN和CSCC组织中的表达明显高于慢性宫颈炎组（P<0.001）。（2）SIRT3蛋白在慢性宫颈炎、CIN和CSCC组织中表达呈现一个递增趋势,特别是在淋巴结转移的肿瘤组织中SIRT3的表达最高（χ²=56.63,P<... 

【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

宫颈癌、CIN和正常宫颈组织中qRT-PCR实验结果

图 2 免疫组化检测 SIRT3 蛋白在宫颈癌、CIN、癌旁宫颈和淋巴结组织中的表达(3100,3200)g.2 Immunohistochemical staining for the SIRT3 in cervical cancer、CIN、paired adjacentnormal and Lymph node tissues (×100,×200)表 4 正常宫颈组织、CIN、宫颈癌及淋巴结中 SIRT3 蛋白表达及临床参数的统计分析Table4 SIRT3 expression in carcinoma of the cervical according to patient shistopathologic characteristic.分类 例数 阴性 弱 中 强 χ2P性宫颈炎 14 8 6 0 0CINⅠ-Ⅲ 36 3 9 22 2CSCC 53 0 8 24 21巴结组织 17 0 1 4 12 56.63 <0.001分化高 7 0 3 4 0中/低 46 0 6 18 22 5.776 0.039

图 3 宫颈癌细胞 C33a、SiHa 和正常宫颈上皮细胞 H8 中 qRT-PCR 验结果a)SIRT3 的扩增曲线；b)SIRT3 的溶解曲线；c)SIRT3 的熔解峰；d)计算并分析 SIRT3 mRNA 相对表达量，**P<0.001Fig.3 The result of qRT-PCR of C33a、SiHa and H8a)The Amplification of SIRT3；b)The curve plot of SIRT3；c)The Melt Peak of SIRT3；d)Statistical evaluation of the mRNA expression of SIRT3gene,**P<0.001

【参考文献】：
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本文编号：3217411