新疆维吾尔族和汉族宫颈癌组织HPV16全基因组多态性及致癌蛋白E6、E7功能研究
发布时间：2021-10-19 18:42
目的:探讨HPV16病毒引起新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈癌的分子进化规律,分析新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈癌HPV16全基因组基因多态性及其与疾病发生与发展的关系,分析HPV16 E6、E7基因多态性位点对宫颈癌进展的作用。方法:（1）提取188例新疆维吾尔族和汉族女性HPV16阳性感染的宫颈组织样本中的DNA,PCR扩增基因,并进行基因序列测定。将HPV16全基因组序列与欧洲型标准序列进行比对,并建立其进化树。（2）在宫颈癌C33A细胞中分别稳定转染HPV16 E6 295T/350T-GV230原型、HPV16 E6295G/350G-GV230和295T/350G-GV230突变型表达载体,HPV16 E7原型647A-GV144、HPV16 E7突变型647G-GV144以及HPV16 E6+E7原型E6-178T/E7-647A-GV144、HPV16 E6+E7突变型E6-178G/E7-647G-GV144重组表达载体。（3）于裸鼠的左后腿皮下接种E6不同多态性位点重组表达载体稳定转染的C33A细胞。每2-3天观察并测量裸鼠体重以及成瘤瘤体的大小,处死裸鼠取得瘤体后,称取各组...
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：107 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HPV16E6质粒图谱
新疆维吾尔族和汉族宫颈癌组织HPV16全基因组多态性及致癌蛋白E6、E7功能研究11图2HPV16E6、E7重组表达载体示意图Fig.2SchematicdiagramofrecombinantexpressionvectorofHPV16E6/E72.4.2引物的设计HPV16E6、E7及E6、E7重组载体引物由上海吉凯基因公司设计合成，详细信息（见表3、4）。表3HPV16E6引物信息Table3HPV16E6primerinformation基因名称序列HPV16E6原型-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6原型-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTCHPV16E6-G350突变-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6-G350突变-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTCHPV16E6-G295/G350突变-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6-G295/G350突变-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTC表4HPV16E7、E6+E7重组载体引物序列信息Table4PrimerinformationofHPV16E6/E7recombinantvector基因名称序列HPV16E7原型-P1CATGGTCCTGCTGGAGTTCGTG
新疆维吾尔族和汉族宫颈癌组织HPV16全基因组多态性及致癌蛋白E6、E7功能研究19验，P＜0.05被认为有统计学差异。结果（Results）1基因组DNA提取结果将所收集的181例新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈组织进行编号，然后提取宫颈组织样本基因组DNA，继而在0.7%琼脂糖凝胶中进行电泳，在凝胶成像系统中检测并记录结果，得到48例组织的DNA条带清晰完整，可以用于进一步的实验(图3)。图3提取组织样本DNA电泳图Fig3TheelectrophoresisreslutsoftissuesamplesDNA2HPV16感染检测结果2.1HPV16病毒感染PCR产物电泳结果通过PCR方法检测宫颈组织中HPV16病毒的感染情况，PCR产物用2%的琼脂糖凝胶进行电泳加以检测，曝光结果显示，在268bp处可见明亮而整齐的目的条带，这一结果说明该组织样本感染HPV16病毒，而未感染HPV16的组织样本则不出现条带(图4)，以ddH2O作为阴性对照（NC），明确感染类型的DNA样本作为阳性对照(PC)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人乳头瘤病毒16型E4基因突变与宫颈癌发生发展的相关性研究[J]. 赵雨笛,姚月婷,周紫云,戴书颖,严志凌,杨龙雨,李传印,史荔,姚宇峰. 病毒学报. 2019(04)
[2]中国攀西地区HPV16病毒E6/E7基因多态性分析[J]. 周建平,杨依锦,李懿,文韬,周丽萍. 现代医药卫生. 2019(12)
[3]人乳头瘤病毒16型L1的表达、病毒样颗粒组装及其免疫原性研究[J]. 刘微,郭明旸,纪莉婷,韩亚如,谢文静,王会岩. 中国人兽共患病学报. 2018(08)
[4]新疆维吾尔族宫颈鳞癌组织人乳头瘤病毒16型E6、E7基因变异分析[J]. 者湘漪,朱君玲,姜心雨,何鸿昌,潘贞贞,蒋琦伟,王媛,李洪涛,郑威楠,潘泽民. 石河子大学学报(自然科学版). 2017(06)
[5]中国大陆13年宫颈癌临床流行病学大数据评价[J]. 刘萍. 中国实用妇科与产科杂志. 2018(01)
[6]宫颈癌流行病学及高危因素探讨[J]. 柴淑霞. 世界最新医学信息文摘. 2017(63)
[7]女性尖锐湿疣和宫颈上皮内瘤变HPV16型E2、E6、E7基因突变及E6、E7抗原表达[J]. 黄灵,潘超,廉成翔,李晓霞,王官清. 中国中西医结合皮肤性病学杂志. 2016(06)
[8]TGF-β1的表达、HPV16 E7基因多态性与宫颈癌的相关性[J]. 罗丽丽,程欣,蔡红兵. 武汉大学学报(医学版). 2014(04)
[9]青岛地区不同宫颈病变组织中HPV16 E2基因突变分析[J]. 刘佳,王言奎,孙欣,王玉婷,赵成琳. 现代妇产科进展. 2012(05)
博士论文
[1]两个肿瘤相关基因功能和作用机制的探索与研究[D]. 詹泰岚.华中科技大学 2013
硕士论文
[1]新疆维吾尔族和汉族宫颈癌HPV16 E6基因多态性及功能分析[D]. 潘贞贞.石河子大学 2018
[2]HPV16E7,E5序列多态性与新疆地区维，汉妇女宫颈癌及癌前病变的相关性研究[D]. 杨丹.石河子大学 2014
[3]青岛地区宫颈上皮内瘤变中HPV16 E6和E7多态性分析[D]. 王玉洁.青岛大学 2013
[4]不同阶段宫颈上皮病变组织中人乳头瘤病毒16型转化基因E7和E5序列多态性分析[D]. 王玉婷.青岛大学 2011
本文编号：3445412
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：107 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HPV16E6质粒图谱
新疆维吾尔族和汉族宫颈癌组织HPV16全基因组多态性及致癌蛋白E6、E7功能研究11图2HPV16E6、E7重组表达载体示意图Fig.2SchematicdiagramofrecombinantexpressionvectorofHPV16E6/E72.4.2引物的设计HPV16E6、E7及E6、E7重组载体引物由上海吉凯基因公司设计合成，详细信息（见表3、4）。表3HPV16E6引物信息Table3HPV16E6primerinformation基因名称序列HPV16E6原型-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6原型-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTCHPV16E6-G350突变-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6-G350突变-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTCHPV16E6-G295/G350突变-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6-G295/G350突变-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTC表4HPV16E7、E6+E7重组载体引物序列信息Table4PrimerinformationofHPV16E6/E7recombinantvector基因名称序列HPV16E7原型-P1CATGGTCCTGCTGGAGTTCGTG
新疆维吾尔族和汉族宫颈癌组织HPV16全基因组多态性及致癌蛋白E6、E7功能研究19验，P＜0.05被认为有统计学差异。结果（Results）1基因组DNA提取结果将所收集的181例新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈组织进行编号，然后提取宫颈组织样本基因组DNA，继而在0.7%琼脂糖凝胶中进行电泳，在凝胶成像系统中检测并记录结果，得到48例组织的DNA条带清晰完整，可以用于进一步的实验(图3)。图3提取组织样本DNA电泳图Fig3TheelectrophoresisreslutsoftissuesamplesDNA2HPV16感染检测结果2.1HPV16病毒感染PCR产物电泳结果通过PCR方法检测宫颈组织中HPV16病毒的感染情况，PCR产物用2%的琼脂糖凝胶进行电泳加以检测，曝光结果显示，在268bp处可见明亮而整齐的目的条带，这一结果说明该组织样本感染HPV16病毒，而未感染HPV16的组织样本则不出现条带(图4)，以ddH2O作为阴性对照（NC），明确感染类型的DNA样本作为阳性对照(PC)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人乳头瘤病毒16型E4基因突变与宫颈癌发生发展的相关性研究[J]. 赵雨笛,姚月婷,周紫云,戴书颖,严志凌,杨龙雨,李传印,史荔,姚宇峰. 病毒学报. 2019(04)
[2]中国攀西地区HPV16病毒E6/E7基因多态性分析[J]. 周建平,杨依锦,李懿,文韬,周丽萍. 现代医药卫生. 2019(12)
[3]人乳头瘤病毒16型L1的表达、病毒样颗粒组装及其免疫原性研究[J]. 刘微,郭明旸,纪莉婷,韩亚如,谢文静,王会岩. 中国人兽共患病学报. 2018(08)
[4]新疆维吾尔族宫颈鳞癌组织人乳头瘤病毒16型E6、E7基因变异分析[J]. 者湘漪,朱君玲,姜心雨,何鸿昌,潘贞贞,蒋琦伟,王媛,李洪涛,郑威楠,潘泽民. 石河子大学学报(自然科学版). 2017(06)
[5]中国大陆13年宫颈癌临床流行病学大数据评价[J]. 刘萍. 中国实用妇科与产科杂志. 2018(01)
[6]宫颈癌流行病学及高危因素探讨[J]. 柴淑霞. 世界最新医学信息文摘. 2017(63)
[7]女性尖锐湿疣和宫颈上皮内瘤变HPV16型E2、E6、E7基因突变及E6、E7抗原表达[J]. 黄灵,潘超,廉成翔,李晓霞,王官清. 中国中西医结合皮肤性病学杂志. 2016(06)
[8]TGF-β1的表达、HPV16 E7基因多态性与宫颈癌的相关性[J]. 罗丽丽,程欣,蔡红兵. 武汉大学学报(医学版). 2014(04)
[9]青岛地区不同宫颈病变组织中HPV16 E2基因突变分析[J]. 刘佳,王言奎,孙欣,王玉婷,赵成琳. 现代妇产科进展. 2012(05)
博士论文
[1]两个肿瘤相关基因功能和作用机制的探索与研究[D]. 詹泰岚.华中科技大学 2013
硕士论文
[1]新疆维吾尔族和汉族宫颈癌HPV16 E6基因多态性及功能分析[D]. 潘贞贞.石河子大学 2018
[2]HPV16E7,E5序列多态性与新疆地区维，汉妇女宫颈癌及癌前病变的相关性研究[D]. 杨丹.石河子大学 2014
[3]青岛地区宫颈上皮内瘤变中HPV16 E6和E7多态性分析[D]. 王玉洁.青岛大学 2013
[4]不同阶段宫颈上皮病变组织中人乳头瘤病毒16型转化基因E7和E5序列多态性分析[D]. 王玉婷.青岛大学 2011
本文编号：3445412
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