miR-124对宫颈癌放射敏感性的影响及其机制研究
发布时间：2021-08-26 03:06
目的:研究miR-124对宫颈癌细胞放射敏感性的影响,并探索其潜在的作用机制。方法:qRT-PCR法检测宫颈癌癌组织和癌旁正常组织,以及宫颈癌细胞系和正常宫颈细胞系中miR-124的表达水平。利用生物信息学技术预测miR-124可能的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验验证。再通过qRT-PCR和Western Blot实验检测miR-124对该靶基因的mRNA、蛋白表达的影响。免疫组化检测宫颈癌癌组织和癌旁正常组织中该靶基因的表达。将人宫颈腺癌Hela和鳞癌Siha细胞分别分为三组,一组转染miR-124 mimics,一组转染阴性对照,一组转染miR-124 inhibitor。qRT-PCR法检测各组细胞miR-124和STAT3的表达。通过CCK-8实验检测miR-124异常表达对细胞增殖能力的影响,细胞划痕实验检测miR-124异常表达对细胞迁移能力的影响,细胞周期实验检测miR-124异常表达对细胞周期的影响。每组细胞经相同剂量放射线处理后,通过克隆形成实验、Annexin V/PI流式细胞凋亡实验、Hoechst 33258细胞核染色实验等,检测miR-124对宫颈癌细胞...
【文章来源】：蚌埠医学院安徽省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
miR-124与STAT3的结合位点
qRT-PCR检测miR-124的表达
图 4 Hela 细胞中 miR-124 的直接靶基因检测A、双荧光素酶报告基因实验 B、qRT-PCR 结果 C、Western Blot 结果3.2. Siha 细胞中 miR-124 靶基因的鉴定如图 5A 所示，与 STAT3-3'UTR-wild 共转染的 miR-124 mimics 转染组和control 组细胞 RLU 值分别为 0.996±0.115、0.505±0.065，miR-124 可靶向抑制 STAT3-3'UTR-wild 表达（t＝6.446，P＝0.003）。而与 STAT3-3'UTR-mut 共转染的 miR-124 mimics 转染组和 control 组细胞 RLU 值分别为 0.982±0.064、0.949±0.066，差异无统计学意义（t＝0.623，P＞0.05）。图 5B 显示，相对于control 组，miR-124 mimics 转染组细胞 STAT3 的 mRNA 表达水平明显降低（t＝11.152，P＜0.001），而 miR-124 inhibitor 转染组细胞 STAT3 的 mRNA 表达水平明显升高（t＝-13.613，P＜0.001），且在 WesternBlot 实验中也得到类似结果，见图 5C。这些结果均显示，STAT3 是 Siha 细胞中 miR-124 的直接靶基因，miR-
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-124对宫颈癌Hela细胞放射敏感性的影响及其机制探讨[J]. 王梦洁,孟碧,高飞,李皓,叶婷,刘阳晨. 现代肿瘤医学. 2018(06)
[2]转染miR-124模拟物的宫颈癌细胞株Siha放射敏感性变化及其机制探讨[J]. 王梦洁,孟碧,李皓,高飞,叶婷,刘阳晨. 山东医药. 2017(35)
[3]微小RNA与宫颈癌放疗敏感性的研究进展[J]. 王梦洁,刘阳晨. 癌症进展. 2016(09)
[4]微RNA-375通过抑制YAP基因表达调控CIK细胞对宫颈癌SiHa细胞的体外杀伤效应[J]. 李锦行,谭雪莹,张萍. 肿瘤. 2016(01)
[5]miRNA在肿瘤放疗敏感性中的作用及机制[J]. 张玉虹,李皓,刘阳晨. 现代肿瘤医学. 2016(02)
[6]microRNA-218对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响[J]. 刘珍,张蔚,胡晓霞,蓝娇,肖瑞平,陈璐璐,王琳琳. 中华肿瘤防治杂志. 2015(20)
[7]MiR-18a通过靶定ATM调节白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性[J]. 肖悦,胡蓉. 中国实验血液学杂志. 2015(04)
[8]肿瘤放射敏感性影响因素的研究进展[J]. 尹丽,朱广迎. 中华肿瘤防治杂志. 2012(08)
[9]肿瘤细胞放射敏感性与放射诱导凋亡关系的研究[J]. 钟军,熊戴群,罗辉,陈文学. 实用癌症杂志. 2007(06)
博士论文
[1]第一部分：中晚期宫颈鳞状细胞癌同步放化疗敏感性相关血清microRNA的初步研究第二部分：早期宫颈神经内分泌癌32例临床分析[D]. 王子毅.北京协和医学院 2015
[2]中晚期宫颈鳞状细胞癌同步放化疗敏感性相关microRNAs的初步研究[D]. 胡金龙.北京协和医学院 2012
本文编号：3363417
【文章来源】：蚌埠医学院安徽省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
miR-124与STAT3的结合位点
qRT-PCR检测miR-124的表达
图 4 Hela 细胞中 miR-124 的直接靶基因检测A、双荧光素酶报告基因实验 B、qRT-PCR 结果 C、Western Blot 结果3.2. Siha 细胞中 miR-124 靶基因的鉴定如图 5A 所示，与 STAT3-3'UTR-wild 共转染的 miR-124 mimics 转染组和control 组细胞 RLU 值分别为 0.996±0.115、0.505±0.065，miR-124 可靶向抑制 STAT3-3'UTR-wild 表达（t＝6.446，P＝0.003）。而与 STAT3-3'UTR-mut 共转染的 miR-124 mimics 转染组和 control 组细胞 RLU 值分别为 0.982±0.064、0.949±0.066，差异无统计学意义（t＝0.623，P＞0.05）。图 5B 显示，相对于control 组，miR-124 mimics 转染组细胞 STAT3 的 mRNA 表达水平明显降低（t＝11.152，P＜0.001），而 miR-124 inhibitor 转染组细胞 STAT3 的 mRNA 表达水平明显升高（t＝-13.613，P＜0.001），且在 WesternBlot 实验中也得到类似结果，见图 5C。这些结果均显示，STAT3 是 Siha 细胞中 miR-124 的直接靶基因，miR-
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-124对宫颈癌Hela细胞放射敏感性的影响及其机制探讨[J]. 王梦洁,孟碧,高飞,李皓,叶婷,刘阳晨. 现代肿瘤医学. 2018(06)
[2]转染miR-124模拟物的宫颈癌细胞株Siha放射敏感性变化及其机制探讨[J]. 王梦洁,孟碧,李皓,高飞,叶婷,刘阳晨. 山东医药. 2017(35)
[3]微小RNA与宫颈癌放疗敏感性的研究进展[J]. 王梦洁,刘阳晨. 癌症进展. 2016(09)
[4]微RNA-375通过抑制YAP基因表达调控CIK细胞对宫颈癌SiHa细胞的体外杀伤效应[J]. 李锦行,谭雪莹,张萍. 肿瘤. 2016(01)
[5]miRNA在肿瘤放疗敏感性中的作用及机制[J]. 张玉虹,李皓,刘阳晨. 现代肿瘤医学. 2016(02)
[6]microRNA-218对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响[J]. 刘珍,张蔚,胡晓霞,蓝娇,肖瑞平,陈璐璐,王琳琳. 中华肿瘤防治杂志. 2015(20)
[7]MiR-18a通过靶定ATM调节白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性[J]. 肖悦,胡蓉. 中国实验血液学杂志. 2015(04)
[8]肿瘤放射敏感性影响因素的研究进展[J]. 尹丽,朱广迎. 中华肿瘤防治杂志. 2012(08)
[9]肿瘤细胞放射敏感性与放射诱导凋亡关系的研究[J]. 钟军,熊戴群,罗辉,陈文学. 实用癌症杂志. 2007(06)
博士论文
[1]第一部分：中晚期宫颈鳞状细胞癌同步放化疗敏感性相关血清microRNA的初步研究第二部分：早期宫颈神经内分泌癌32例临床分析[D]. 王子毅.北京协和医学院 2015
[2]中晚期宫颈鳞状细胞癌同步放化疗敏感性相关microRNAs的初步研究[D]. 胡金龙.北京协和医学院 2012
本文编号：3363417
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