miR-363-3p对子宫内膜间质细胞生物学行为调控及机制研究
发布时间:2022-01-10 20:34
研究背景及目的子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)(以下简称内异症)是常见的妇科良性增殖性疾病,严重影响着女性健康。内异症的确切病因尚不得知,且无针对病因的有效治疗,多年来始终是学者们的研究热点。MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA),不参与蛋白质的编码,主要通过与mRNA的3’UTR(Untranslated Region)结合降解靶mRNA控制人类的蛋白编码基因。已有大量8940microRNAs被发现在恶性肿瘤性疾病和内异症等良性疾病发生中发挥重要作用。在前期实验中,我们采用高通量测序的方法建立了 Ems中差异性microRNA和mRNA表达谱。测序结果显示:与在位内膜相比,miR-363-3p在异位病灶中显著下调;MsrB3在异位病灶中显著上调。提示miR-363-3p可能参与子宫内膜异位症的发病,且MsrB3是miR-363-3p生物学预测的靶基因。因此本课题选择miR-363-3p为对象,研究其在子宫内膜异位症中的表达、异常表达对子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cells,En...
【文章来源】:中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】:70 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-l.qRT-PCR法检测正常内膜、在位内膜及异位内膜中miR-363-3p的表达水平??
子宫内膜间质细胞表达波形蛋白(Vimentin),而上皮细胞中不表达。应用Vimentin??抗体进行荧光染色,通过染色阳性率判断细胞纯度。经鉴定,细胞纯度达90%以上,??可用于下一步体外实验。(见图2-2)??MU??图2-2.体外培养的子宫内膜间质细胞免疫荧光鉴定A.细胞核染色;B.间质细胞??Vimentin?表达阳性(X400)??23??
??HHI??图2-1.体外培养的子宫内膜间质细胞形态学观察A.第二代子宫内膜间质细胞体外??培养第一天(X200)B.第二代子宫内膜间质细胞体外培养第二天(X200)??二、子宫内膜间质细胞的免疫荧光鉴定??子宫内膜间质细胞表达波形蛋白(Vimentin),而上皮细胞中不表达。应用Vimentin??抗体进行荧光染色,通过染色阳性率判断细胞纯度。经鉴定,细胞纯度达90%以上,??可用于下一步体外实验。(见图2-2)??MU??图2-2.体外培养的子宫内膜间质细胞免疫荧光鉴定A.细胞核染色;B.间质细胞??Vimentin?表达阳性(X400)??23??
【参考文献】:
期刊论文
[1]茎环法与加PolyA尾法PCR在检测MicroRNA时引物设计的策略[J]. 高润石,王红,高艾. 毒理学杂志. 2012(05)
[2]Apoptosis and the target genes of microRNA-21[J]. Lindsey E.Becker Buscaglia. 癌症. 2011(06)
[3]子宫内膜异位症的在位内膜病变研究进展[J]. 仝佳丽,郎景和. 现代妇产科进展. 2010(06)
本文编号:3581373
【文章来源】:中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】:70 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-l.qRT-PCR法检测正常内膜、在位内膜及异位内膜中miR-363-3p的表达水平??
子宫内膜间质细胞表达波形蛋白(Vimentin),而上皮细胞中不表达。应用Vimentin??抗体进行荧光染色,通过染色阳性率判断细胞纯度。经鉴定,细胞纯度达90%以上,??可用于下一步体外实验。(见图2-2)??MU??图2-2.体外培养的子宫内膜间质细胞免疫荧光鉴定A.细胞核染色;B.间质细胞??Vimentin?表达阳性(X400)??23??
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【参考文献】:
期刊论文
[1]茎环法与加PolyA尾法PCR在检测MicroRNA时引物设计的策略[J]. 高润石,王红,高艾. 毒理学杂志. 2012(05)
[2]Apoptosis and the target genes of microRNA-21[J]. Lindsey E.Becker Buscaglia. 癌症. 2011(06)
[3]子宫内膜异位症的在位内膜病变研究进展[J]. 仝佳丽,郎景和. 现代妇产科进展. 2010(06)
本文编号:3581373
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