环氧化物酶抑制剂NS-398联合奥沙利铂对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2017-05-12 02:01

  本文关键词：环氧化物酶抑制剂NS-398联合奥沙利铂对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:宫颈癌是女性发病率最高的生殖系统恶性肿瘤,近年来,宫颈癌的发病率逐年上升,而且呈年轻化趋势,严重威胁女性健康,是临床上迫切需要解决的问题。目前临床上宫颈癌的治疗仍然以手术结合放化疗为主,传统的化疗药物对机体的毒副作用较大,严重影响患者的生存质量,寻找一种疗效理想同时毒副作用小的化疗药物是临床研究的热点。近年的研究表明,环氧化酶-2(COX-2)抑制剂NS-398可以通过抑制COX-2活性抑制肿瘤细胞生长,本课题即研究NS-398和奥沙利铂(L-OHP)以及二者联合对Hela细胞增殖和凋亡的影响,为临床治疗宫颈癌提供一定的理论依据。方法:采用CCK-8实验检测不同浓度的L-OHP和NS-398以及二者联合对Hela细胞增殖抑制率的影响;光镜下观察L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者联合对Hela细胞形态的影响;流式细胞技术检测Hela细胞的凋亡率以及细胞周期,罗丹明染色和免疫荧光双重染色检测L-OHP和NS-398对Hela细胞的凋亡情况;DNA Ladder法检测Hela细胞的晚期凋亡情况;采用caspase-3活性试剂盒检测L-OHP和NS-398以及二者联合应用于Hela细胞后caspase-3活性的改变。结果:1 CCK-8实验结果显示L-OHP和NS-398单独应用于Hela细胞对Hela细胞具有抑制作用(P0.05),且这种抑制作用有一定的剂量依赖性。二者联合作用于Hela细胞对Hela细胞的抑制作用要优于单一用药。2倒置显微镜下可见L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者联合作用于Hela细胞24h后,Hela细胞形态发生了不同程度的改变,皱缩变圆,从瓶底脱落漂浮,细胞破裂,内容物溢出等。3罗丹明染色结果显示L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者联合作用后的Hela细胞24h后,荧光强度均不同程度的增强,尤其以二者联合作用后的为著。4流式细胞仪检测结果显示,L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)以及二者联合作用后的Hela细胞24h后,Hela细胞的凋亡率分别为:(10.3±0.06)%、(10.5±0.14)%、(15.7±0.13)%,与阴性对照组(2.4±0.36)%相比,差异显著(P0.01)。流式细胞仪检测细胞周期结果显示L-OHP和NS-398能阻滞Hela细胞的G1期,细胞进入S期受阻。5琼脂糖凝胶电泳结果显示:L-OHP(10mg/L)和NS-398(60μmol/L)联合作用于Hela细胞48h后可见明显的梯状条带。6 Caspase-3活性检测结果显示60μmol/L的NS-398和10 mg/L的L-OHP以及二者联合作用48h后的Hela细胞的caspase-3被不同程度的活化,10ml/L的L-OHP作用后的Hela细胞的caspase-3活性较阴性对照组升高了1.51倍,60μmol/L的NS-398作用后的Hela细胞的caspase-3活性升高了1.43倍,二者联用后caspase-3活性升高了2.48倍,均具有显著差异(P0.01)。结论:1 L-OHP和NS-398对Hela细胞具有抑制作用,并且抑制作用具有一定的剂量依赖性,二者联用对Hela细胞的抑制作用要强于二者单用。2 L-OHP和NS-398对Hela细胞的抑制作用与诱导其凋亡有关。3 L-OHP和NS-398可以影响Hela细胞的细胞周期,使Hela细胞的细胞周期阻滞在G1期。4 L-OHP和NS-398诱导Hela细胞凋亡与caspase-3活化有关。
【关键词】：NS-398 L-OHP Hela细胞 凋亡
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文缩写9-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-17
• 结果17-20
• 附图20-21
• 附表21-22
• 讨论22-27
• 结论27-28
• 参考文献28-30
• 综述 NS398 抗肿瘤机制研究进展30-41
• 参考文献36-41
• 致谢41-42
• 个人简历42

【参考文献】

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本文编号：358505