醌茜素抑制PI3K通路的磷酸化对宫颈癌CaSki细胞凋亡和自噬的影响
发布时间：2021-06-26 21:59
目的探究醌茜素对宫颈癌Caski细胞的作用。方法体外培养人宫颈癌Caski细胞,用不同浓度醌茜素（0、1、4、12μmol/L）的醌茜素培养液对其进行预处理,以5-氟尿嘧啶组（5μmol/L）作为阳性对照。通过BrdU染色检测Caski细胞增殖能力的变化;流式细胞技术检测Caski细胞凋亡;免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3（LC3）含量; Western blot检测增殖、凋亡、自噬以及PI3K通路磷酸化相关蛋白的表达;注射CaSki细胞构建移植瘤裸鼠模型并进行体内验证。结果与对照组（0μmol/L）相比,4μmol/L和12μmol/L醌茜素处理后的宫颈癌CaSki细胞增殖能力明显减弱,BrdU阳性细胞率明显降低,Ki67蛋白的表达量也显著下降。随着醌茜素浓度增大,宫颈癌CaSki细胞凋亡率和Cleaved caspase-3的表达量逐渐升高,12μmol/L醌茜素处理组效果最为明显。ATG5的表达量随醌茜素浓度增加而逐渐降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值和p62的表达量逐渐增加,而且4μmol/L和12μmol/L醌茜素处理组与对照相比均具有显著差异。与单独使用自噬抑制剂3-MA处理相...
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(12)北大核心
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
不同浓度醌茜素处理对宫颈癌CaSki细胞增殖能力的影响
不同浓度醌茜素处理对宫颈癌CaSki细胞凋亡的诱导作用
为了检测不同浓度醌茜素对宫颈癌CaSki细胞自噬的影响,采用0、1、4、12 μmol/L醌茜素处理细胞,分别检测自噬标记分子ATG5、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ以及自噬底物p62变化。结果如图3A显示ATG5的表达水平随醌茜素浓度增加而逐渐降低,而LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值却是逐渐增大,p62的表达量逐渐增多,差异有统计学意义(F=25.346,P=0.006;F=16.154,P=0.008;F=15.142,P=0.009)。因此醌茜素能够促进宫颈癌CaSki细胞自噬。免疫荧光检测LC3的含量结果如图3B所示:对照组、醌茜素12 μmol/L组、 3-MA组、3-MA+醌茜素12 μmol/L组单个细胞LC3斑点数分别为(3.12±0.16)、(29.33±0.87)、(1.02±0.12)、(6.45±0.67),差异有统计学意义(F=85.34,P=0.000)。Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达情况,如图3C所示,组间差异有统计学意义(F=41.183,P=0.003)。单独用自噬抑制剂3-MA处理后,显示细胞自噬明显被抑制,而当12 μmol/L醌茜素和3-MA联合处理Caski细胞时,自噬作用又恢复了,表明高浓度醌茜素确实能促进宫颈癌CaSki细胞自噬。图4 3-MA与高剂量醌茜素处理对宫颈癌CaSki细胞PI3K通路磷酸化的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]防城港市2292例女性宫颈HPV感染与基因分型分析[J]. 蓝家富. 分子诊断与治疗杂志. 2019(03)
[2]丙泊酚调控miR-133a/SOX4表达对结直肠癌HCT116细胞增殖凋亡的影响[J]. 韩俊,赵静,张立群. 分子诊断与治疗杂志. 2019(03)
[3]沉默CD276基因促进宫颈癌Caski细胞的凋亡及作用机制研究[J]. 王文普,丁婷婷,李硕峰,李傲,孙红. 中国免疫学杂志. 2019(04)
[4]冬凌草甲素对人前列腺癌细胞系PC3增殖、凋亡和侵袭的调节作用[J]. 刘绍永,游璐,王维,翟昌明. 医学分子生物学杂志. 2019 (01)
[5]HPV-16E6/E7通过调控上皮间质转化对宫颈癌模型小鼠存活、肿瘤生长及转移的影响[J]. 冯蓓,王媛,刘宁宁. 医学分子生物学杂志. 2019 (01)
[6]阿帕替尼联合放疗对HeLa细胞周期和凋亡影响的体外研究[J]. 刘伟,张建文. 安徽医科大学学报. 2018(01)
[7]醌茜素对人肝癌Huh7细胞的凋亡诱导作用及其抗肿瘤机制[J]. 刘畅,徐宛婷,朴仙姬,罗英花,孟令旗,王玥,王浩,王加茹,张翼,孙虎男,金成浩. 肿瘤防治研究. 2017(07)
[8]醌茜素通过MAPK及Akt信号途径诱导人胃癌AGS细胞凋亡[J]. 刘畅,罗英花,朴仙姬,王玥,孟令旗,王浩,王加茹,张翼,李金钱,金成浩. 南方医科大学学报. 2017(08)
[9]醌茜素对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及初步机制研究[J]. 孟令旗,刘畅,孙虎男,罗英花,臧延青,韩英浩,金成浩. 中国药理学通报. 2016(11)
[10]蛋白激酶CK2抑制剂-醌茜素在非小细胞肺癌中的抗肿瘤作用[J]. 李珂,周瑜,张盛,李倩文,李振宇,周方正,伍钢,孟睿. 中国医院药学杂志. 2016(17)
博士论文
[1]抑制蛋白激酶CK2活性增强非小细胞肺癌放射敏感性及其机制研究[D]. 李倩雯.华中科技大学 2018
本文编号：3252166
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(12)北大核心
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
不同浓度醌茜素处理对宫颈癌CaSki细胞增殖能力的影响
不同浓度醌茜素处理对宫颈癌CaSki细胞凋亡的诱导作用
为了检测不同浓度醌茜素对宫颈癌CaSki细胞自噬的影响,采用0、1、4、12 μmol/L醌茜素处理细胞,分别检测自噬标记分子ATG5、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ以及自噬底物p62变化。结果如图3A显示ATG5的表达水平随醌茜素浓度增加而逐渐降低,而LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值却是逐渐增大,p62的表达量逐渐增多,差异有统计学意义(F=25.346,P=0.006;F=16.154,P=0.008;F=15.142,P=0.009)。因此醌茜素能够促进宫颈癌CaSki细胞自噬。免疫荧光检测LC3的含量结果如图3B所示:对照组、醌茜素12 μmol/L组、 3-MA组、3-MA+醌茜素12 μmol/L组单个细胞LC3斑点数分别为(3.12±0.16)、(29.33±0.87)、(1.02±0.12)、(6.45±0.67),差异有统计学意义(F=85.34,P=0.000)。Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达情况,如图3C所示,组间差异有统计学意义(F=41.183,P=0.003)。单独用自噬抑制剂3-MA处理后,显示细胞自噬明显被抑制,而当12 μmol/L醌茜素和3-MA联合处理Caski细胞时,自噬作用又恢复了,表明高浓度醌茜素确实能促进宫颈癌CaSki细胞自噬。图4 3-MA与高剂量醌茜素处理对宫颈癌CaSki细胞PI3K通路磷酸化的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]防城港市2292例女性宫颈HPV感染与基因分型分析[J]. 蓝家富. 分子诊断与治疗杂志. 2019(03)
[2]丙泊酚调控miR-133a/SOX4表达对结直肠癌HCT116细胞增殖凋亡的影响[J]. 韩俊,赵静,张立群. 分子诊断与治疗杂志. 2019(03)
[3]沉默CD276基因促进宫颈癌Caski细胞的凋亡及作用机制研究[J]. 王文普,丁婷婷,李硕峰,李傲,孙红. 中国免疫学杂志. 2019(04)
[4]冬凌草甲素对人前列腺癌细胞系PC3增殖、凋亡和侵袭的调节作用[J]. 刘绍永,游璐,王维,翟昌明. 医学分子生物学杂志. 2019 (01)
[5]HPV-16E6/E7通过调控上皮间质转化对宫颈癌模型小鼠存活、肿瘤生长及转移的影响[J]. 冯蓓,王媛,刘宁宁. 医学分子生物学杂志. 2019 (01)
[6]阿帕替尼联合放疗对HeLa细胞周期和凋亡影响的体外研究[J]. 刘伟,张建文. 安徽医科大学学报. 2018(01)
[7]醌茜素对人肝癌Huh7细胞的凋亡诱导作用及其抗肿瘤机制[J]. 刘畅,徐宛婷,朴仙姬,罗英花,孟令旗,王玥,王浩,王加茹,张翼,孙虎男,金成浩. 肿瘤防治研究. 2017(07)
[8]醌茜素通过MAPK及Akt信号途径诱导人胃癌AGS细胞凋亡[J]. 刘畅,罗英花,朴仙姬,王玥,孟令旗,王浩,王加茹,张翼,李金钱,金成浩. 南方医科大学学报. 2017(08)
[9]醌茜素对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及初步机制研究[J]. 孟令旗,刘畅,孙虎男,罗英花,臧延青,韩英浩,金成浩. 中国药理学通报. 2016(11)
[10]蛋白激酶CK2抑制剂-醌茜素在非小细胞肺癌中的抗肿瘤作用[J]. 李珂,周瑜,张盛,李倩文,李振宇,周方正,伍钢,孟睿. 中国医院药学杂志. 2016(17)
博士论文
[1]抑制蛋白激酶CK2活性增强非小细胞肺癌放射敏感性及其机制研究[D]. 李倩雯.华中科技大学 2018
本文编号：3252166
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