p16/Ki67、p16/mcm2表达与HPVE6/E7mRNA的关系及对宫颈病变的检出能力评估

发布时间：2021-11-24 05:30

　　目的:本文旨在探讨p16/Ki67、p16/mcm2与宫颈癌及癌前病变及高危型HPV E6/E7mRNA感染之间的关系及对宫颈癌及癌前病变的检出能力,评价其代替细胞学作为宫颈癌初筛方法的可行性及在HPV阳性人群中的分流能力。方法:选取2016年9月-2017年8月山西省长治市三家三甲医院年龄在21-70岁符合入组标准,接受宫颈癌筛查的女性人群和门诊就诊的病人共计497例。所有入组的研究对象均进行HPV E6/E7 mRNA检测、液基细胞学检测（LBC）、p16/Ki67双染与p16/mcm2双染检测。结果:1)p16/Ki67表达与宫颈癌及癌前病变和HPV E6/E7 mRNA表达的关系:随着细胞学诊断级别的上升p16/Ki67双染检测的阳性率呈上升趋势(χ²=139.0,P_trend<0.001);LBC与p16/Ki67阳性率均随着宫颈病变程度的加深而呈增高趋势(χ²=46.6,P_trend<0.001,χ²=16.8,P_trend<... 

【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PANTHER系统试剂重构过程

新疆医科大学硕士学位论文连接羊抗小鼠IgG聚合物识别已经连接上的鼠抗人p16抗体，辣根过氧化酶连接羊抗兔IgG聚合物识别已经连接上的兔抗人Ki67抗体；第三，加入相应的反应底物，使得辣根过氧化物酶催化相应显色液中的过氧化氢进行分解，使联苯胺通过氧化成联苯亚胺，使细胞薄片中相应的抗原位点上出现相应的着色，同时聚合物上碱性磷酸酶部分催化底物水解成酚类和磷酸。酚和无色的重氮盐（显色原）结合，使组织切片中抗原位点上出现红色着色。最后对标本进行复染和树脂封片，在显微镜下观察下脱落细胞内的特定抗原是否表达，从而判定双染结果。

图3.p16/Ki67免疫细胞化学双染检测试剂盒各组分Figure3 Composition of p16/Ki67 immunocytochemical dual staining kit体检测步骤：宫颈脱落细胞固定。将己制备好的宫颈涂片从4°冰箱中取出置于95%酒0分钟后，用自来水冲洗1分钟以上。将抗原修复液隔水放入水浴锅中，加热至95℃；将固定好的细胞涂片热的染色架上，放入抗原修复液中，修复15分钟后，自然晾干，冷却至水冲洗1分钟后，再用PBS溶液对宫颈涂片进行冲洗每次冲洗3分钟，总加入相应的阻断剂，清除细胞内的过氧化物酶。除去相应PBS缓冲溶液过氧化物酶阻断剂，在常温下（15-30℃）于孵育盒内孵育10分钟；再用对宫颈涂片进行冲洗，每次均需冲洗至少3分钟，需进行两次冲洗。加入相应抗体。首先仍是除去PBS溶液，再加入100ul即用型组合一抗15℃-30℃）孵育60分钟，再用PBS溶液对宫颈涂片进行冲洗每次冲洗3


本文编号：3515330