6-姜烯酚对人宫颈癌细胞E6TP1、甘丙肽和甘丙肽受体2 mRNA表达的作用

发布时间：2022-12-09 04:34

　　研究背景与目的:宫颈癌（cervical carcinoma）是发展中国家最常见的恶性肿瘤之一。现研究发现神经周浸润（perineural invasion,PNI）是导致宫颈癌患者预后不良和复发转移的原因之一。E6靶蛋白1（E6 targeting protein 1,E6TP1）是一种抑癌基因,可通过泛素-蛋白酶体途径被E6蛋白降解,激活Rap1通路,导致肿瘤细胞的增殖和转移,最终诱导宫颈癌的发生和发展。甘丙肽（Galanin）可激发肿瘤细胞中的甘丙肽受体2（GalR2）的上调,生成前列腺素E2（PGE2）,PGE2作为一种有效的运动因子,可起到激发肿瘤细胞的侵袭和转移的作用。在反馈机制中,肿瘤细胞释放的甘丙肽可诱导神经突形成,神经与肿瘤细胞之间相互作用,从而促进PNI的发生。有学者研究发现,E6TP1可通过泛素化蛋白酶体途径被E6蛋白降解,从而上调HPV阳性的人宫颈癌细胞株的甘丙肽和甘丙肽受体2的表达。研究表明:6-姜烯酚（6一shogaol,6S）可将细胞阻滞在G2/M期,抑制宫颈癌细胞的生长。本实验通过检测6-姜烯酚作用于人宫颈癌CaSki、C33A细胞后E6TP1、甘丙肽和... 

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Abstract
英文缩略词对照表
引言
1、实验材料
    1.1 实验细胞株
    1.2 实验药物、主要实验试剂与药品
        1.2.1 实验药物
        1.2.2 主要实验试剂与药品
    1.3 实验器材及耗材
        1.3.1 主要实验器材
        1.3.2 实验耗材
    1.4 实验溶液配制
        1.4.1 6-姜烯酚药物的配制
        1.4.2 0.25%胰酶消化液的配制
        1.4.3 RPMI-1640培养基的配制
        1.4.4 磷酸盐缓冲液(PBS)(0.1mol/L,PH 7.4)的配制
        1.4.5 PMSF(l0mmol/L)的配制
        1.4.6 高纯水的配制
        1.4.7 细胞蛋白裂解液的配制
        1.4.8 荧光水的配制
        1.4.9 5×TBE电泳液的配制
        1.4.10 引物的稀释
2、方法与技术路线
    2.1 实验流程图
    2.2 细胞的复苏及培养
    2.3 细胞的传代
    2.4 细胞接种
    2.5 分组及加药
    2.6 细胞处理
    2.7 总RNA的提取
    2.8 RNA逆转录为cDNA保存
        2.8.1 普通PRC(以管家基因GAPDH为阳性对照)
        2.8.2 电泳检测cDNA质量
    2.9 RT-PCR定量
    2.10 数据收集
    2.11 统计学分析
3、结果
    3.1 RNA的测定
    3.2 实时荧光定量
4、讨论
    4.1 宫颈癌及其复发、转移的因素
    4.2 PNI与宫颈癌
    4.3 E6TP1、甘丙肽和甘丙肽受体2与宫颈癌PNI的关系
    4.4 姜及有效成分6S在治疗肿瘤方面的作用
结论
问题与展望
致谢
参考文献
综述
    参考文献
附录一 ：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果



本文编号：3714833