miR-365通过靶向ELF4抑制宫颈癌细胞的增殖及其临床意义

发布时间：2021-09-01 11:10

　　目的 探讨微小RNA-365（miR-365）和E74样受体4（ELF4）在宫颈癌中的表达、作用和临床意义,验证miR-365直接靶向调控转录因子ELF4基因的表达,分析宫颈癌患者组织中miR-365和ELF4mRNA的表达与临床病理特征的关系。方法 选取2014年7月至2017年1月在唐山工人医院行宫颈活检及手术治疗的病例,临床资料完整,且术前并未接受过放化疗的病例,共135例,其中行全子宫切除的良性病变正常宫颈34例,宫颈上皮内瘤变（CIN）68例（其中CINⅠ31例、CINⅡ-Ⅲ37例）,术后病理回报为宫颈鳞癌33例,严格按照标本的纳入及排除标准,所取标本均经本院病理科主任医师证实。采用实时定量PCR（RT-qPCR）方法检测miR-365在正常宫颈组织（n=34）、宫颈上皮内瘤变Ⅰ级（CINⅠ）（n=31）、宫颈上皮内瘤变Ⅱ-Ⅲ级（CINⅡ-Ⅲ）（n=37）和宫颈鳞癌组织（SCC）（n=33）以及三种宫颈癌细胞系（C33A细胞、HeLa细胞、SiHa细胞）中的表达;生物信息学预测和荧光素酶报告基因检测验证miR-365与ELF4的3’UTR区域存在相互作用,初步分析miR-36... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Westernblot结果显示，与正常宫颈上皮细胞相比，在三种宫颈癌细胞中，ELF4的蛋

为了研究 miR-365 对宫颈癌增殖功能的影响，我们进行了 CCK-8 实验，分析结果显示，在三种宫颈癌细胞中，与转染 NC mimic 组比较，miR-365 mimic 组的OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均降低（SiHa：48 ht=5.212，48 hP=0.039；72 ht=6.958，72 hP=0.024；96 ht=7.045，96 hP=0.017； C33A：48 ht=0.986，48 hP=0.046；72 ht=6.378，72 hP=0.022；96 ht=7.545，96 hP=0.015； HeLa：48 ht=5.833，48 hP=0.035；72 ht=6.256，72 hP=0.028；96 ht=6.477，96hP=0.022）；相反，与转染 NC inhibitor 组比较，miR-365 inhibitor 组三种细胞株的 OD450值在 48 h、72 h 和 96 h 均升高（SiHa：48ht=0.988，48 hP=0.043；72 ht=1.163，72 hP=0.037；96 ht=1.886，96 hP=0.020；C33A：48 ht=0.973，48 hP=0.044；72 ht=1.412，72 hP=0.034；96 ht=7.215，96 hP=0.014；HeLa：48 ht=1.447，48 hP=0.032；72 ht=1.856，72 hP=0.021；96 ht=9.869，96 hP=0.011）。提示 miR-365 具有抑制肿瘤增殖作用，而 miR-365 表达的下调促进宫颈癌细胞的增殖。

第 1 章 实验研究1.4.7 临床分析显示 miR-365 和 ELF4 mRNA 的表达均与肿瘤大小、肿瘤病理分级及临床分期相关在正常组（Normal）、CINⅠ组、CINⅡ-Ⅲ组及宫颈鳞癌组（SCC）miR-365与 ELF4 mRNA 表达进行相关性分析，将 miR-365 及 ELF4 mRNA 在宫颈鳞癌中表达情况分为低表达组及高表达组，并对临床病理参数进行分析。结果表明，在Normal 组和 CINⅠ组，miR-365 与 ELF4 mRNA 表达无相关性（r=0.227，P=0.285；r=-0.073，P=0.752），而在 CINⅡ-Ⅲ组及宫颈癌组（SCC），两者间表达呈负相关（rA=-0.351，PA=0.045；rB=-0.349，PB=0.035），同时，进一步临床病理参数分析表明，miR-365 和 ELF4 mRNA 的表达水平均与肿瘤大小、肿瘤病理分级及临床分期相关（见表 8 和表 9，均 P＜0.05），而与年龄无关[31-32]。以上结果表明，miR-365 在宫颈高级别病变中及肿瘤组织中是通过靶向调控下游 ELF4 的表达调控肿瘤细胞的增殖，而在正常组织和低级别宫颈病变中两者无相关性。


本文编号：3376873