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钙离子通道Cav1.3在子宫内膜异位症发病中的作用机制研究

发布时间:2021-11-24 12:03
  目的:子宫内膜异位症是育龄期妇女的常见疾病,其易“转移”与“复发”的恶性行为与恶性肿瘤相似,既往研究发现钙离子通道抑制剂可抑制肿瘤细胞的增殖与迁移能力,但其是否对子宫内膜异位症的发生与发展具有调控作用尚不明确。本文将研究:1)了解钙离子通道Cav1.3在子宫内膜异位症组织中的表达情况;2)了解钙离子通道Cav1.3对子宫内膜异位症细胞系中Ishikawa细胞生物学行为的影响。方法:用免疫组织化学的方法,对子宫内膜异位症患者异位内膜及正常增生期内膜行免疫化学染色,比较两组Cav1.3蛋白的表达水平;选子宫内膜异位症细胞系中的Ishikawa细胞系,siRNA沉默Cav1.3基因,荧光显微镜对该细胞系的转染效率进行初步检测,并用Real-time PCR与Western blot的方法确定沉默效果;CCK-8实验检测沉默Cav1.3基因后细胞增殖能力,划痕实验检测细胞体外迁徙能力,克隆形成实验检测细胞群体依赖性和增殖能力的改变。结果:1)Cav1.3蛋白表达于组织细胞胞膜中,在正常增生期子宫内膜组织(N)中表达阴性,在子宫内膜异位症组织(C)中呈阳性表达,差异具有统计学意义(P<0.... 

【文章来源】:兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:44 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
Abstract
前言
研究路径
第一部分 异位症组织钙离子通道Cav1.3蛋白表达情况
    1.1 实验目的
    1.2 实验材料
    1.3 实验方法
    1.4 实验结果
    1.5 实验小结
第二部分 验证siRNA靶向沉默Cav1.3基因效果
    2.1 实验目的
    2.2 实验材料
        2.2.1 材料
        2.2.2 仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养技术
        2.3.2 质粒转染及效率初检
        2.3.3 Real-timePCR检测Cav1.3沉默效率
        2.3.4 WesternBlot检测Cav1.3沉默效率
        2.3.5 统计学分析
    2.4 实验结果
        2.4.1 质粒转染效率
        2.4.2 Real-timePCR
        2.4.3 WesternBlot
    2.5 实验小结
第三部分 Cav1.3沉默对Ishikawa细胞生物学行为的影响
    3.1 实验目的
    3.2 实验材料
    3.3 实验方法
        3.3.1 CCK-8细胞增值实验
        3.3.2 划痕实验
        3.3.3 克隆形成实验
        3.3.4 统计学分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 CCK-8细胞增值实验
        3.4.2 划痕实验
        3.4.3 克隆形成实验
    3.5 实验小结
第四部分 实验结果
第五部分 讨论
    5.1 异位内膜中L型钙通道Cav1.3蛋白的表达
        5.1.1 钙离子通道
        5.1.2 L型钙通道Cav1.3
        5.1.3 钙离子与雌激素的非基因转录效应
        5.1.4 内异症病灶组织中Cav1.3蛋白的表达
        5.1.5 靶向沉默Cav1.3基因对Ishikawa细胞生物学行为的影响
    5.2 子宫内膜异位症的治疗新方向
    5.3 局限与展望
第六部分 结论
参考文献
英文缩略词表
在学期间的研究成果
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]新型钙离子通道TRPV6在早期大肠癌中的研究意义[J]. 谢臣武,刘模荣.  现代肿瘤医学. 2017(24)
[2]Cav1.3钙离子通道在成年大鼠耳蜗的表达[J]. 陈金,周良强,褚汉启,陈请国,杜智会,祁繁,刘云,孙彦博,李鹏军,冰丹.  听力学及言语疾病杂志. 2017(06)
[3]45岁及以上子宫内膜异位症相关卵巢上皮性癌的风险因素分析[J]. 何政星,王姝,李战飞,朱兰,冷金花,郎景和.  中华妇产科杂志. 2017 (05)
[4]钙通道和细胞内钙信号对小肠葡萄糖吸收的调节作用及机制[J]. 李玲玉,文国容,金海,徐靖宇,安家兴,庹必光,董辉.  中国糖尿病杂志. 2017(05)
[5]子宫内膜异位症的治疗进展[J]. 邱锐.  中外女性健康研究. 2017(05)
[6]慢性脑缺血对大鼠海马钙通道Cav1.3表达的影响[J]. 郭森,朱江.  承德医学院学报. 2017(01)
[7]腹腔镜卵巢巧克力囊肿剥除术后卵巢储备功能及妊娠率的研究[J]. 苏悦,马志松.  陕西医学杂志. 2016(12)
[8]脑缺血对大鼠大脑皮质中钙通道Cav1.3表达的影响[J]. 郭森,朱江,王永为,杨松鹤,孔祥玉.  解剖学杂志. 2016 (03)
[9]Nav 1.7与L-型钙离子通道在宫颈癌中的表达及临床意义[J]. 李慧,王路芳,吴爱娣,季鑫,武昕.  现代肿瘤医学. 2016(13)
[10]通过环磷酸腺苷信号通路治疗焦虑症的研究进展[J]. 朱春辉.  中国药房. 2015(28)

博士论文
[1]AC/cAMP-PKA介导的磷酸化对小鼠胚胎心肌细胞上的基础L-型钙离子通道的调控作用[D]. 严喜胜.华中科技大学 2011

硕士论文
[1]腹腔镜卵巢子宫内膜异位囊肿剔除术对卵巢储备功能影响的研究[D]. 郭舟群.石河子大学 2016
[2]黄连素通过cAMP-PKA-钙离子通道促进胰岛素分泌的初步研究[D]. 张敏.天津医科大学 2016
[3]心肌Cav1.3钙离子通道与snapin蛋白相互作用的鉴定及其功能初探[D]. 翟溯澜.郑州大学 2008



本文编号:3515939

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