皮质醇在多囊卵巢综合征患者子宫内膜胰岛素抵抗中的影响及其作用机制

发布时间：2022-09-17 15:20

　　研究目的:胰岛素抵抗是多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）的一项重要病理生理改变。PCOS患者子宫内膜胰岛素抵抗影响子宫内膜功能,但目前对于子宫内膜胰岛素抵抗的病因机制研究较少。既往研究认为皮质醇的过度累积与糖尿病及胰岛素抵抗的发生密切相关,而皮质醇在PCOS患者子宫内膜胰岛素抵抗中的作用尚不明确。因此,本研究旨在探究皮质醇在多囊卵巢综合征患者子宫内膜胰岛素抵抗中的影响,并进一步探索其对于子宫内膜胰岛素抵抗的作用机制。研究方法1.根据鹿特丹诊断标准纳入PCOS组患者,并进一步分为PCOS合并胰岛素抵抗组（insulin resistance,IR）和PCOS未合并IR组;非PCOS组患者纳入单纯管性因素不孕,正常BMI未合并胰岛素抵抗的患者。2.针对冷冻胚胎移植患者,在充分沟通、知情同意情况下,在取卵后第5天暨hCG日后第7天,对内膜进行轻搔爬,将内膜组织分为4份用于后续研究,或直接用于细胞提取。3.通过临床信息统计分析,统计三组患者的基本资料以及种植率。4.采用免疫检测试剂盒检测内膜萃取样本中皮质醇及可的松水平;采用PCR、Western b... 

【文章页数】：134 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
中文部分
    绪论
    材料与方法
        1 主要试验仪器
        2 主要试剂和溶液
            2.1 常用试剂
            2.2 常用溶液配制方法
        3 研究对象
        4 子宫内膜组织和子宫内膜上皮细胞的收集
            4.1 子宫内膜组织的收集
            4.2 子宫内膜上皮细胞的分离和培养
        5 子宫内膜上皮细胞培养处理
        6 实时荧光定量PCR实验
        7 蛋白质免疫印迹实验
        8 免疫组化实验
        9 免疫荧光实验
        10 细胞膜蛋白和浆蛋白的分离抽提方法
        11 葡萄糖摄取实验
        12 皮质醇及可的松的萃取
        13 皮质醇及可的松的检测实验
        14 血清类固醇激素、葡萄糖以及胰岛素的检测
        15 胚胎种植率计算
        16 统计学分析
    结果
        1 纳入研究对象的一般情况及临床结局
        2 子宫内膜局部皮质醇及可的松的水平
        3 子宫内膜局部11β-HSD1及11β-HSD2 的表达水平
        4 子宫内膜局部IRS-1、磷酸化IRS-1、Akt、磷酸化Akt、PTEN的表达
        5 11β-HSD2在子宫内膜中的表达定位
        6 子宫内膜上皮细胞纯度鉴定
        7 子宫内膜上皮细胞中胰岛素激发的GLUT4 转位及葡萄糖摄取
        8 皮质醇对子宫内膜上皮细胞糖摄取、Akt磷酸化及GLUT4 转位的作用
        9 皮质醇通过上调PTEN降低胰岛素激发的Akt磷酸化及GLUT4 转位
    讨论
    结论
    参考文献
英文部分
    Introduction
    Materials and Methods
        1 The experimental equipment and machines
        2 The main reagents and solutions
            2.1 Commonly used reagents
            2.2 common solution preparation method
        3 Paients recruitment
        4 Endometrial tissue and endometrial epithelial cells collected
            4.1 Endometrial tissue collection
            4.2 Separation of endometrial epithelial cells
        5 Treatment of endometrial epithelial cell
        6 Real-time quantitative PCR experiments
        7 Western blotting
        8 Immunohistochemistry
        9 Immunofluorescence
        10 GLUT4 membrane and cytoplasmic protein extraction
        11 Glucose uptake examination
        12 Cortisol and cortisone extraction
        13 Cortisol and cortisone immunoassay examination
        14 Serum steroid hormone, glucose and insulin examination
        15 Implantation rate calculations
        16 Statistical Analysis
    Results
        1 Demographic features and clinical outcomes
        2 Local cortisol and cortisone levels in the endometrium
        3 Expression of 11β-HSD1 and 11β-HSD2 in Endometrium
        4 Expression of IRS-1, Phosphorylated IRS-1, Akt, Phosphorylated Akt and PTEN in Endometrium
        5 Localization of 11β-HSD2 in Endometrium
        6 Identification of Endometrial Epithelial Cells
        7 Insulin stimulated GLUT4 translocation and glucose uptake in endometrial epithelial cells
        8 Effect of Cortisol on Glucose Uptake, Akt Phosphorylation, and GLUT4 Translocation in Endometrial Epithelial Cells
        9 Cortisol attenuated insulin-induced Akt phosphorylation and GLUT4 translocation via the induction of PTEN
    Discussion
    Conclusion
    Reference
致谢
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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3679477