Ep300介导卵丘细胞EGFR Kcr修饰对卵母细胞体外成熟作用的机制研究

发布时间：2021-06-22 14:22

　　【目的】本研究旨在探索Ep300（巴豆酰基转移酶）在卵丘细胞（CCs）成熟过程中介导的EGFR（表皮生长因子受体）Kcr（巴豆酰基化修饰）的作用以及相关的调控分子机制。【方法】1)检测Ep300对CCs增殖凋亡的影响:我们采用siRNA技术敲低Ep300的表达和特异性激活剂CTPB激活Ep300,Dot Blot（点杂交）检测细胞总Kcr的水平;其次,在Ep300低表达或激活的情况下,采用Annexin V-FITC/PI染色（细胞凋亡双染色）以及Western Blot检测凋亡标志物Fox-01A、Fox-03A验证Ep300是否抑制细胞的凋亡,同时,CCK8实验（细胞增殖实验）检测Ep300是否促进细胞增殖。2)筛选Ep300的底物并验证:对两组Kcr修饰的靶蛋白及位点取交集,KEGG通路分析,结果是巴豆酰化修饰蛋白与卵母细胞减数分裂相关,其中EGFR做为卵丘调控卵母细胞的关键因子可也被Kcr修饰,可能是Ep300的底物。首先,r-EGFR（重组EGFR）和Kcr-CoA（巴豆酰基-辅酶A）共孵育验证EGFR是否存在Kcr修饰,免疫共沉淀（Co-IP）验证内源EGFR是否存在Kcr... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略词表
第一章 前言
第二章 材料、技术路线与方法
第三章 结果
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]卵巢过度刺激综合征发病机制及预防[J]. 宁琼,张蒙夏,曾海涛.  中南医学科学杂志. 2017(02)
[2]颗粒细胞与卵母细胞关系研究进展[J]. 赵杰,陈秀娟.  国际生殖健康/计划生育杂志. 2015(05)
[3]不孕症发生现状及趋势分析[J]. 黄荷凤,王波,朱依敏.  中国实用妇科与产科杂志. 2013(09)
[4]卵母细胞成熟调控的分子机制及进展[J]. 张哲,卢光琇.  现代生物医学进展. 2012(30)
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本文编号：3242997