miR-206/CDK4信号在卵巢癌生长和化疗增敏中的作用
发布时间：2021-12-16 16:08
探讨miR-206/CDK4信号在卵巢癌生长和化疗增敏中的作用。方法分别提取卵巢癌和癌旁组织总RNA并将它们逆转录成cDNA。实时荧光定量PCR检测miR-206在卵巢癌和癌旁组织中差异表达。在将miR-206 mimic和其特异抑制剂以及它们各自对照分别转染卵巢癌细胞后,MTT和流式细胞仪用于检测细胞增殖和细胞周期的改变。Western blot和荧光素酶报告基因活性分析鉴定miR-206的靶基因和其调控信号通路。miR-206诱导5-Fu对卵巢癌细胞化疗增敏作用被鉴定。结果荧光定量PCR分析显示,miR-206在卵巢癌组织中表达明显下调。在转染miR-206 mimics后,细胞的增殖明显抑制,细胞周期也出现G/S转化障碍。机制分析显示,miR-206 mimic能明显抑制CDK4,c-Myc和CCND1表达。与之相反,在使用miR-206特异抑制剂后,细胞的增殖能力明显恢复,而CDK4表达能明显增高。荧光素酶报告基因活性分析显示,miR-206能直接结合CDK43’UTR。药敏分析显示,miR-206能明显降低IC50值（P<0.001）,从而增加5-Fu对卵巢癌细胞的敏感...
【文章来源】：南方医科大学学报. 2017,37(03)北大核心CSCD
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
miR-206在卵巢癌组织中表达下调Fig.1Down-regulatedexpressionofmiR-206in0TumorNormal
测为miR-206直接靶基因（图5A）。进一步荧光素酶活性分析显示，miR-206能明显抑制CDK43’UTR的荧光素酶活性；与之相反，miR-206in-hibitor后能明显增加CDK43’UTR的荧光素酶活性；在CDK43’UTRmiR-206结合位点突变后，荧光素酶活性不再受miR-206的影响（图5B）。2.6化疗增敏分析为了明确miR-206对5-Fu化疗增敏作用，我们分析了miR-206对于卵巢癌细胞5-FuIC50值的改变。结图1miR-206在卵巢癌组织中表达下调Fig.1Down-regulatedexpressionofmiR-206inovariancancertissues.43210TumorNormaloldsF图2miR-206抑制卵巢癌细胞生长Fig.2miR-206suppressescellgrowthofovariancancercellsinvitro.A:GrowthcurveofcellstreatedwithmiR-206mimics;B:GrowthcurveofcellstreatedwiththemiR-206inhibitor.123DaysDOaluev1.51.00.50CtrmiR-206inhibitorCtrmiR-206mimicsDOaluev1.51.00.50123DaysAB果显示，与对照细胞相比，miR-206mimics能明显降低卵巢癌细胞的IC50值（40.32μmol/Lvs17.13μmol/L，P<0.001，图6）。3讨论卵巢癌是女性生殖系统常见肿瘤之一，预后较差，这与其复杂的发病机理有关。miR-206作为肌肉性miR-1家族成员，是一个骨骼肌特异表达的miRNA，参与了肌肉发育过程。近年来，越来越多的研究发现，miR-206参与了肿瘤发病过程。在大肠癌中，miR-206被报导直接靶击FMNL2［8］和NOTCH3［9］基因，从而抑制大肠癌细胞的生长、游走和侵袭。在非小细胞肺癌中，Sun等发现，miR-206直接抑制c-Met，BCL-2和SOX9诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖、游走和侵袭［10-11］。在乳腺癌中，miR-206能直接靶击Cx43，PKFFB3，Actin-bind-ingproteincoronin1C和cyclinD2蛋?
复杂的发病机理有关。miR-206作为肌肉性miR-1家族成员，是一个骨骼肌特异表达的miRNA，参与了肌肉发育过程。近年来，越来越多的研究发现，miR-206参与了肿瘤发病过程。在大肠癌中，miR-206被报导直接靶击FMNL2［8］和NOTCH3［9］基因，从而抑制大肠癌细胞的生长、游走和侵袭。在非小细胞肺癌中，Sun等发现，miR-206直接抑制c-Met，BCL-2和SOX9诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖、游走和侵袭［10-11］。在乳腺癌中，miR-206能直接靶击Cx43，PKFFB3，Actin-bind-ingproteincoronin1C和cyclinD2蛋白，从而降低了细图3miR-206抑制卵巢癌细胞细胞周期G1/S转化Fig.3miR-206inhibitscellcycletransitionfromG1toSphase.G1:55.25S:25.09G2:19.36CtrMimicselCumbernelCumbern8006004002000G1:59.38S:20.01G2:20.6160050040030020010000204060801000306090http://www.j-smu.comJSouthMedUniv,2017,37(3):393-397·395·
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-181b通过靶向调控N-myc下游调节基因2影响骨肉瘤细胞的迁移和侵袭[J]. 邵建立,李志忠,王亮,焦根龙,周志刚,孙国栋. 南方医科大学学报. 2016(03)
[2]微小RNA-34a通过靶向CD44调节膀胱癌细胞J82周期[J]. 余淦,许凯,许世安,张晓岚,黄倩华,郎斌. 南方医科大学学报. 2015(07)
本文编号：3538434
【文章来源】：南方医科大学学报. 2017,37(03)北大核心CSCD
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
miR-206在卵巢癌组织中表达下调Fig.1Down-regulatedexpressionofmiR-206in0TumorNormal
测为miR-206直接靶基因（图5A）。进一步荧光素酶活性分析显示，miR-206能明显抑制CDK43’UTR的荧光素酶活性；与之相反，miR-206in-hibitor后能明显增加CDK43’UTR的荧光素酶活性；在CDK43’UTRmiR-206结合位点突变后，荧光素酶活性不再受miR-206的影响（图5B）。2.6化疗增敏分析为了明确miR-206对5-Fu化疗增敏作用，我们分析了miR-206对于卵巢癌细胞5-FuIC50值的改变。结图1miR-206在卵巢癌组织中表达下调Fig.1Down-regulatedexpressionofmiR-206inovariancancertissues.43210TumorNormaloldsF图2miR-206抑制卵巢癌细胞生长Fig.2miR-206suppressescellgrowthofovariancancercellsinvitro.A:GrowthcurveofcellstreatedwithmiR-206mimics;B:GrowthcurveofcellstreatedwiththemiR-206inhibitor.123DaysDOaluev1.51.00.50CtrmiR-206inhibitorCtrmiR-206mimicsDOaluev1.51.00.50123DaysAB果显示，与对照细胞相比，miR-206mimics能明显降低卵巢癌细胞的IC50值（40.32μmol/Lvs17.13μmol/L，P<0.001，图6）。3讨论卵巢癌是女性生殖系统常见肿瘤之一，预后较差，这与其复杂的发病机理有关。miR-206作为肌肉性miR-1家族成员，是一个骨骼肌特异表达的miRNA，参与了肌肉发育过程。近年来，越来越多的研究发现，miR-206参与了肿瘤发病过程。在大肠癌中，miR-206被报导直接靶击FMNL2［8］和NOTCH3［9］基因，从而抑制大肠癌细胞的生长、游走和侵袭。在非小细胞肺癌中，Sun等发现，miR-206直接抑制c-Met，BCL-2和SOX9诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖、游走和侵袭［10-11］。在乳腺癌中，miR-206能直接靶击Cx43，PKFFB3，Actin-bind-ingproteincoronin1C和cyclinD2蛋?
复杂的发病机理有关。miR-206作为肌肉性miR-1家族成员，是一个骨骼肌特异表达的miRNA，参与了肌肉发育过程。近年来，越来越多的研究发现，miR-206参与了肿瘤发病过程。在大肠癌中，miR-206被报导直接靶击FMNL2［8］和NOTCH3［9］基因，从而抑制大肠癌细胞的生长、游走和侵袭。在非小细胞肺癌中，Sun等发现，miR-206直接抑制c-Met，BCL-2和SOX9诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖、游走和侵袭［10-11］。在乳腺癌中，miR-206能直接靶击Cx43，PKFFB3，Actin-bind-ingproteincoronin1C和cyclinD2蛋白，从而降低了细图3miR-206抑制卵巢癌细胞细胞周期G1/S转化Fig.3miR-206inhibitscellcycletransitionfromG1toSphase.G1:55.25S:25.09G2:19.36CtrMimicselCumbernelCumbern8006004002000G1:59.38S:20.01G2:20.6160050040030020010000204060801000306090http://www.j-smu.comJSouthMedUniv,2017,37(3):393-397·395·
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-181b通过靶向调控N-myc下游调节基因2影响骨肉瘤细胞的迁移和侵袭[J]. 邵建立,李志忠,王亮,焦根龙,周志刚,孙国栋. 南方医科大学学报. 2016(03)
[2]微小RNA-34a通过靶向CD44调节膀胱癌细胞J82周期[J]. 余淦,许凯,许世安,张晓岚,黄倩华,郎斌. 南方医科大学学报. 2015(07)
本文编号：3538434
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