敲低YTH结构域N 6 甲基腺嘌呤（m 6 A）RNA结合蛋白2（YTHDF2）抑制宫颈癌细胞增殖并促进其凋亡

发布时间：2021-06-18 14:22

　　目的探讨敲低YTH结构域N⁶甲基腺嘌呤（m⁶A）RNA结合蛋白2（YTHDF2）对人宫颈癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法利用人蛋白图谱（Human Protein Atlas）数据库分析YTHDF2在宫颈癌中表达及与生存时间的关系。收集宫颈癌和正常宫颈组织各31例,采用免疫组织化学法检测YTHDF2的蛋白表达差异;利用敲低YTHDF2的短发夹RNA（shRNA）及空载质粒包装慢病毒,并感染至宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞,实时荧光定量PCR及Western blot法检测YTHDF2的mRNA及蛋白水平,敲低YTHDF2后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果检测数据库发现YTHDF2在宫颈癌中表达越高生存时间越短,与正常宫颈组织相比, YTHDF2在宫颈癌组织高表达。敲低YTHDF2后,抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞阻滞于S期。结论 YTHDF2在宫颈癌组织中高表达,敲低后抑制宫颈癌细胞增殖并促进其凋亡。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

YTHDF2敲低后对宫颈癌细胞增殖和集落形成的影响

分别处理各组细胞, 检测细胞凋亡比例, 结果显示, HeLa细胞对照组、 HeLa细胞YTHDF2-sh1、 HeLa细胞YTHDF2-sh2、 SiHa细胞对照组、 SiHa细胞YTHDF2-sh1、 SiHa细胞YTHDF2-sh2凋亡细胞比例分别为(3.52±0.49)%、 (17.06±1.74)%、 (15.03±0.3)%、 (3.72±0.35)%、 (13.13±1.56)%、 (13.09±1.57)%。与对照组细胞相比, 敲低YTHDF2的表达后的宫颈癌细胞凋亡率显著增加, 差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01, 图6)。 说明宫颈癌细胞YTHDF2敲低后能够促进细胞凋亡。3 讨论

利用HPA数据库分析发现YTHDF2高表达患者生存期的95%置信区间(cofidence interval, CI)为7.63 ～10.87 年, YTHDF2低表达患者生存期的95% CI为10.01 ～15.69 年, 高表达的宫颈癌患者总生存时间比YTHDF2低表达的宫颈癌患者短(P<0.05, 图1), 说明YTHDF2的高表达会缩短宫颈癌患者的生存期。2.2 YTHDF2在宫颈癌组织高表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]敲低MGC-803胃癌细胞YTHDF2抑制其增殖并促进其凋亡[J]. 张杰,皮静楠,刘越,余佳,冯涛.  细胞与分子免疫学杂志. 2017(12)



本文编号：3236820