核糖核苷酸还原酶M2下调抑制人宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭

发布时间：2021-09-05 07:44

　　核糖核苷酸还原酶M2（ribonucleotide reductase, RRM2）在多种癌症组织中高表达,这与肿瘤细胞的侵袭、转移及肿瘤血管形成等生物学行为密切相关。目前,关于以RRM2为靶点治疗宫颈癌的研究并不多,其对宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制也尚未明确。本研究采用RNA干扰技术下调RRM2,以人宫颈癌细胞株CaSki和HeLa细胞为研究对象,实验分为Ctrl-siRNA组和RRM2-siRNA组。通过RT-PCR和Western印迹检测RRM2-siRNA的干扰作用,采用CCK-8和EDU实验评价细胞的增殖和DNA合成的情况,通过划痕实验和Transwell小室侵袭实验观察细胞的迁移和侵袭能力,并用Western印迹检测NF-κB和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9, MMP-9）蛋白质表达水平。结果显示,在CaSki和HeLa细胞中,RRM2-siRNA组RRM2的mRNA和蛋白质表达较Ctrl-siRNA组均下降（P<0.05）,表明RRM2-siRNA能有效抑制RRM2的表达。与Ctrl-siRNA组相比,RRM... 

【文章来源】：中国生物化学与分子生物学报. 2020,36(09)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 细胞转染
    1.4 CCK-8检测
    1.5 EDU分析
    1.6 细胞划痕实验
    1.7 Transwell小室侵袭实验
    1.8 Real-time PCR检测mRNA水平
    1.9 Western印迹检测蛋白质表达
    1.10 统计学处理
2 结果
    2.1 RRM2-siRNA抑制人宫颈癌细胞中RRM2基因表达
    2.2 核糖核苷酸还原酶M2下调抑制人宫颈癌细胞的增殖能力和DNA合成
    2.3 核糖核苷酸还原酶M2下调抑制人宫颈癌细胞的迁移和侵袭能力
    2.4 核糖核苷酸还原酶M2下调抑制NF-κB和MMP-9蛋白质表达
3 讨论



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