沉默hnRNP A2/B1基因对人宫颈癌CaSki及Hela细胞株内PI3K/AKT通路及裸鼠体内移植瘤生长的影响
发布时间：2021-08-29 03:20
目的:在课题组前期研究的基础上继续探讨沉默hnRNP A2/B1基因后对人宫颈癌Hela及CaSki细胞中PI3K/AKT通路中相关蛋白及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:慢病毒载体介导shRNA沉默宫颈癌细胞中的hnRNP A2/B1基因的细胞株由课题组前期制备;Western blot实验用来检测PI3K、AKT、p-AKT、p21、p27、caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白的表达。MTT和划痕实验用来评估各组细胞在加入通路抑制剂LY294002和激活剂IGF-1后的变化。运用Hela细胞来建立裸鼠移植瘤模型,免疫组化法检测移植瘤组织中PCNA和Ki-67的表达,苏木精伊红染色（H&E）验证肿瘤细胞形态。结果:细胞水平及裸鼠移植瘤中Western blot结果均显示hnRNP A2/B1的沉默组中PI3K/AKT信号通路中的相关蛋白p21、p27和cleaved caspase-3的表达明显上调,且p-AKT的表达均降低（P<0.05）。MTT和划痕实验显示各组细胞中的PI3K/AKT信号通路均可分别被LY294002和IGF-1抑制及激活。免疫组化...
【文章来源】：贵州医科大学贵州省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
westernblot验证课题组前期hnRNPA2/B1沉默效果
图 2-2 western blot 检测各组 PI3K/AKT 信号通路中的相关分子的表达水平与对照组相比较，*P<0.05Fig.2-2 The expression of related molecules in PI3K / AKT signaling pathwayCompared to the control group，*P<0.052.3 运用 IGF-1 及 LY294002 激活或抑制 PI3K/AKT 通路后对各组细胞的影响通过上述 western blot 实验已经证实在沉默 hnRNP A2/B1 后宫颈癌细胞中的PI3K/AKT 信号转到通路中的部分相关分子发生改变，为了进一步论证 hnRNPA2/B1 在宫颈癌细胞中与 PI3K/AKT 的作用关系，分别运用 PI3K/AKT 通路的激活剂 IGF-1 和抑制剂 LY294002 在激活和关闭通路后进行后续实验。MTT 结果显示，在运用 IGF-1 将 PI3K/AKT 通路激活后，Hela 及 CaSki 细胞的 hnRNP A2/B1 沉默组的增殖率相较之前被部分逆转，细胞增殖率明显增加(P<0.05)，而运用 LY294002 将 PI3K/AKT 通路关闭后，Hela 及 CaSki 细胞的正
15图 2-3 MTT 检测运用通路激活剂或抑制剂后各组细胞的增殖情况与对照组相比，*P<0.05；**P<0.01Fig.2-3 The proliferation of cells in each group after inhibition or activation of PI3K/AKT pathway by MTT assayCompared to the control group, *P<0.05; **P<0.01
【参考文献】：
期刊论文
[1]HnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体感染Hela细胞的稳定株筛选[J]. 刘瑶,石祥,方文. 贵州医科大学学报. 2016(06)
[2]人hnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体的构建[J]. 刘瑶,石祥,方文. 贵州医科大学学报. 2016(06)
[3]下调hnRNP A2/B1基因表达对骨肉瘤MG-63细胞生长的影响及其机制[J]. 陈倩竹,马磊,陈欢,蒋电明,李龙江. 肿瘤. 2015(12)
[4]The PI3K/AKT Pathway and Renal Cell Carcinoma[J]. Huifang Guo,Peter German,Shanshan Bai,Sean Barnes,Wei Guo,Xiangjie Qi,Hongxiang Lou,Jiyong Liang,Eric Jonasch,Gordon B.Mills,Zhiyong Ding. Journal of Genetics and Genomics. 2015(07)
[5]Annual report on status of cancer in China, 2011[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)
[6]The PI3K/Akt/m TOR pathway in ovarian cancer: therapeutic opportunities and challenges[J]. Bianca Cheaib,Aurélie Auguste,Alexandra Leary. Chinese Journal of Cancer. 2015(01)
[7]分子靶向药物PI3K抑制剂的研究进展[J]. 金美花,孔德新. 药品评价. 2012(05)
本文编号：3369797
【文章来源】：贵州医科大学贵州省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
westernblot验证课题组前期hnRNPA2/B1沉默效果
图 2-2 western blot 检测各组 PI3K/AKT 信号通路中的相关分子的表达水平与对照组相比较，*P<0.05Fig.2-2 The expression of related molecules in PI3K / AKT signaling pathwayCompared to the control group，*P<0.052.3 运用 IGF-1 及 LY294002 激活或抑制 PI3K/AKT 通路后对各组细胞的影响通过上述 western blot 实验已经证实在沉默 hnRNP A2/B1 后宫颈癌细胞中的PI3K/AKT 信号转到通路中的部分相关分子发生改变，为了进一步论证 hnRNPA2/B1 在宫颈癌细胞中与 PI3K/AKT 的作用关系，分别运用 PI3K/AKT 通路的激活剂 IGF-1 和抑制剂 LY294002 在激活和关闭通路后进行后续实验。MTT 结果显示，在运用 IGF-1 将 PI3K/AKT 通路激活后，Hela 及 CaSki 细胞的 hnRNP A2/B1 沉默组的增殖率相较之前被部分逆转，细胞增殖率明显增加(P<0.05)，而运用 LY294002 将 PI3K/AKT 通路关闭后，Hela 及 CaSki 细胞的正
15图 2-3 MTT 检测运用通路激活剂或抑制剂后各组细胞的增殖情况与对照组相比，*P<0.05；**P<0.01Fig.2-3 The proliferation of cells in each group after inhibition or activation of PI3K/AKT pathway by MTT assayCompared to the control group, *P<0.05; **P<0.01
【参考文献】：
期刊论文
[1]HnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体感染Hela细胞的稳定株筛选[J]. 刘瑶,石祥,方文. 贵州医科大学学报. 2016(06)
[2]人hnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体的构建[J]. 刘瑶,石祥,方文. 贵州医科大学学报. 2016(06)
[3]下调hnRNP A2/B1基因表达对骨肉瘤MG-63细胞生长的影响及其机制[J]. 陈倩竹,马磊,陈欢,蒋电明,李龙江. 肿瘤. 2015(12)
[4]The PI3K/AKT Pathway and Renal Cell Carcinoma[J]. Huifang Guo,Peter German,Shanshan Bai,Sean Barnes,Wei Guo,Xiangjie Qi,Hongxiang Lou,Jiyong Liang,Eric Jonasch,Gordon B.Mills,Zhiyong Ding. Journal of Genetics and Genomics. 2015(07)
[5]Annual report on status of cancer in China, 2011[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)
[6]The PI3K/Akt/m TOR pathway in ovarian cancer: therapeutic opportunities and challenges[J]. Bianca Cheaib,Aurélie Auguste,Alexandra Leary. Chinese Journal of Cancer. 2015(01)
[7]分子靶向药物PI3K抑制剂的研究进展[J]. 金美花,孔德新. 药品评价. 2012(05)
本文编号：3369797
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