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胰岛素生长因子2甲基化对高糖诱导滋养层细胞凋亡及PI3K/Akt通路的影响

发布时间:2022-02-20 17:48
  目的探究胰岛素生长因子2(IGF-Ⅱ)甲基化对高糖诱导滋养层细胞凋亡及PI3K/Akt通路的影响。方法体外培养人绒毛膜滋养层细胞系HTR-8/SVneo,随机分为对照组、高糖组、5-杂氮-2’-脱氧胞苷(甲基转移酶抑制剂,5-aza-dc)+高糖组(葡萄糖浓度为50 mmol/L),高糖组及5-aza-dc+高糖组以高糖培养基培养,5-aza-dc+高糖组以5-aza-dc处理后,以巢式甲基化特异性聚合酶链式反应(nMS-PCR)检测各组细胞IGF-Ⅱ甲基化水平;以CKK-8法检测各组细胞增殖情况;以流式细胞技术检测各组细胞凋亡情况,计算细胞相对存活率及凋亡率;以Western blot法检测各组细胞IGF-Ⅱ蛋白、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、caspase-3)、PI3K/Akt通路蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt)表达情况。结果与对照组相比,高糖组细胞相对存活率、IGF-Ⅱ、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0.05),IGF-Ⅱ甲基化水平、细胞凋亡率、Bax、caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),PI3K、Akt蛋白... 

【文章来源】:安徽医科大学学报. 2020,55(05)北大核心

【文章页数】:6 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 试剂
        1.1.2 仪器
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养及分组处理
        1.2.2 巢式甲基化特异性聚合酶链式反应(nested methylation specific PCR,nMS-PCR)检测IGF-Ⅱ甲基化水平
        1.2.3 细胞增殖、凋亡情况检测
        1.2.4 Western blot法检测蛋白表达水平
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 各组细胞IGF-Ⅱ甲基化及蛋白表达水平的比较
    2.2 IGF-Ⅱ甲基化对细胞增殖的影响
    2.3 IGF-Ⅱ甲基化对细胞凋亡的影响
    2.4 IGF-Ⅱ甲基化对细胞凋亡相关蛋白表达的影响
    2.5 IGF-Ⅱ甲基化对细胞PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达的影响
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
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[3]p-Akt对牙龈卟啉单胞菌诱导的人胚胎滋养层细胞凋亡的影响[J]. 郭海盈,任洪芋,季耀庭,江汉,杜民权.  口腔医学研究. 2018(05)
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[6]多发性骨髓瘤细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白7的基因表达及甲基化调控[J]. 刘文华,马艳萍.  中国实验血液学杂志. 2017(03)
[7]高糖环境下beclin2介导的自噬增强绒毛膜滋养层细胞凋亡[J]. 纪璐璐,熊国平,汪琳.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2017(02)
[8]孕鼠叶酸缺乏对子鼠胰岛素样生长因子系统甲基化的影响[J]. 吴蒙蒙,杨凡,屈艺,母得志.  中国当代儿科杂志. 2017(04)
[9]过期流产组织中胰岛素样生长因子-2与H19印记基因的表达[J]. 程露平,洪慧莉,孙睿,杨燕,毕小霞,张敏.  中国妇幼保健. 2016(20)
[10]高糖诱导滋养层细胞内质网应激及凋亡[J]. 丁娟,纪璐璐,徐亚廷,汪琳.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2016(01)



本文编号:3635535

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