妊娠期子宫蜕膜组织激活素受体阳性中性粒细胞亚群动态变化分析
发布时间：2021-11-09 19:31
中性粒细胞作为一种重要的固有免疫细胞,在机体免疫调节及免疫防御等方面发挥重要作用。近年来研究发现,中性粒细胞具有不均一性和可塑性的特点,如在脓毒血症、肿瘤等疾病中,其半衰期延长并呈现出多种细胞表型。关于中性粒细胞的研究主要集中在炎症与感染,人们对其在生殖系统中的作用研究起步较晚。2014年有研究显示,在子宫蜕膜组织中存在一群少量的、具有中性粒细胞表型的功能独特的细胞群,称作蜕膜中性粒细胞（decidual neutrophils,dNs）。dNs具有促进血管生成和血管重塑的作用,并可通过免疫抑制介导母-胎界面免疫耐受,但其表面特征分子仍未确定。激活素 A（Activin A）作为转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）超家族成员之一,在机体生理及病理过程中均扮演着重要角色。同时作为重要的性激素调节蛋白,Activin A在妊娠期女性外周血及子宫蜕膜组织中表达水平显著升高。研究表明,Activin A可通过自分泌或旁分泌的方式调控多种免疫细胞的功能。课题组前期工作发现,中性粒细胞也是激活素应答细胞,根据激活素ⅡA型受体（ActRⅡA）表达情...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Activins在免疫细胞中的调控作用
第3章实验结果19第3章实验结果3.1人及小鼠中性粒细胞激活素IIA型受体表达实验室前期研究发现，ActivinA可以调控人及小鼠中性粒细胞活性[66,67]，因此，为了进一步确定中性粒细胞是否存在表达激活素受体的亚群，实验采用流式细胞术检测了健康女性（24～30周岁）及雌性BALB/c小鼠（8～10周龄）外周血中性粒细胞表达ActRIIA（IIA）的比例。实验采用CD16+CD66b+作为人外周血中性粒细胞标志，Ly6G+CD11b+作为小鼠外周血中性粒细胞标志。检测结果显示，正常女性（24～30周岁）外周血CD16+CD66b+中性粒细胞占白细胞总数的58.3%5.57%（图3.1A），雌性BALB/c小鼠（8～10周龄）外周血Ly6G+CD11b+中性粒细胞占白细胞总数的12.4%1.74%（图3.1B）。此结果与文献报道的人外周血中性粒细胞占白细胞总数50%～70%，以及小鼠外周血中性粒细胞占白细胞总数10%～25%的结果一致[8,9]。研究还显示，ActRIIA阳性的人外周血中性粒细胞（CD16+CD66b+IIA+）亚群占人中性粒细胞总数的37.3%4.77%（图3.1A），ActRIIA阳性的小鼠外周血中性粒细胞（Ly6G+CD11b+IIA+）亚群占小鼠中性粒细胞总数的20.2%2.57%（图3.1B）。上述结果表明，人和小鼠中性粒细胞均存在表达ActRIIA的亚群。图3.1流式细胞术分析人和小鼠外周血IIA+中性粒细胞亚群
第3章实验结果20Figure3.1AnalysisofIIA+neutrophilsubsetinhumanandmouseperipheralbloodbyflowcytometry.(A)PercentageofIIA+neutrophilsubsetinperipheralbloodCD16+CD66b+neutrophilsinnormalwomenwasexaminedbyflowcytometry.(B)PercentageofIIA+neutrophilsubsetinperipheralbloodLy6G+CD11b+neutrophilsinnormalfemalemicewasexaminedbyflowcytometry.Theflowchartistheresultofatypicalexperiment.Atleasteightwomenandfemalemicewereexamined.3.2小鼠妊娠早期ActivinA表达水平变化妊娠期女性血浆ActivinA水平与健康未孕女性相比上升了10倍以上，而且从妊娠开始到妊娠38周左右一直在增加。但是，妊娠小鼠ActivinA水平变化是否与人类一致，以及ActivinA水平变化是否与妊娠期母体中性粒细胞比例变化有关，仍缺乏明确阐述。因此，为了确定小鼠妊娠期ActivinA水平变化，与中性粒细胞在外周血和子宫蜕膜组织中的比例变化关系，实验建立了BALB/c小鼠妊娠模型，首先确认小鼠妊娠期外周血ActivinA水平变化是否与人类一致。3.2.1小鼠妊娠期血浆ActivinA水平变化为了探究BALB/c小鼠妊娠期血浆ActivinA水平变化，我们采用ELISA的方法检测正常未孕小鼠（8～10周龄）和Ed4.5、6.5、8.5及10.5妊娠小鼠血浆ActivinA水平。结果显示，Ed6.5、8.5及10.5妊娠小鼠血浆ActivinA水平均明显高于正常未孕小鼠（图3.2），统计学差异显著（P<0.01），表明妊娠小鼠外周血ActivinA水平变化与人类妊娠女性外周血ActivinA变化趋势一致。图3.2BALB/c小鼠妊娠期血浆ActivinA水平变化
本文编号：3485940
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Activins在免疫细胞中的调控作用
第3章实验结果19第3章实验结果3.1人及小鼠中性粒细胞激活素IIA型受体表达实验室前期研究发现，ActivinA可以调控人及小鼠中性粒细胞活性[66,67]，因此，为了进一步确定中性粒细胞是否存在表达激活素受体的亚群，实验采用流式细胞术检测了健康女性（24～30周岁）及雌性BALB/c小鼠（8～10周龄）外周血中性粒细胞表达ActRIIA（IIA）的比例。实验采用CD16+CD66b+作为人外周血中性粒细胞标志，Ly6G+CD11b+作为小鼠外周血中性粒细胞标志。检测结果显示，正常女性（24～30周岁）外周血CD16+CD66b+中性粒细胞占白细胞总数的58.3%5.57%（图3.1A），雌性BALB/c小鼠（8～10周龄）外周血Ly6G+CD11b+中性粒细胞占白细胞总数的12.4%1.74%（图3.1B）。此结果与文献报道的人外周血中性粒细胞占白细胞总数50%～70%，以及小鼠外周血中性粒细胞占白细胞总数10%～25%的结果一致[8,9]。研究还显示，ActRIIA阳性的人外周血中性粒细胞（CD16+CD66b+IIA+）亚群占人中性粒细胞总数的37.3%4.77%（图3.1A），ActRIIA阳性的小鼠外周血中性粒细胞（Ly6G+CD11b+IIA+）亚群占小鼠中性粒细胞总数的20.2%2.57%（图3.1B）。上述结果表明，人和小鼠中性粒细胞均存在表达ActRIIA的亚群。图3.1流式细胞术分析人和小鼠外周血IIA+中性粒细胞亚群
第3章实验结果20Figure3.1AnalysisofIIA+neutrophilsubsetinhumanandmouseperipheralbloodbyflowcytometry.(A)PercentageofIIA+neutrophilsubsetinperipheralbloodCD16+CD66b+neutrophilsinnormalwomenwasexaminedbyflowcytometry.(B)PercentageofIIA+neutrophilsubsetinperipheralbloodLy6G+CD11b+neutrophilsinnormalfemalemicewasexaminedbyflowcytometry.Theflowchartistheresultofatypicalexperiment.Atleasteightwomenandfemalemicewereexamined.3.2小鼠妊娠早期ActivinA表达水平变化妊娠期女性血浆ActivinA水平与健康未孕女性相比上升了10倍以上，而且从妊娠开始到妊娠38周左右一直在增加。但是，妊娠小鼠ActivinA水平变化是否与人类一致，以及ActivinA水平变化是否与妊娠期母体中性粒细胞比例变化有关，仍缺乏明确阐述。因此，为了确定小鼠妊娠期ActivinA水平变化，与中性粒细胞在外周血和子宫蜕膜组织中的比例变化关系，实验建立了BALB/c小鼠妊娠模型，首先确认小鼠妊娠期外周血ActivinA水平变化是否与人类一致。3.2.1小鼠妊娠期血浆ActivinA水平变化为了探究BALB/c小鼠妊娠期血浆ActivinA水平变化，我们采用ELISA的方法检测正常未孕小鼠（8～10周龄）和Ed4.5、6.5、8.5及10.5妊娠小鼠血浆ActivinA水平。结果显示，Ed6.5、8.5及10.5妊娠小鼠血浆ActivinA水平均明显高于正常未孕小鼠（图3.2），统计学差异显著（P<0.01），表明妊娠小鼠外周血ActivinA水平变化与人类妊娠女性外周血ActivinA变化趋势一致。图3.2BALB/c小鼠妊娠期血浆ActivinA水平变化
本文编号：3485940
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