SASH1对滋养细胞功能的调控及其在子痫前期发病中的作用机制研究

发布时间：2022-01-19 02:22

　　目的:检测SASH1（SAM-and SH3-domain containing1）基因在子痫前期患者胎盘组织及正常胎盘组织中的表达和定位;研究SASH1基因在调控绒毛外滋养细胞HTR8/SVneo的增殖、迁移和侵袭能力及其在调控细胞凋亡中的作用;探讨SASH1对缺氧环境中培养的HTR8/SVneo细胞迁移及侵袭功能的调控作用及其可能机制,为研究子痫前期提供新的思路和治疗措施。方法:（1）采用qPCR、western blot及免疫组化法检测SASH1在胎盘组织中的表达和定位,并对比其在子痫前期患者胎盘组织及正常妊娠胎盘组织中的表达情况;（2）沉默和过表达SASH1基因,干扰绒毛外滋养细胞HTR8/SVneo中SASH1的表达;（3）采用qPCR法检测沉默和过表达SASH1基因的效率;（4）通过CCK8和Edu增殖实验、Transwell迁移实验、Matrigel侵袭实验以及Annexin V-VGFP细胞凋亡试剂盒,检测沉默和过表达SASH1基因对HTR8/SVneo细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响;（5）体外培养绒毛外滋养细胞HTR8/SVneo,观察常氧和缺氧环境中沉默SASH1... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１Ａ：?ＥＶＴｓ迁移穿过子宫实质组织；Ｂ：?ＥＶＴｓ侵袭子宫螺旋动脉过程；Ｃ：滋养细胞??侵袭不足致子痫前期示意图??

±６．６８＊??ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ?２０?２９．００士２．８０?３６．５０士?１．２４?８３．２５±１０．４９?１５９．２０士?１７．８６??ｔ?０．１３７?７．２６３?Ｌ９８３?９Ｊ５３??Ｐ?０．１１９?０．０００?０．０５３?０．０００??＊Ｐ＜０．０５?ｖｓ?ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ；??３．２各组胎盘标本ＲＮＡ水平的比较??３．２．１正常对照组及子痫前期组的胎盘组织中均有ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ的表达，ＳＡＳＨ１??ｍＲＮＡ相对于Ｐ－ａｃｔｉｎ的表达量如图１－１。??３．２＿２子痫前期组ＳＡＳＨ１的ｍＲＮＡ７Ｋ平高于正常对照组，两组之间相互比较，有??统计学差异（Ｐ＜〇．〇５）；如表１－５。??ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ??０．０７?ｎ??０．０６?，??＝?ｍ?Ｂ??％?０．０５?－?Ｉ?Ｉ??０．０４?Ｉ?｜?Ｉ??｜?０．０３?ｐ?Ｉ?Ｉ?１?｜?Ｉ??＾〇＂ｉｌｌｌＩｌＩＨ?１１１１??＾?＾??图１－１正常对照组与子痫前期组胎盘组织中ＳＡＳＨ１?ｍＲＮＡ的相对表达量??（图中Ｎ１－８为正常妊娠组，ＰＥ１－８为子痫前期组）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｍＲＮＡ?ｉｎ?ｐｌａｃｅｎｔａｓ?ｏｆ?ｎｏｍａｌ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ?ａｎｄ??ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ??１８??

?第一部分?ＳＡＳＨ１蛋白在子痫前期和正常胎盘组织中的表达???３．４免疫组化结果??３．４．１光镜下，ＳＡＳＨ１蛋白在正常对照组和子痫前期各组胎盘组织中均有表达，可??见到ＳＡＳＨ１反应阳性产物为棕褐色颗粒状或点状，主要表达于胎盘绒毛滋养细胞??的胞浆和胞核中（图１－３箭头所示），且ＳＡＳＨ１蛋白在子痫前期组的表达量明显??高于正常对照组。??Ｌ＇?ＯｆＡ?＊?．?？一?乂?＞?ｊ?ｉ?．、??、＇分??－卞?ｊ?＼、今。，：＇?Ｖ?．?．呈??，？々：乂；、．．、１??子痫前期胎盘组织中ＳＡＳＨ１分布（２００Ｘ）?正常胎盘组织中ＳＡＳＩ－Ｉ１分布（２００Ｘ）??图１－３正常胎盘及子痫前期胎盘中ＳＡＳＨ１的表达??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｉｎ?ｈｕｍａｎ?ｐｌａｃｅｎｔａｓ?ｏｆ?ｎｏｍａｌ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ?ａｎｄ?ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ??３．４．２运用Ｉｍａｇｅ－Ｐｒｏ?Ｐｌｕｓ彩色图谱分析系统进ｆｊ■半定量分析，结果显示，正??常对照组与子痫前期组ＳＡＳＨ１蛋白平均光密度不同，且差异有统计学意义??（Ｐ＜０．０５）；与正常对照組相比，子痫前期组ＳＡＳＨ１蛋白的平均光密度增高，说??明ＳＡＳＨ１蛋白在子痫前期胎盘组织中表达增加。如表１－７。??表１－７各组胎盘组织中ＳＡＳＨ１蛋白表达结果比较（［士?ｓ）??Ｔａｂｌｅ?１－７?ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＳＡＳＨ?１?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?ｐｌａｃｅｎｔａ?（?ｘ?ｄｒ?ｓ）??ｇｒｏｕｐ（ｎ＝２０）?Ａｖｅｒａｇｅ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ??ｎｏｍａｌ?（）？?ｉ?１２７士


本文编号：3596035