探究CUL4B表达对卵巢癌细胞的影响

发布时间：2021-07-04 20:27

　　卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而居第三位,但卵巢癌病死率居各类妇科恶性肿瘤的首位。5年生存率不足30%,严重威胁女性健康和生命。卵巢癌早期症状隐匿,常在症状出现之前已经出现转移,大多数患者就诊时已处于晚期。卵巢癌的临床治疗以手术为主,化疗为辅,并配合放疗、生物学治疗等手段。近年来,随着医学分子生物学理论和技术的发展,卵巢癌的基因治疗成为大家关注的焦点,并在临床上取得了较好的疗效,具有较好的应用前景。CUL4B（Cullin 4B）作为支架蛋白参与构成E3泛素连接酶复合物Cullin4B—Ring E3 Ligase（CRL4B）,参与调节包括细胞周期、细胞信号转导、基因转录和生物体个体生长发育等多项重要生命活动。CRL4B不仅可以通过泛素化降解p53和cydin E参与调控细胞增殖和衰老过程,还能通过单泛素化H2A蛋白,调节靶基因启动子组蛋8113的乙酰化以及甲基化等过程,从而在表观遗传水平上调控p16、p21、PTGDS、miRNA一371/372等基因的表达。越来越多的证据显示CRL4B在肿瘤发生发展中发挥重要作用。CRL4B可以通过单泛素化... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
前言
1 实验材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 组织标本及细胞系
        1.1.2 主要实验试剂
        1.1.3 主要实验仪器及实验设备
    1.2 实验方法
        1.2.1 组织芯片的制备
        1.2.2 蛋白质印迹法(western blot)
        1.2.3 细胞培养
            1.2.3.1 细胞复苏及培养
            1.2.3.2 贴壁细胞传代
            1.2.3.3 细胞冻存
        1.2.4 si-RNA-CUL4B转染细胞
        1.2.5 cck-8 实验检测CUL4B对细胞增殖活性的影响
        1.2.6 划痕实验检测CUL4B对细胞迁移和侵袭能力的影响
        1.2.7 提取总蛋白
        1.2.8 蛋白质印迹法(western blot)检测CUL4B对细胞上皮间质转化的影响
2 结果
    2.1 免疫组织化学检测提示组织标本中CUL4BmRNA和蛋白表达差异
    2.2 si-RNA-CUL4B对 CUL4B的有效抑制作用
    2.3 CUL4B敲低抑制卵巢癌细胞的增殖活性
    2.4 CUL4B敲低抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力
    2.5 CUL4B敲低抑制卵巢癌细胞的上皮间质转化
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]CUL4B作用机制及其与肿瘤关系的研究进展[J]. 张健,吴爱国.  广东医学. 2016(10)
[2]E3泛素连接酶CUL4A在肿瘤发生发展中的作用及机制[J]. 徐洋洋,张猛,王允山.  生理科学进展. 2013(02)
[3]Wnt信号通路:调控机理和生物学意义[J]. 尹定子,宋海云.  中国细胞生物学学报. 2011(02)

博士论文
[1]CUL4B通过调控miRNAs促进肺癌细胞增殖和迁移[D]. 弭军.山东大学 2016
[2]CUL4B调控c-Met通路在肾细胞癌发生发展及靶向药物耐药中的作用及机制研究[D]. 陈守臻.山东大学 2016



本文编号：3265483