宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移和侵袭的影响及其Wnt/β-catenin信号通路机制

发布时间：2021-07-24 22:25

　　目的:探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响,阐明其外泌体在宫颈癌发生发展过程中的可能作用机制。方法:取对数生长期宫颈癌HeLa细胞,采用超速离心法分离宫颈癌HeLa细胞外泌体,透射电镜下观察外泌体形态表现,Western blotting法检测外泌体标志蛋白CD63和CD81的表达,鉴定分离出来的外泌体。将HeLa细胞分为外泌体组（Exo组）和对照组,2组细胞分别用含和不含HeLa细胞外泌体的培养基培养。共聚焦显微镜下观察HeLa细胞摄取外泌体情况,其中外泌体采用PKH26荧光标记,HeLa细胞用DAPI荧光进行核染色,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验测定细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中Wnt1、β-catenin和T细胞因子4 （TCF4）蛋白表达水平。结果:透射电镜下观察,HeLa细胞中分离的外泌体为是圆形或椭圆形、直径为40～100nm的囊泡状小体,且富含CD63和CD81蛋白。共聚焦显微镜下观察,Exo组HeLa细胞膜表面有外泌体附着,而对照组HeLa细胞膜表面无... 

【文章来源】：吉林大学学报(医学版). 2020,46(04)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

电镜下观察HeLa细胞来源外泌体形态表现

HeLa细胞外泌体采用PKH26荧光标记（PKH26染剂不影响外泌体特性，且可与外泌体膜结构稳定结合发出红色荧光），HeLa细胞用DAPI荧光进行核染色，培养24h，共聚焦荧光显微镜观察，对照组HeLa细胞膜表面无标记外泌体附着，Exo组HeLa细胞膜表面有标记的外泌体附着。见图3（插页七）。2.3 2组HeLa细胞中侵袭细胞数

与对照组比较，Exo组HeLa细胞迁移距离明显增加（P<0.01）。见表1和图5。2.5 2组HeLa细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平

【参考文献】：
期刊论文
[1]食管癌细胞来源的外泌体对肿瘤细胞迁移及侵袭能力的影响及机制研究[J]. 林锋,王海娟,李春晓,李慧,王婷,南鹏,钱海利,詹启敏.  解放军医学杂志. 2017(04)
[2]宫颈癌细胞分泌外泌体介导上皮-间质转化提高癌前细胞侵袭能力的体外研究[J]. 易红艳,周琛斐,梁莉,王薇,魏文斐,陈晓静,吴湘光,严瑞明,刘国炳,陈春林,钟梅,余艳红.  现代妇产科进展. 2017(03)
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本文编号：3301547