5-Aza-dC和放疗对宫颈癌细胞系的增殖抑制作用与P16、MGMT基因表达的关系探讨

发布时间：2021-11-29 11:23

　　研究背景:宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤之一,发病率高,死亡率高,发病年龄年轻化趋势明显,且其治疗手段的可供选择不多,对其发生发展的分子生物学机制和预防治疗手段的探讨具有极其重要的意义。现有研究表明,p16（cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,CDKN2A）和 O-6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶（O-6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT）均是机体重要的抑癌基因,并且它们均在宫颈癌中存在基因启动子甲基化,但研究同时发现其在宫颈癌中呈现高表达。因此,p16和MGMT在宫颈癌中的作用尚需进一步研究。5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC）是一种 DNA 甲基化转移酶抑制剂,可使一些在肿瘤中高甲基化的肿瘤抑制基因重新表达而发挥抗肿瘤的效应。虽临床上已用于白血病的治疗,但对其在其他肿瘤的治疗作用以及具体机制仍不十分清楚。因此,本研究针对肿瘤抑制基因p16、MGMT,5-Aza-dC和放疗间的关系进行研究探讨,为宫颈癌的治疗寻求新的靶点,探索新的思路。目的... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：98 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

p16基因启动子区CpG岛分析

实验进一步检测５－Ａｚａ－ｄＣ对ｐｌ６和ＭＧＭＴ表达的影响。５－Ａｚａ－ｄＣ处理宫??颈癌细胞系２４ｈ后，收集细胞提取ＲＮＡ，用荧光定量ＰＣＲ检测ｐｌ６和ＭＧＭＴ??在宫颈癌细胞系中的表达水平。结果见图１－４，５－Ａｚａ－ｄＣ处理细胞后，ｐｌ６和??ＭＧＭＴ的ｍＲＮＡ水平在４种宫颈癌细胞系中普遍下降，不过差异并不十分显著。??继续提取细胞蛋白，用Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ检测蛋白水平。结果见图１－５，宫颈癌细胞??系经５－Ａｚａ－ｄＣ处理后，ｐｌ６蛋白水平在ＨｅＬａ细胞中变化不大，但在其他三种细??胞中，与对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ）相比，均表达显著下调，差异具有统计学意义（Ｐ＜??０．０１）。对于ＭＧＭＴ蛋白，其在四种细胞系中均表达下调。从图１－５中可见ｐｌ６??和ＭＧＭＴ在４种宫颈癌细胞系中均表达较高，而用５－Ａｚａ－ｄＣ处理细胞后，ｐｌ６??和ＭＧＭＴ的蛋白水平基本下调，差异具有统计学意义（尸＜０．０１）。因此，在宫??颈癌细胞系中

图１－５?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测蛋白水平。（Ａ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ的蛋白条带图。（Ｂ）相对定量比较ｐｌ６、??ＭＧＭＴ的蛋白表达水平。＊尸＜０．０１，与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－５?Ｔｈｅ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ｐｌ６?ａｎｄ?ＭＧＭＴ?ｗｅｒｅ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ．?（Ａ）?Ｐｒｏｔｅｉｎ??ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｂａｎｄｓ．?（Ｂ）?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌｓ．??３０??

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3526413