沉默鞘磷脂合酶1小干扰RNA对卵巢癌HO8910细胞增殖、凋亡及核因子-κB通路的影响

发布时间：2021-10-13 16:09

　　目的探讨小干扰RNA（siRNA）沉默鞘磷脂合酶1（SMS1）表达对卵巢癌HO8910细胞增殖、凋亡及核因子-κB（NF-κB）通路的影响。方法将体外培养的人卵巢癌HO8910细胞随机分成空白组（不进行转染）、对照组（转染无义序列慢病毒载体）和实验组（转染SMS1 siRNA慢病毒载体）。3组细胞均在37℃、5%CO₂饱和湿度条件下用含10%胎牛血清的DMEM培养基进行培养。转染48 h后,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中SMS1 mRNA的表达情况,用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,用流式细胞术检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测细胞核和细胞质中NF-κB的表达情况。结果培养48 h后,空白组、对照组和实验组SMS1 mRNA表达水平分别为1.03±0.09,1.04±0.10和0.51±0.06,OD值分别为1.50±0.11,1.46±0.12和0.87±0.10,细胞凋亡率分别为（7.18±1.60）%,（7.07±1.54）%和（20.76±3.21）%,细胞核NF-κB蛋白表达水平分别为0.74±0.08,0.76±0.08和0.40±0.06,细... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(22)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 细胞分组与处置方法
        2.3 主要观察指标
            2.3.1 用qRT-PCR检测2组细胞中SMS1 mRNA的表达情况[5]
            2.3.2 用MTT法检测卵巢癌细胞HO8910的增殖情况[5]
            2.3.3 用Annexin V/PI双染法检测卵巢癌细胞HO8910的细胞凋亡情况[5]
            2.3.4 用Western Blotting检测卵巢癌细胞HO8910中NF-κB蛋白的表达水平[5]
        2.4 次要观察指标
            2.4.1 用流式细胞术检测卵巢癌细胞HO8910的细胞周期[5]
            2.4.2 用Western Blotting检测卵巢癌细胞HO8910中Bax、Bcl-2、Caspase-3、IKK和Cyclin D1蛋白的表达水平[5]
    3 统计学处理
结 果
    1 转染后各组卵巢癌细胞中SMS1 mRNA表达水平的比较
    2 SMS1 siRNA对卵巢癌细胞增殖情况的影响
    3 SMS1 siRNA对卵巢癌细胞凋亡的影响
    4 SMS1 siRNA对卵巢癌细胞周期的影响
    5 SMS1 siRNA对卵巢癌细胞凋亡通路相关蛋白、卵巢癌细胞NF-κB通路相关蛋白表达的影响
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3434974